高效液相色谱法考试答案_第1页
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经典word整理文档,仅参考,双击此处可删除页眉页脚。本资料属于网络整理,如有侵权,请联系删除,谢谢!高效液相色谱仪试卷(满分100分)一、填空题(共52分,每空2分)1、拖尾因子(T)用于评价色谱峰的对称性,除另有规定外,T应在0.95-1.05之间。梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度)流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可。(安捷伦液相),另一类是内梯度装置(高压梯度)。将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度(岛津液相)。如色谱柱需长期保存,反相柱可以贮存于甲醇或乙腈中,正相柱可以贮存于经脱水处理后的正己烷中。保存时要旋紧柱堵头防止有机溶剂挥发导致色谱柱填料干裂、脱落。进样针:应选用液相专用的平头针。流动相pH值应控制在2-8之间。再以硅胶为载体的键合固定相的使用温度通常不超过40°C,为改善分离效果可适当提高色谱柱的使用温度,但不宜超过9、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱。若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。10、高效液相色谱法常用的检测器类型有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器、蒸发光散射检测器、光电二极管阵列检测器等。(任意写4种)二、名词解析(共16分,每空4分)1、基线:是在操作条件下,没有组分流出时的流出曲线。2、保留时间:是从进样到某组分在柱后出现浓度极大时的时间间隔,即从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。3、色谱流出曲线:是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线,又称为色谱图4、梯度洗脱:就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的。三、选择题(共16分,每空2分)B)、B)C))四、简答题(共16分,每空8分)对于反相色谱柱,如使用缓冲液或含盐溶液作为流动性,在试验结束后,应用10倍柱体积(如150mm柱长,约15ml)的低浓度甲醇/乙腈-水溶液(10%-20%)冲洗,使色谱柱内的盐完全溶解洗脱出,再用较高浓度的甲醇/乙腈-水溶液(50%)冲洗,最后用高浓度的甲醇/乙腈-水溶液(80%-100%)冲洗,使色谱柱中的强吸附物质冲洗出来。如流动相中

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