营养器官培养

营养器官培养第一页，共十页，2022年，8月28日第六章营养器官培养

教学目的：掌握植物根、茎、叶培养的一般方法和技术，尤其是茎段培养的方法及其特点，熟悉植物营养器官培养的应用技术。教学重点：1、根的培养；2、茎的培养；3、叶的培养。教学难点：植物营养器官培养的应用。第二页，共十页，2022年，8月28日营养器官培养：指利用植物的根、茎、叶等器官的全部、部分或器官原基进行的离体培养，在无菌的人工环境中经过培养发育最终形成幼苗。第三页，共十页，2022年，8月28日第一节根的培养

一、离体根培养的意义：研究根系生理和代谢、器官分化与形态建成。二、离体根培养的技术：1、根无性系的建立：改良White培养基种子消毒发芽获得无菌种苗取的根尖液体培养，25℃黑暗条件7-10d继代一次，取主根增殖2、离体根培养的试验系统：需特殊装置由液体培养和固体培养两部分构成，根尖部分处于液体培养基中，而根茎部分则插入含有机成分的固体培养基中。三、培养示例：番茄、胡萝卜、蝴蝶兰离体根的培养。第四页，共十页，2022年，8月28日第二节茎的培养

一、茎培养的意义：1、用于无性系快速繁殖：变异率低，增殖快。2、用于脱除植物病毒：提高植物产量和品质3、用于育种：茎尖遗传性稳定，可快速繁殖新品种，加速优良品种推广①传统的无性繁殖：繁殖系数一般为1:10，推广慢；②离体繁殖：不受季节限制，繁殖系数为几十至几百倍，推广快。4、用于形态建成研究：取材便利，培养条件可严格控制，且可排除其它部位的影响，实验重复性强。

第五页，共十页，2022年，8月28日二、茎培养的方法

1、建立无菌材料：（1）母体材料的选择：①母体的选择：欲脱毒材料的品种典型性；外植体健康程度选择。②外植体的大小：根据不同植物材料及培养目的而定，快繁一般为，脱除病毒则要求0.01-1mm。（2）茎尖培养再生植株：外植体消毒茎尖剥离茎尖培养①外植体消毒：70%酒精+0.1%升汞②茎尖剥离：一般在解剖镜下剥离带两个叶原基的茎尖③茎尖培养：常采用MS基本培养基，配合一定的植物生长调节剂。

第六页，共十页，2022年，8月28日二、茎培养的方法

2、茎尖的发育方向及其调节：（1）茎尖的发育方向：①腋芽萌发；②脱分化后产生胚状体；③脱分化后直接产生不定器官；④脱分化后形成愈伤组织。（2）茎尖发育方向的调节：①外植体大小：微型外植体或分生组织趋向于形成愈伤组织；②植物生长调节剂：细胞分裂素与生长素的比值。

第七页，共十页，2022年，8月28日二、茎培养的方法

3、生根成苗及移栽：（1）生根培养：茎尖培养物的生根是成苗的关键，一般胚状体可直接萌发成苗，但腋芽和不定芽则须转入生根培养基上培养成苗。（2）促进试管苗生根的措施：①降低基本培养基无机盐的浓度，一般采用1/2MS培养基或改良White基本培养基；②调节生长素浓度，采用IBA或可促进生根；③添加吸附剂，加入适量活性炭有利于生根；④减少琼脂用量，以支持小苗生长为度，可促进生根。（3）生产用苗的培植：一般试管苗需经过炼苗、假植和定植等过程，以提高其对自然环境条件的适应性。

第八页，共十页，2022年，8月28日第三节叶的培养一、离体叶培养的意义：以叶原基为外植体，可研究叶的形态发生、光合作用、叶绿素的形成及遗传转化等。二、离体叶培养的技术：常用Heller培养基，且对光的依赖性强。取幼叶消毒切成1cm2左右接种（平置，最好叶背朝下）诱导愈伤组织分化形成胚状体、茎、叶、根等。三、培养示例：香石竹、长寿花、杨树、中华猕猴桃、绿巨人、蝴蝶兰叶的培养。第九页，共十页，2022年，8月28日复习参考题：

1、简