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文档简介
化学发光常见问题Coulter常见问题及答疑目录第一部分:学发光基础识
化学发光常见问题第1--17第二部分:器应用部分
第18--74问第三部分项目应用部
第75—107问化学发光常见问题第一部分:化学光基础知1么化发,放、酶比有不?化学发光免分析(ChemiluminescenceImmunoassay,CLIA)是将学发光与免疫反应相结合,用于测微量抗或抗体的种新型标记免疫测定技术。化学发光免分析比放免疫,酶免疫具有更高灵敏度,具备操作简、快速的点,易于标准化作。且测中不使用害的试剂,试剂保存期长用于生学医研究和临实验诊断工,成为非射性免疫析法中最有前途的方法之一。(1与放免(产品较与放射免疫(RIA比化学发避免了放射性核素的污染以及对操人员的伤,大大缩短了应时间,时兼具高敏度的优势。(2与酶免(ELISA)产比较灵敏度与可范围远远于酶免产,兼具ELISA法简便的操方法与较短的反应时间。2么标免技,的三要是么将Ag或Ab用标记物如荧光素、、放射性同位素、化学发光物质等)进标记,在标本中的相应Ab或Ag反应可不必测定Ag-Ab复合物身而测复合物中的记物通过记物的放大用,进一提高了免技术的敏感性。三要素:通在检测系中会使用一种叫标记物(的物质,常记在体上通常会有一分离(separation的过在最后读取信号前需要去仔细注一下分的模式(format3
标免技主有几?主要经历了种标记免技术的发:荧光素(Fluorophores)–FIA放射性同位(Radioisotopes)–RIA酶(Enzymes)–EIA化学发光物-CLIA4ACCESS化发原?分析方法及程ACCESS系采用磁性粒作为固载体,以AMPPD作发光剂,相载体的应用扩大了测定的范围。竞争法、心法等免测定方法为基础。试剂包装采用特的设计,个试剂包5个小室分把不同的剂分开,少了交叉污染,保证了检测质量。抗原抗体结:将包被克隆抗体顺磁性微粒和待测标本加入反应管,标本中抗原与微粒表面的抗结合,再入碱性磷酸酶标记的抗体,经温育形成固相被抗体-原-酶标记抗复合物。洗涤、分离在电磁场进行次洗,很快将未结合的多余抗原和酶标抗体洗去加入底物AMPPD发光:AMPPD被结合在磁性子表面的性磷酸酶催化下迅速去磷酸基因,成不稳定中介体AMPD。AMPD很分解从高能激发态回到低能的稳定态同化学发光常见问题时发射出光,这种化发光持续稳定,可达数小时之久。通过光子阅读系记录发光度,并从标曲线上计出待测抗的浓度。3
化发项的疫原?·原、体特异性结合·分子用(一步、二)竞争结合:步竟争法:TotalT4,Cortisol,Uptake,Digoxin,Theophylline,Total步竟争法:FT4,B12,Folate,FT3大分子采用(一步二步)夹心法ßhCG,hTSH,FerritinProlactin,CEA,hFSHhLHIgE4
一步和二步析法是怎回事?同步和分步按照试剂样品加入顺序孵育的次数步骤清洗分的次数步骤来区分的像一分析法是剂和样品步加入进行一次孵育一次清洗像二分析法是加入样品进行孵育清洗后再入试剂,行第二次孵育和清洗。5
什么是钩状应(hookeffect),如判断及解决?免疫测定的质是抗原体反应,原抗体反应是按一定的分子比例结,当二者例适中时形成的疫反应最烈形成复物或检测的信号与所测的抗原或抗成比例关,但当抗原或抗体其一者过量,免疫反将减弱,测定值呈现假性低值。在化学发光像二步分法一般都避免钩状效应于一步夹心法项目说明书都提到了产生钩状效的上限如绒毛膜促腺激素的钩状效应值是100万mIU/ml.在实工作中遇到测定值与临严重不符结果要考到钩状效应,解决办法是稀释此样。为抗原提高发光强度、快速达到稳定、持续发光。
磁性微相载体,6
什是异抗?病人样品中能自然产一些针对物免疫球蛋白的抗体通常鼠或羊,一般来源于露于这些动物接受过动血清的治分的干扰可以在双单隆夹心法分析模式中引假阳性,可以在克隆多克隆析模式中现假阴性。厂家在试剂产中会加封闭剂,闭剂可以加在反应基质中或整合在剂盒内:(科类),鸟(鸟科)和蛋白,各厂家生产的分析试剂都有可能会不程度的受任何一个化学发光常见问题人血清的影!当遇到临床不符结果时要询问病史看是否有嗜异性体的干扰7
什是质应基质是指的是样品中被分析物以的组分。基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰,并影响分析结果的准确性。目前最用的去除基质效应的方法是,通过知分析物浓度的标准品,同时可能保持品中基质不变,建立一个校正曲线curve
calibration8
稀样时释不为有基效?我们在稀释品时要考到基质效的影响,稀释必须在适当的基质中行,对于大多数测定言,适当基质就是校准品,如果分析物稀释基质效应所含成分度不正确,稀释回率就不能它们进行确的测定,因为它们稀释后会与Bingagent形成新平衡。9
什是AMPDD化结,何光AMPPD一种金刚二螺4,4]二氧己烷的磷酯。经水生成一种稳定的阴离子,该阴离子分时持续发。发光强稳定,与ALP量成比。化学式是4-甲基-4-(3-苯酸盐)-(1,2-螺[4,4]氧己烷3’-刚烷剂中有几试,用是么?有五个仓,FRT4例:R1a:包着链霉亲素的ynabeads**顺性微粒溶于TRIS缓冲[含有蛋白质鸟类、表面性剂、0.125%NaN30.125%ProClin***300]。R1b:含白质鸟类、表面性剂、0.1%NaN3和0.1%ProClin300的化学发光常见问题TRIS缓盐水。R1c:含白质鸟类、表面性剂、0.125%NaN3和0.125%ProClin300的TRIS缓盐水。R1d:三甲状腺原酸-碱性磷酸酶(牛)结合物溶于TRIS缓冲[含蛋白质(鸟类)表面活剂、0.1%0.1%ProClin300]。R1e:结了生物素小鼠单克抗甲状腺素(T4)溶TRIS缓液[含蛋白质(鸟和鼠类)、面活剂、0.125%NaN3和0.125%ProClin300]。以该测试项反应原理明:AccessFree测定两步酶免法定。将结了生物素单克隆抗状腺素(T4)抗体、本、缓冲蛋白溶以及包被链霉亲和的固相加至反应管中。在这首次温过程中,合了生物素的抗4抗体与固及样本内游离T4相结。在反应内温育完后,结合在固相上的物质将置于一磁场内被住,而未合的物质被冲洗除去。然后,将缓蛋白溶液三碘甲状腺原氨酸(T3)-碱性磷酶结合物添至反应管。T3-碱性磷酸酶合物与空缺的抗T4抗体结合位点结。在反应内温育完后,结合在固相上的物质将置于一磁场内被住,而未结合的物质冲洗除去然后,将学发光底物Lumi-Phos*530添到反应管内,由照度计对反应中所产的光进行量。所产光的量与样本内游离T的浓度反比。样本内分析物的量由所储存的点校准曲来确定。何待说书的法限?此章节的内极为重要实验室工人员必须对其进行理解因为它关系到验室能否样本分析结果行正确的释。在解结果时,需参照该病人的整体临床况,包括症状、临床病史以其它测试得的数据其它相应的信息。何解最可告?当样品浓度时,可以告大于最校准品值的结果,有些试剂生产商的测定系通常用亮点调整代替完全准,这样话他们可报告范围是一个拟合而出最高水平而非实际测定值在ACCESS检测系统,用户自己创建了标准曲线,当该准曲线意通过并且质控测被接受,就可以实其可报告的上限。当样本分析所的RLU值高最高校准品时以样本结大于最高准品值的形式报告,多数实验室对多数测定目的分析结果使这种直接告模式,果需要获得确切的测定值,则需要行机外人稀释并重新分析本。何解最可告?所有的定量定在曲线下端通常有一个零标准,该标准允许计算结低至零,测定结果越接近时,测定果就越不么精确。在说明书中给出了项目的测最低下,建化学发光常见问题议以低于该限来报告果。么分析敏?分析零敏度常是对标曲线上的点校准品距零值的2SD值围来进行测计算(而SD值是将零校品作为未浓度样品多管检测后计算均值所得)么功能敏?功能灵敏度Functionalsensitivity)为<20%CV时所能测到的最极限浓度,它反映在实际样品检时所能达精确定量检测极限。何解说书的释收?稀释回收率稀释线性不完全是回事,但是二者可用同一个研究方来检验,进行稀释回收率定首先用需要选取个已知浓度的病人样本在分析目的线性围内对其进行多点释后进行测,如果测得结果与最初的样本稀释系数结相匹配,么就验证了稀释收率与检线性范围稀释线性与回收率的区别在于,将组分析物准品当未知样品行分析,对其检测性范围进行验证。在ACCESS检系在场有几机?化学发光仪列:ACCESS、ACCESS2、DXI600(速200速,50剂位(速度最快达400速)生化免疫一机系列:DXC00i(DXC600+CTA+ACCESS2第二部分:器应用部分想展一新目IL-6详细序什?首先在发光目速查手(或说明)中查到该项目订货信息:试剂定标液质控品稀释液
A16369A16370A16371S0或样品稀释A(81909)激活IL-6:主菜单下[F8]-系统设置;按[F2]-项;在项目列表找到IL-6(210在Enabled打上对勾选择开按[F2]-单选择;将光标点到需设置样类型处,下拉框后出现单位列表;选择所需单,按F1确认将光标右移有效位数,可输入表示小数点后的数;按Back-主菜单注意:在仪和中文电上选择的目单位必须一致,才能保证结果准化学发光常见问题
在主菜单按F5定再按F5标设按F1增加定标液当出现对话后,扫描标液的条码(或手工输字符)按OK确认。然后加载试,定标即。应最多入少在ACCESS与ACCESS2上一次最多加入3,共294试管,记放RV架之前要查是否有松动的RV管。DXI800一次最多可入2袋(2000意将管均分散。载质液意么有影?提前18时将更换的新基质置室温预否则造成光量值偏低而影响有些结夹心法)值偏而有些结(竞争法偏高。载剂注什何响?装载试剂前将试剂轻倒转混匀灰色仓匀浑浊尤其注粘附在壁上试剂载,否则使结果低,但一开使后可混剂以在行装吗试剂可以在器运行中载择试剂加载请后器会有示剩余多长间可进行载,这时仪器会正做测试试剂处理后允许加载。器运行时,什有试盒上有个锁标?这表明仪器在使用这试剂,不更换该盒试剂想道某项在同位间换算数如查?更换该项目单位后定标曲线面的浓度值相应会发生变化可以记录不单位下高度定标点(如S4,S5)的值进行换算探上的声射置什作?超声装置的用:混匀剂、混匀RV内容、检测样液面、清主探针什在装新剂前上颠混匀在装载新的剂包前应轻地上下倒混匀,这样可去除试剂包顶部粘的磁性粒。质更换注事?注意避免污基质液-的表面
不要让基质瓶中的管及基质液盖的内表面接触到任何物体避免使用有石粉的手基质液装上器前,必放置在室平衡18个小时基质液开瓶效期为14天什在打的仪外前要关效检测能即使ACCESS2器的外盖打开后效检测功能(果被打开也可自动运在查系统液路模块时这将导致险。任何候,在打开仪器外盖时,应先关闭用检测功.么候需清病结?如果您的实室要重复用同一样或您发现您的系统软件反应明显变可从数据库中清除病人测试结果您可把软设置成自动完成这项工作。什在装新剂前上颠混匀化学发光常见问题在装载新的剂包前应轻地上下倒混匀,这样可去除试剂包顶部粘的磁性粒。些目定液时有张(卡和卡应用一?这种情况是些项目在级初期时定标液里配两张卡可以用于定标未级项目和升级项目,以雌二为例说明批号800000的试剂名称改E2;批号为722861上的定标液里面有两张黄卡用于(243白卡用于Estrdl(203)以下项目也于此情况游离T、游T4、生长激、甲状腺球蛋白抗体、胚抗原。详细说明请阅试剂盒的说明。定标里三卡如使,有区?该测定能提第三代(超敏TSH)和或第二代速TSH)的结果。FasthTSH测定一个APF修改的检测ID为试名为fTSH2,改后的两种版本的ACCESSFasthTSHprotocol协议将提供校准卡.测试名
测试名
检测号
所用校准卡颜色AccessFasthTSH(modified)FasthTSHHYPERhTSH快速TSH与TSH区:
fTSH2FasthTSHTSH快速hTSHhTSH
246206183
蓝黄白样本量μ55110反应时间(钟)2045分析灵敏度IU/ml0.010.003定液有张,如选,何别AccessPSA校准对可以提供Hybritech(白卡)和WHO(黄卡)种溯源定,供用户自由择。Hybritech校准:AccessHybritechPSACalibrators内分析物可源至生产商的工作用校准品。WHO校:通与一组标准化为PSA(WHO96/670)第一国际标准(1stIS)进比较,对参考校准品ccessHybritechPSACalibrators内的分析物行溯源。HybritechPSA检测围:0.008-150ng/ml
参考范围0-4ng/mlWHOPSA
检测范围:0.008-121ng/ml
参考范围0-3.1ng/ml定标都该意么注意收到TnI定标液后冷冻在-℃或20℃以下环境中前轻轻倒转以彻底混匀成分,防止形成气,每次使完后放在2-8℃稳定期可维持60要再冷冻已开的小瓶请注意计算TnI定标液使量S0与S1点定标液要重复四,所以计定标量:腔量+本量×其他S0与S1都要重复4次项目还:及Prog定标液S0重复4次,重复3。本如果出性围该何释样?化学发光常见问题具体请查“发光项速查部分样本稀分为5种冲洗冲(如TBhCG2,DHE-S),或样本稀释液A(81908),S0(货号样品稀释液A(81908),按照说使用正确的稀释液,否则因基质效会造成实结果偏差。果的异信注如看详细请参阅SOP中异结果信注释部分,就几种常错误信息码进行解释:(1)UNR和IND是因为样本光量值超出0S5(标液最高)的光量子值AccessClassicAccessSYNCHRON
LXi,UniCelDxI800UNR:•Forsandwichassays,whichusepositiveIND:•Forsandwichassays,whichusepositiveslopecurves,theresultisatthelowdoseslopecurves,theresultisthelowdoseendofthecurve(S0)andcannotendofthecurve(S0)andcannotdistinguishedfromasystemfailurebecausedistinguishedfromasystemfailurebecausetherelativelightunit(RLU)readingistootheRLUreadingistoolow.•Forlow.Forcompetitiveassays,whichuse
competitiveassays,whichnegativeslopenegativeslopecurves,theresultlowcurves,theresultisateither:Thehighendendofthedosecurve(S0)cannotbe
ofthedosecurveandcannotdistinguisheddistinguishedfromasystemfailurebecausefromasystemfailurebecausetheRLUreadingtheRLUreadingistoohigh.IND:•Forcompetitiveassaysonly,whichusenegativeslopecurves,theresultisathighendofthedosecurve(S5orhighestcalibrator)cannotbedistinguishedfromasystemfailurebecausetheRLUreadingistoolow.ACCESS
istooloworThelowendofthedosecurveandcannotdistinguishedfromasystemfailurebecausetheRLUreadingistoohigh.ACCESS2、DXI800UNR:于夹法,样本RLU结太低在S0RLU值边缘以致器不能与统错误区。对于竞争法样本RLU结果太高在S0RLU值边缘以致器不能与统错误区。IND于夹心法RLU结太低在S0RLU值边缘以致器不能与统错误区。
对于夹心法样本结果太低在S0RLU值边缘以致仪器能与系统误区分。对于竞争法样RLU结果太高在S0RLU值边缘以仪器不与系统错区分。(2样本RLU结果低在S5定标液最点)RLU值边缘以仪器不能与系统错误分。化学发光常见问题何算、ACCESS2样本尤是标的?总样本量=A样本测量+B样本容死腔量C本主针多吸量
样本检测量指每一个求测试所的样本吸取量的总和。要找每一个检项目相应样本吸取量,请查阅化学发项目速查吸样量分。样本容器死量是指在器中的不被仪器分样吸取的样本量2ml样品杯死量为10.5ml样品死液量为80ul样本主探针吸量为20µL或者5%的检测样量,哪一个数值大就以哪个进行计。总定标液量样检测量×重复次数+B样本容死腔量+C样主探针多吸请注意:一项目重复数为,计算TnI定标液使用量S0与S1点标液都要重复四次,Prog定标S0重4次,重复3。何算样量其定液量?计算足够的样本量总样本量=A本检测+B应管死量+样主探针多量+本容器死量
样本检测量指每一个求测试所的样本吸取量的总和。要找每一个检项目相应样本吸取量,请查阅化学发项目速查吸样量分。反应管死液是指在反管中的不被仪器使用的样本量。对于500µL样本检量,其反应死液量是60。样本主探针吸量为20µL或者5%的检测样量,哪一个数值大就以哪个进行计。样本容器死量是指在器中的不被仪器分样吸取的样本量2ml样品杯死量为10.5ml样品死液量为0ul举例肌钙蛋白检的样本吸量是40检测样本吸取量是55µL。以下举例说如果您使2mL样本杯上述两个项目进行检测,应该如何计算总的所样本量。A
请求测试的的样本吸量(40µL+55µL)
95
对A中数字每500µL需要60µL20µL或5%A中样本数字5.5µL),使用大的一个数字进行计算2样本的死液量见表A-2)总的所需样量
化学发光常见问题6020150µL325µL总定标液量A样检测量×重复次数+B反管死液量样本探针多吸量样本容死液量请注意:一项目重复数为,计算TnI定标液使用量S0与S1点标液都要重复四次,Prog定标S0重4次,重复3。、ACCESS2和DXI800架设置规不为么能用?
对于ACCESS2样品架为了容纳大不同的样容器,仪使用三种不同类型的样品架:13mm(用于1mm和1mm样品试)16抬升(用于16x75mm样品试管16mm(用于16x100mm样试管)系统扫描样架条形码签确认品架上样品容器的类型然后统可以此确吸入样品使用合适的移器插入深。注意事项:可将样品器安装在有正确条形码编号的样品架上。Access2.0mL/13mm样杯边缘:暗绿样品架编号1-400-499仅400-499带有此图标)死体积:150µL样品架:13mm
对于DXI800应如下序进行管类设置。主菜单下按F8]-系统置;选择F1系统设置择F8架子号设置选择F2Racks选择应架子号和应规格样杯、试管定液存件意项?βHCG度存,每次使用间复溶Folate/RBCFolate:开前20度保存Free:开前-20度保存Progesterone:开瓶前20度保存Prolactin:开瓶前20度存注:定液外有温度标,示存件定液冻粉一注意项如CK-MBInsulinTUptake冻干粉定标复溶:复水的水质
加样容器的确度
加样的技术
混匀/转复溶后定标保存:使用适的冷冻存试管有项定失后何处?
正确标签
化学发光常见问题无霜冰箱保➢
当标败,以几常见错代:(1InsuffData由于定标液够或仪器误导致某点浓度定标测试被取消;(2NotFit测得足够数,但软件能将其拟为曲线;(3MaxIter软件能拟合线,但不得出最佳合;(4BadFit软件拟合到佳曲线,曲线未通软件的精密度协议文件;(5CVstd0重复测试的CV%超出范围用于TU)➢
错原分原及骤检查错误信的内容,是否有“QNS系统错误而导致定标失;观察各点结精密度;果精密度好,错误有可能来自某些操作失;再观察是否接近上一次对应的值;检查是否作每日保养每周保养观察定标得的目标值度是否接印在定标卡上的值,如果不是,可通过系设置来修对应的值;(5观RLU值是否曲线平滑升(夹心法)或下降(竞争法如果不是,检查是否定标液位摆错,或者某一浓度的定标液受到污;(6
如果定标曲非常平坦而且RLU很低(夹心法)或RLU值很高(竞法明使用错误的定标液或试剂盒;(7
如果定标曲平坦,且论夹心法竞争法,RLU值均很低则须检查发剂是否用或发光剂路是否正常;(8
如果定标结精密度较,原因可是:缓冲液或发剂液路内入气泡;采样针太脏清洗转盘混功能故障超声系统故;化学发光常见问题与排液或吸有关的泵阀门故障化发项是可使用浆其样类,无影》并不是所有免疫项目可以使用浆具体请参阅项目说明书或项目速查样本型:描述,FT3可使用血清血浆()肝抗凝,对同一患者必须用同一样类型监测。样溶、血化发光果目影吗样本溶血、血、黄疸化学发光目同样是有影响的,不过影响机制影响比色项目不同血对胰岛影响是因样本溶血后红细胞释放一种胰岛素活酶而使本中胰岛素度减少不同项对样本禁忌要求不同具体请查“化学光项目速样本禁忌内样分前理应注意么有以下几点特别注意采血管质量有无失效添加剂是适当,采血员专业水平采血量是否当,是否时进行混,血浆应该8-10次血清应该5次。血清凝固时是否充足离心是否底,离心机是否定期校正。贮存条件是适当。对一测发错如何析不同项目发错误应该照相应方去重点分析原因。2步分析法对传送位置调非常敏感需预处理的目,如:衣原体Chlamydia)红细胞叶酸(RBCFolate)尿可的松(UrineCortisol)需要稀释的目,对精密泵较感。如:AFP(1/20)ortisol(1/9.6)il-TotBHCG(1/200)Myoglobin(1/50)RubellaIgG(1/10)ToxoIgG(1/40)MostID/BVassays高光量子值测试,如CK-MBMyoglobinTroponin-I所有感染性病项目对磁性微粒粘度敏感项目,与剂盒混匀/整有关。:VitB12ChlamydiaRBCFolate/Folate化学发光常见问题结差处流?
是否仅发生病人标本果?是否同时发于病人标与质控标?只发生于病标本时:检查人标本处理过程同时发生于人标本/控标本时:查其它项结果是否异?如果是,检仪器性能态如果只发生1种项目,首先排除该项目感的仪器素如果排除仪因素后,入该特定目故障排除流程为有项定通后试盒仍示色定?这种情况一发生在TSH、PTH、PSA等有两种测模式的项,下面以PSA为说明:在PSA定标液中有Hybritech(白卡)和WHO(黄)两种溯源定标供用户自选择。如选择白卡行定标,将PSA-Hybritech(Test170测试激,PSA-WHO(Test项关,两种测试均激活,即使定标通过后试剂盒仍显红色。的材在仪运中载?对于清洗缓液、废液RV管、试剂可在运行中随时加载,而底物、RV废物袋只在处于Ready才能更,在运行前请检查并加耗材。如查仪的警息?对于ACCESS,请按eventlog键按钮询仪器的有报警信。对于ACCESS2、DXI800事日志Event)选择来显事件日志幕以获得关于Access2、DXI800系统所中生事件的信息。黄色红色
系统产生了个注意事事件。系统产生了个警告事,提示一严重的故障或错误情况的发生这些信息包:可能引起事的原因故障排除指的要点与详细步骤连接。暂(和止Stop)有区?
暂停选择该钮来暂停器,系统完成对当前样品的移液后会停止移。已在进中的样品将继续理。停止选择该钮停止仪。系统停运行并取消任何进行中的检测。在养何运特清洁行序如果使用Access2、ACCESS、DXI800系统来处维生素B(因试剂粘度较)分析,那么在每日工作结束或者仪器八小时或长时间内不处理样品时,都应运行殊清洁例程序。样针过么理测样中凝?装有压力检器的仪器过监测吸样品所需的压力,能够在吸取样品探测主探内的凝化学发光常见问题块。若吸取品所需的力超出了接受的限度,那么检测将被取消并记CLT(凝块重大标记且会记下此事件若同一个品连续发生了两次该错误任何该品未完成检测将被消若同一样品连续生了五次错误那当正在运行的检测分析成时系统将中预定任何其它检并进入未绪模式操人员此时必须初始化系统并且检查清洁或要时替换探头。如使(加试?以Dil-hCG2为例说明方法:主屏幕下8置→F5追测试→F4添加测ReflextTest需追加试如Dil-hCG2Condition中编辑:TβhCG2=OVR1nable处打勾即可对于XI800须进行保留积设置或射体积设。对妇医经对h经常做如定小于1000再动行1这时如设置件?这时条件设公式为:Dil-hCG<=1000如设双条,在-10灰时动行F的射测?Reflex为freePSA条件置为:PSA-Hyb<10中留积Reserve”和ReflexSetup是么事系统可以设为吸取患的额外体和QC样,以便系统产生反射检、下载反射检、再次检测或后的LIS请求额的体积被称为保留体积。当统设定为吸保留体积,将从所有患和C样品中吸取准的保留体并放入保体积样品中。您可以在“ReserveVolumeSetup”(保留积设置)窗口中激活保留体积功能设置吸取样品数量统计死体积和量吸取吸取足够的样品以确保全部保留体足够检测用。果检测要求体积加保体积之和能满足一个反应容器所有的留体积被入一个或个反应容器中统仅用于保体积的样品架上的样品容器中吸取保留体积。您可以IDSetup(样架编号设置)窗口中指保留体积样品架。未指为保留体积样品架应标“非保留体积标签对于新(XP作系统的DXI800以单独进VolumeSetup。的品理序UniCelDxI800系统根据下列标准确定佳处理顺。系统首处理优先级最高的样品。分装样品时指定先级所有样集分装后校品和保养样品将被指定先级如果两或更多的样品集拥相同优先,系统将处理首先分装的样品。如果由于系资源(如试剂盒)可用而导致优先级的测无法开,那么低优先级的检测将先行处理处理顺序标:STAT样校准品样品质控样品患者样品保养TβhCG2(151+与(152+)怎回,何择对于样本含<1000mIU/mL总βhCG的样本行测定,选择βhCG2(151)作为测试名。化学发光常见问题对于含1000mIU/mL总βhCG的样本进行定,选择Dil-hCG2(152)作为测名。两种测定可同一试剂和同一定曲线,定量测定含000–200000mIU/mL的样本,择il-hCG2测。此测试用TβhCG2试剂盒。当需要il-hCG2系统自动用缓液稀释样本并从TβhCG2校准曲线上读取相应的量这一系统通过乘以软定义的稀系数(来算最终测试结果。Dil-AFP属情。如遇TβhCG2(151+做来果示1000的本我用Dil-hCG2(152+重,结又示<1000mIU/mL,么?答:手工稀该样本(按倍、10倍、20倍倍数)后机使用TβhCG2(151+)试,然后换算成原度结果。仪上哪项具自动释能各的释数是少答:有甲胎白(17倍蛋白Fer(10倍(200倍)为么他目仪自动释能主要有两方的原因:是大多数目的检测范围很宽已能满足多数项的临床诊阈值。二是因为稀基质效应影响,并是所有项目都适合用缓冲液稀释。有项升时该意什?为了使项目到更好的能,有些目会升级,在升级后请注意)对应最低件、APF版本(2测代码的改(3对应定液正确条码卡使(4参范围的改(5样量的改变。下面以甲状球蛋白抗升级为例明:甲状腺蛋白抗体名称测试代号传送代号试剂货号定标液货号最低软件版最低APF版本参值标用(ul)
旧TgAb198A683389033895<4.9IU/mL20
新ThgAb227A93A32898A36920ACCESS(3.292.1)DXI800(2.01)ACCESS(1.1.57.1)()DXI800()<4IU/mL10如查仪系版及版本息有用处主屏幕下按8—F1—F1AssayProtocolFile如1.10.5,对于低版本就可能找不一些新升级项目,这需要多A进行升级化学发光常见问题能经改统定间,无响这是不对的如频繁的改系统时会导致系统软件文件的丢失,造成目错误。为有仪不编一些本,101、102占?这有可能是为这些样号被用于maintenance请求要在仪器处stanby时无其他申请,仪器LIS通讯关闭,好数据库备份后清除该号,具体请咨询工程师如运系检?系统检测作每周保养容,运行统检systemcheck)可以检查仪的清洗、匀、底物配、稀释等能,在质结果不好也应不定期运行系统检测。在一个样品上装载4个2升样品,分别加入以下液体:号杯:未稀系统检测号杯:清洗冲液号杯:空样杯4号杯:1:501稀释统检测液(20ul系统检液加10ml操作步骤如:在主菜单下择[F6]-保养程序选择[F1]-装载/卸样品架输入样品架把样品架放转盘选择[F1]-完成选择[F3]-系统检测选择[F1]-系统选择[F1]-开始(运行程需32分钟清洗程序完后,选择F1]-装载/载样品架取出样品,选择[F1]-完成如查、析统测数?
清洗缓冲液查看F6Maintenance-F2SystemChecks-F2SystemCheckData系统检测结范围:1号杯CVWashedRLUsmust12%
进行查看相数据。化学发光常见问题MeanRLUs5000-200003号杯CVSubstrateRLUsbeMeanRLUs5000-90004号杯CVUnwashedRLUsmustbeMeanRLUs4000000-8000000MeanWashedRLUsmustbeSubstrateWashEfficiencymustbe系统检测结分析清洗检测(washed)方法:主采针向个RV中加入150ul统检测,对各RV进3次洗循环。然后在各RV加入200ul光底物,后检测其光值。如果检测结超出范围需检查RV的洗与混系统功能清洁检测(clean)方法:主采针向个RV中各加入150ul清缓冲液对各RV行3次清洗循。然后在RV加入200ul光底物,后检测其光值。检测结果RLU值不能有显衰减。果有衰减则说明由于吸液针清洗不导致交叉染。发光底物检方法:在10个RV中不加入任样本,也不清洗。直向各RV加入200ul光底物,后测定其发光值检测结果mean,SD,CV%后6个RV计算得出检测结果超范围说明检查发光物分配系统或发光检测计。未清洗检测unwashed方法:主采针向个RV中加入1倍释的系统检测液,该RV不清洗。然后向各RV加入200ul发底物。检测结果超范围,说系统检测稀释比例不当或主采样针精密度需检查。清洗效率由Unwashed,Washed,Substrate种检测结计算得出结果超出范,需检查洗系统。洗有根、用是什,何养化学发光常见问题共有7针,第1、5根针用是从侧向RV管中出清洗冲液然后在磁场中进行混匀、清洗,第2、4、6根作用是未结合的抗、抗体及洗缓冲液出。第7针是打出物液的。所以第2、4、6针是较容易脏,在月保中应该清这3根针清洗步骤如打开器上盖在清洗站中较长的针即为吸液针将针架上黑色接头向下按,再顺时旋转即可下吸液针拔去塑料管,用保养盒中专配的针反复刷洗内壁在自来水下冲,直至针无异物,水流呈直线流出。再用蒸馏水冲洗后,将针回塑料管安回支架原,向下一,再逆时旋转即可固定。常于障除帮信息哪?答1-件日(事件日包括了系进程的相关代号和信息如果事日志的按时红色或黄色,立即看信息以确问题,事件日志进入,按F12故障排按钮可以找到更多的信息以及提示您进行的相解决办法可以把事件志打印下作为故障除的纪录。更多的事件志信息和障排除可参阅ReferenceManual第六章-断装置单(从主幕,选择F7诊断置可以显示系统检测的参数或者执相关的诊测试-统检(系统检测以确认系是否运行正常可监测某些系统的执行状。系检测应作为常规保的内容每运行一次系统检测或者个检测可以帮助我们明和解决故当对一个失败的果进行了关的矫正施后要重新运行系统检测以确认仪器功是否正常者是否需要排其他的故。更多系统检的内容参相关章节-(系包含了需你注意的组给结果编码的旗标可以在结果询界面下察看旗标者打印出来旗标可以重大意义旗标,也可以是非重大意义的,这决于系统严重程度从样本详情口,选择F2故障排除以发现多的旗标信息和提示您进行的相解决办法-障排除(议您为每台仪器建议一个纪录如果在处理个故障的时您可以察这个纪录以得与之相的信息,者之前是否发生过-术支持(果问题相严重以至不易判断,或者故障排除信息在手里面没有示以帮助您解决问,联系技支持对DXI800为WASHBUFFERII次完还剩些量如处?因为仪器检WASHBUFFERII量是靠压传感器来应的,可按下述步骤进行压力调节主屏幕按F7—F4—F2—F2—F2,按照仪器提步骤进行可对于废液也按此方法调节。有遇EventLog多次显,样需重几才结,如处?化学发光常见问题原因:血浆维蛋白凝等其他成导致主针堵塞。处理方法:取下主,用一根的不锈钢小刷刷洗次用注射器吸蒸馏水冲洗主针内部再用无水乙醇把主针外擦洗干净重新装回主针若故障仍解决,可新主针。显等SHUT类障如处?原因:反应堵塞。处方法:打仪器前盖,取出第一排hutter传感器所在置处的反应杯,依次作主屏下F7→F2→RVshutter→F8(断→手动孵育带,感觉是有卡杯子夹子断裂,若无调节shutter近左侧处螺丝使shutter复位,若,取出卡住杯子或断的夹子,装好新子,F2复位shutter几次最后进行物清洗,外,若shutter感器脏也会引起此类障报警,用无纤维子擦干净传感器上感应点,或用吸吹干净传器。进样测时F11运后屏上出现白样行何理原因:Tubedetector脏或电压低,样品杯感度低。处方法:打仪器前盖及上盖,用反应杯通后,放入装满空样杯的架子,依次操作主屏下F7→F2→samplecarousel→F2Home样品转盘位→F3MovetoPos转盘转到测位,按F4看一下各样杯的、Mid、Top是否亮若不亮,需要排除样品杯感光度低tubedetector脏或电压低故障,可别采用换样品杯,擦净tubedetector或调整电压来解。如处废子除畅现?虽然仪器提的废物袋量是,经过长时使用后,物袋出口会因反应产物中的蛋白质、电解等引起粘现象,从引起废杯子排出不畅,导致卡杯子障,因此也应定时洗废物袋出或当RVWaste剩余约40时可倾废物袋中的废杯子。常的障710intothe和Nvessel”如处理提示分别代仪器的两传感器赃坏,一般清洁传感器,做HOME系统初始化可排除故,如仍报可调节更换传感。第三部分项目应用部如开VitaminB12,仪器养什需特注的?答:如果您实验室运B12这个项,每下班前需行特殊清程序。或运行B12这个项目后,您要把您的器空闲小时上,您也运行特殊洗程序。叶有清酸红胞叶,何展细叶?对于血清或(素样本以FOL2(167作为测试名对红血球溶血产物以RBC2(168)为测试名,两种样类型使用相同的试剂盒。需定购AccessRedBloodCellFolaeLysingAgent产品目录号A14206,用该血剂溶解全血样本后将血产物上测定,利下边公式计算出红血球叶酸红血球叶酸=溶血产物叶×(细胞压细作步骤请参阅说明书。化学发光常见问题皮醇集意项皮质醇的分呈脉冲式显的昼夜律性泌高峰见于晨6-8小时谷在午夜22-24时。临床上多测定早8、下午时午夜时血浆皮质醇水平。尿皮醇临意?皮质醇是肾腺皮质束带分泌的主要的糖皮质激素浆中游离型和蛋结合型皮质醇进行转游离皮质醇为性部分能进入细胞发挥生理效应蛋白合型皮质约占90%以,主与皮质类固醇结合球蛋(CBG)相结合不能由扩散故不具生理效应仅着游离皮质醇素库的作血浆游离皮醇可被肾小球滤过大分在肾小球重吸收少部随尿排出,尿游离皮醇,其量血浆游离皮质醇的量成正比。由于24小时尿离皮质醇泄量可以有、正确地映肾上腺质的功能状态,因此两者结合测定诊断的价更大。皮醇剂做液质醇,何尿样?可直接做尿样本:进行液样本操时,采集一个2时的液样本至含1硼酸作腐剂的容器中总尿量分混合的样本中取0ml作分析液样混浊或有淀00Xg分离样本5分钟并用上清液进行测定。直进行尿液本分析(意样本类型选择尿液小时尿液样的计算结见下公式尿液(ug/24小时)尿液Cortisol(ug/dl)×24小总尿量(ml)100胰素放验意么,何析果胰岛β细胞能测定试主用于胰岛β细胞的功能状况协助断糖尿病型通常包括(1)胰岛素释放试验:口服75克萄糖或二两馒头,测定餐前及餐后浆胰岛素平空腹正常胰岛素为1.9-23μIU/ml后1小时升为空腹的5-10倍时后恢至空腹水。1型尿病人胰岛素分泌严重缺乏餐后胰岛值分泌也明显增加2糖尿病病人早期空腹胰岛素水可略高或常,晚期往往减低,餐后胰岛素分泌高峰多迟在2-3小时出现。我注到Insulin试盒变红色项有改?UltrasentiveInsulinREF33410请参照PCA-C-E-1043,>=719534剂盒与人血清或血浆(EDTA)样本起使用,在监测病人胰岛素平时应保使用相同样本类型。何称为HYPERsensitivehTSH,第三?贝克曼超敏hTSH测的性能合hTSH测定的“第代”功能敏度规定的要求[0.01–0.02μIU/mL(mIU/L)且批间定CV≤20%]。而快速TSH测定的性能符hTSH测定的“第二”功能灵度规定的求[0.1μIU/mL(mIU/L)批间测定%CV≤20%]。为在床测必须TgAb同测?血清甲状腺蛋白自身体(TgAb)的存对甲状腺球蛋白(Tg)测具有干扰作用,只要是含有gAb,即使是含非常低水平gAb的血,都不用来做g测试。测、TT4时应注什?TT3、TT4是检测状腺功能基本指标,但易受多种因素的影响,总的TT4(TT3)由结合的和离的两部构成后仅占0.5%左右响状腺结合蛋白的因素都可使TT3升高和降FT3是判定甲功态的敏感指标,不受TBG的影化学发光常见问题响。对原性减继性甲,状激和如何变?原发性甲减FT3均,sTSH高;继性甲减:、FT4均低,TSH低或常对hTSH临应有注问?在诊断早期/亚临床的甲或者甲亢态,TSH表现更加敏,在不定状态的个体(正在接受治疗患者的浓度要更可信重调节TSH/FT4的分泌平衡程中,TSH反映慢一些其是对甲低的患者用L-T4要2-3个月才会表现与的协调。系统糖抗CA125、CA199、CA153的字糖类抗原名ACCESS名称TestIDCA153BR15-3Ag193CA199GI19-9Ag159CA125OV125Ag175心标物何心细胞分和放?心肌标志物主要包括肌红蛋白,CKMB和肌钙蛋白。根据这些蛋白质的尺寸大小和所处位置决定其释放的时间小的肌红蛋白存在于细胞质内首先释放存在于核子和线粒体内的CKMB随后释放。而存在于收缩器内结构蛋白cTn要等细胞完全裂解后才会释放,专家一致认为心肌细胞死亡后,cTn才释放。肌蛋复物哪亚单组?肌钙蛋白复物存在于有类型的纹肌细胞中,由三种亚单位组成I和C。其中只有I和T具有心特异性所以可作为心肌异性的指肌钙蛋白合物扮演一个传递Ca信号引起肌收缩的角。外血环肌蛋主要以哪形存?在外周血循中,cTnI可有多种式存在,很多是以复合物的形式存,如二元TnI-TnC复合物TnI-TnT复合,或三TnI-TnT-TnC复物其中二元TnI-TnC合物为主要分。另有量以游离游离cTnT降解氧化的cTnI或磷酸/非磷酸化cTnI形式存。肌蛋-分结如组的肌钙蛋白-I分由200个氨基酸组其肌特异性N'的1~32AA所提供肌钙蛋白-I的子结构不是很稳定,在体内或体外被蛋白水酶所降解常从C'端开始,甚至N'端,最定的部分AA30-110区。整个分子结构中含有2个丝酸,在体内会被蛋白酶A磷酸化磷酸化后的cTnI分子结构会生改变,影抗原抗体结合。另外分子结构的个半胱氨酸,被氧化降,改变结影响抗原抗体的结化学发光常见问题合。肌钙蛋分子表面强阳电荷容易干扰Ab-Ag的合。如,素,一个带负电荷的分子,与cTn结合干扰免疫测。为么体选对钙蛋检的果确十重要由于肌钙蛋-I分子结构的不稳定性,以在进行析设计中抗体识别位点的选择就由为重要直接影响到果的准确抗体识位置必须选择在分子结的稳定区(30-110AA);抗针对所有形式识别(游离的复合的ITC…)实现等分子的检测;抗体选位置不会出现磷酸化和氧化的干扰引不厂生的cTnI试剂所测果一的因什么造成不同厂生产的cTnI试剂所测果不一致的主要原因包括用同的标准(能引起2-20倍差距;抗体不同而出现的抗原识别位点的不同,如游离的IC复合物的TnI或不抗原位点抗干扰能,如:蛋白水解酶,磷酸化,氧化影响和使不同的样品型,如:清,血浆(素或EDTA)如去择判一优秀cTn测试?一个优秀的cTn试剂符合NACB/?FCC/ESC/ACC南中所提及的对检测试的要求们了解其相的一些指如<10%CV值与>99%分值的比值此值越近1(贝克曼库尔特接近反试剂灵敏和精密度的一个综合表现试的抗干扰力,如减少HAMA效应,嗜异抗体其它分析干扰。降低对样品型的要求如可以是血清,浆包括肝抗凝)。样品周转时(TAT)的要求是否到达<小时,对检测试剂来说就考虑分析间是否足短可否使用不会引起干扰的抗凝血浆检测系统是否具有真意义的急功能等。什是析敏和能灵度最低检测浓/极限Minimaldetectableconcentration/limit,MDC/MDL)是反映低可区别于零的浓度,称分析灵度Analytical。功能灵敏度(Functionalsensitivity)为<20%CV时所能检到的最极限浓度它反映在实际样品检测时所达到精确量的检测限。什是位和值>99%位值为示正常人检测结果99%覆盖的这点的值,:AccuTnI为0.04ng/mL。<10%CV值为试剂在确定量检测达到<10%CV所对应的值,:AccuTnI为化学发光常见问题0.06ng/mL。对于肌钙蛋白进行临床诊断来说,在低浓度检测区域有高精度是十分重要的以十分靠的将正人群和低值范围但可检测到的具有临床意义的群区分开来。关肌蛋标品标准的题由于各厂家产的cTnI试剂的检结果的一致性,为了减少相互间的差距,IFCC和AACC联合NIST(美国家标准技委员会共同开发一个cTnI国际标准参比物开发过程分三阶段,为法比较评,确认标准参比物和推荐执行。目,前二个段已结束,但三阶段还有开始。于影响结果的不一致并非仅仅是标品的问题括抗体的选等其它一问题,所,对于评价一个cTn分析试(包括I和T)品是否优秀重的还是看<10%CV值与>99%位值的值是否更近1此是临床意义的要求相符合除肌血起cTnI升外,有些况疾会起升?必须十分清的认识到了心肌缺外,还有一些临床状况会导致心肌损而引起cTn水平的升高例如:外(包括挫伤、切除、击伤、心活检、心手术),充血性心衰(性或慢),高血压,低血压伴心不齐,非脏手术病手术后,肾衰,糖尿病,甲状腺能减退,肌炎,肺塞,脓血症,烧伤,淀粉样变性病急性神经统疾病,心肌损后的横肌溶解,竭等。贝曼的正人上值(是少对于一个特性指标如有一个正健康人群上限值(URL)果低于URL意味没有临意义。目,有2同的URL's建议值,分别是97.5th和99th位值,分别由NACB和ESC/ACC推荐克曼AccuTnI的这二个分位分别是URL97.5thng/mLURL99th:0.04ng/mL。100
切(Cut-off)的概是么最理想的切点是能将二个不同人群完全分开,例如疾病人群和正常人群。而实际状况是人群之间会有一个交叉,所以切点就只能在临床灵敏度和特异性之间寻找一个相对的平衡点,也就是说需符合临床的大多数的需求。101如何来应用AccuTnI的切点?目前,有二个切点通常被建议使用,分别是URL和的点。第一个切点区分正常人群和非化学发光常见问题正常人群,而第二个切点是区分和非AMIAMI的切点是通过ROC曲分析得出,推荐值为0.50ng/mL,并可到达临床灵敏度和94%临床特异性。在进行肌
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