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文档简介
实验十三、粪便隐血
和尿绒毛膜促性腺激素试验临床检验诊断学教研室一、粪便隐血检查-匹拉米洞半定量法目的
掌握粪便隐血检查的常用方法。原理
血红蛋白在酸及过氧化氢作用下与匹拉米洞反应,产生紫蓝紫红的颜色,据此来进行判读及对阳性结果半定量。器材与试剂:便隐血试剂盒标本:人工大便便隐血试剂盒操作:1.取样直接打开测试卡正面的盖子,用木棒挖取不同部位的粪便检体涂抹在测试卡A窗或B窗的方格内,然后合上盖子。2.将测试卡背面朝上,并打开印有“DevelopmentWindow”的封盖。3.加试剂在方格内滴1滴显色剂A,待试剂完全渗透后,再滴1滴显色剂B。
4.观察结果加入试剂后立即观察颜色变化。
5.结果判断:立即产生紫蓝色,报告为4+。10s内产生紫蓝色,报告为3+。1min内产生紫红色,报告为2+。1-2min内才逐渐产生紫红色,报告为1+。2min内无颜色反应,报告为阴性(-)。6.报告方式:FOBT:阴性或阳性(+-4+)。注意事项:1.粪便标本须新鲜,否则灵敏度降低。2.标本检测时应做阴、阳性对照。3.冬天温度低时测试卡反应可能迟缓,应适当延长观察时间。4.试剂盒不能与氧化剂共同存放,避免直射、潮湿。5.检验前2天禁食动物血、叶绿素、铁剂、VitC等。6.每次使用后拧紧瓶盖,以免试剂挥发。二、尿绒毛膜促性腺激素检查目的掌握尿绒毛膜促性腺激素检查的方法。原理应用双抗体夹心法及免疫层析法,尿液中的hCG先与包被在试带一端硝酸纤维膜上的胶体金标记的鼠抗人β-hCG单克隆抗体结合,再与吸附在玻璃纤维膜上的羊抗人hCG多克隆抗体结合,形成金标鼠抗人β-hCG单抗-尿hCG抗原-羊抗人hCG多抗的双抗夹心式复合物,显现出红色反应线,同时游离的胶体金标记的鼠IgG随尿上行至试带末端的包被有羊抗鼠IgG抗体区带处,形成抗原抗体复合物,显现红色质控线。hCG-单克隆抗体胶体金试验图示1、金标鼠抗人β-hCG(单抗)2、金标鼠IgG羊抗人hCG(多抗)
羊抗鼠IgG对照线检测线hCG-单克隆抗体胶体金试验图示尿中hCG的β链金标鼠抗人β-hCG单抗羊抗人hCG多抗-尿hCG-β-hCG单抗结合β-hCG单抗—尿β-hCG复合物金标鼠IgG-羊抗鼠IgG金标记鼠IgG尿液尿HCG的链与检测线中的羊抗人HCG多抗的链结合试剂试剂盒
标本新鲜尿操作:
1.插入试带将测试带标有箭头的一端插入尿液中,插入尿液中的深度不可超过标志线。5秒后取出平放。2.观察结果
5min后肉眼观察。3.结果报告:阳性:两条紫红色线。阴性:一条紫红色线。试带失效:无紫红色线或仅在检测线出现一条红色线。优点:简便、快速、灵敏度高、无污染,可室温保存,有效期长等。注意事项:1.尿液要
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