《药物分析》芳酸及其酯类课件

第六章芳酸及其酯类药物的分析Chemicalstructure&featureIdentificationDetectionofspecificimpuritiesinAnalysisofAromaticcarboxylicacids&estersAssayAspirin,Sodiumaminosalicylate&Clofibrate⊙Aromaticcarboxylicacids水杨酸类水杨酸SAsalicylicacid阿司匹林aspirin对氨基水杨酸钠PAS-Na贝诺酯benorilate双水杨酯salsalate⊙苯甲酸类羟苯乙酯ethylparoben丙磺舒probenecid苯甲酸benzoicacid甲芬那酸mefenamicacidsodiumbenzoate⊙特点均有苯环、羧酸或其酯水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基直接与苯环相连除了酸性基团外，各自具有本身的官能团分子中苯环、羧酸和取代基的相互影响，使芳酸的酸性强度各有不同紫堇色赭色↓米黄色↓pH5.0~6.0T.S.FeCl3pH4~6中性溶液鉴别三氯化铁反应碱式苯甲酸铁盐（赭色沉淀）加稀HCl，沉淀分解，生成游离白色⊙重氮化偶合反应具体方法见芳香胺类药物的鉴别⊙氧化反应⊙异羟肟酸铁反应甲芬那酸＋H2SO4深蓝色△黄色并产生绿色荧光随即变为棕绿色Fe/3紫色⊙水解产物的反应⊙分解产物的反应⊙UV特征吸收⊙IR吸收光谱SA溶液的澄清度

酚类和酯类其他副反应产生酯类易碳化物炽灼残渣重金属⊙PAS-Na间氨基酚Ch.P

样品3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl滴定液（0.02mol/L)滴定，生成杂质·HCl（转溶入H2O相，甲基橙指示剂）。滴定液不得过0.30mlUSPHPLC法

C18NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH(含氢氧化四丁基铵1.9g)(425：425：150)254nm检测内标：磺胺

a.杂质对照品法

方法：供试品→供试品溶液杂质对照品→对照品溶液

供试品对照品

判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点。优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强。缺点：需要杂质对照品。

供试品对照品判断：

②供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）

①控制杂质斑点个数，控制杂质种类⊙氯贝丁酯对氯酚（0.0025%）挥发性杂质（0.5%）GC法5%SE-302m160℃，N2FID

杂质以归一化法求得直接滴定法

pKa3~6

的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa6~9

的药物要用非水溶液滴定法中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程易水解本法特点：简单注意点：若SA不合格，不宜采用本法Aspirin丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法水解后剩余滴定法

ResidualtitrationafterhydrolysisUSP23方法：取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4☆滴定度计算0.5规定的硫酸浓度为0.25mol/LT毫摩尔质量两步滴定法

Two-steptitration用于Aspirin片测定片剂中有稳定剂水解产物水杨酸SAHAc枸橼酸Citricacid酒石酸Trataricacid为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法Ch.P.阿司匹林片

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc第二步放冷后，用H2SO4滴定液滴定剩余的NaOHV；

空白滴定消耗H2SO4

V0；(V0-V)

H2SO4则为用于中和水解ASA所需的NaOH☆计算：称取10片重1.8240gCNaOH0.1032mol/L片粉重0.5312gC0.05120mol/L标示量0.1g

V3.02ml

V020.18ml

直接水解后两步

滴定法剩余滴定法滴定法

优点

操作简便水杨酸干扰少

结果准确，避免了游离SA以及片剂中稳定剂的干扰缺点游离水杨酸不能完全不合格时结排除干扰果偏高Ch.P氯贝丁酯的Assay采用两步滴定法⊙双相滴定法Titrimetryintwophases

Ch.P2005用于苯甲酸钠的测定

苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法HCl乙醚(苯甲酸)H2O(苯甲酸钠)0.5mol/L25ml1.5g50ml2d甲基橙

橙红色分出H2O层，置具塞锥形瓶，乙醚层用H2O5ml洗涤，洗液并入锥形瓶，加乙醚20ml，继续用HCl滴定，至水层显持续的橙红色⊙柱分配色谱-紫外分光光度法

ColumnPartitionChromatogr.

ASAcapsule

等制剂除用上述两步滴定法外，最好用色谱法，可以分离酸性杂质和辅料以及稳定剂等，经分离后同时测定ASA与SA如USP用柱分配色谱-UV测定ASACapsuleColumnPartitionChromatography,CPC担体：硅藻土(Celite545)固定相：一定pH的缓冲水溶液流动相：与水不相混溶的有机溶剂(洗脱前必须先用水饱和)200~300mm60mm4mm22mm层析柱玻棉压榨棒350mm21mmCPC-UV法测定ASACapsule

SA测定供试液制备用CHCl350ml洗涤，弃去(洗去ASA)10ml冰HAc-水饱和乙醚液(1→10)(使紫色配位化合物被分解，SA析出)洗脱液收集于已盛有10ml甲醇和2滴HCl的50ml量瓶中，继用30mlCHCl3洗，并稀释至刻度SA对照品溶液：75µg/ml，取10ml

50ml量瓶中盛有：10ml甲醇，2滴HCl和10ml冰HAc-水饱和乙醚液(1→10)，CHCl3至刻度测定：306nm测定供试液和SA对照品液﹡SA与试剂生成紫色水杨酸铁配位化合物，在柱上移动慢，带窄，色泽较深﹡﹡若有Fe3+洗下，黄色影响测定结果

消除干扰方法：迂底部拌有磷酸的硅藻土，生成不溶解的FePO4↓A供试液＜A对照品液L=75(µg/ml)×10m100mg×1000×100%＝0.75%ASA+SA测定供试液制备洗脱5,25mlCHCl3，弃去CHCl3洗脱10ml冰HAc-CHCl3(1→10)**；85ml冰HAc-CHCl3(1→100)，并稀释至100ml对照品溶液50µg/ml

冰HAc-CHCl3(1→100)CPC-UV法测定ASACapsule

测定：280nm空白：CHCl3

﹡NaHCO3使ASA和SA成盐保留于柱上

用CHCl3洗脱的目的：

去除中性或碱性杂质﹡﹡冰HAc酸化的目的：

使ASA游离，易被

CHCl3洗脱含量测定计算公式所取胶囊细粉中ASA(mg)供试品溶液吸收度对照品溶液吸收度CPC技术的类型利用固定相酸碱性的不同进行分离利用药物和固定相起化学反应而进行分离利用生成离子对进行层析分离单纯靠选择流动相进行分离阿司匹林栓Aspirinsuppositories测定法咖啡因乙醇溶液4mg/ml对照品溶液：ASA对照品(约0.15g)50.0ml内标5.0ml供试品溶液：取本品5粒，精密称定()，40~50℃微温熔融，不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量(ASA约0.15g)(W)内标5.0ml50.0ml乙醇50.0ml2.0ml↓2.0ml乙醇50.0ml⊙HPLC血清中ASA&SA的测定

色谱条件C18

5μm150×4.6mm

甲醇-水-正丁醇(30:20:1)经0.5μm滤膜减压过滤后5μlH3PO4超声脱气237nm内标：苯甲酸血清样品的处理血清样品100μl→加入HClO4(30%)50μl、不同浓度ASA&SA对照品稀释液、内标(各浓度均为10μg/ml→混合2min→离心→进样血清ASA，SA和内标物对照品色谱图1032