标准解读
《GB/T 31800-2015 李痘病毒检疫鉴定方法》是一项国家标准,规定了用于检测和鉴定李属植物中李痘病毒的方法。该标准适用于进出口贸易、国内调运以及科研教学等领域对李属植物材料进行李痘病毒的检疫与鉴定。
根据此标准,李痘病毒(Plum pox virus, PPV)是一种严重影响李属植物健康的病原体,能够导致果实产量下降及品质变差。本标准提供了多种技术手段以实现对该病毒的有效识别,包括但不限于酶联免疫吸附测定法(ELISA)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)等分子生物学方法。
在实际操作过程中,首先需要按照规范采集待测样品,并确保样本处理符合要求;其次选择合适的技术路线开展实验分析;最后依据实验结果判断是否存在李痘病毒感染。此外,还详细列出了不同检测方法的具体步骤、所需试剂材料及其质量控制措施等内容,为实验室工作人员提供了明确指导。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2015-07-03 颁布
- 2015-11-27 实施
文档简介
ICS6502001
B16..
中华人民共和国国家标准
GB/T31800—2015
李痘病毒检疫鉴定方法
DetectionandidentificationofPlumpoxvirus
2015-07-03发布2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T31800—2015
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC271)。
本标准起草单位中华人民共和国宁波出入境检验检疫局中华人民共和国广东出入境检验检疫
:、
局中国检验检疫科学研究院
、。
本标准主要起草人陈先锋张慧丽陈定虎张吉红徐瑛郭立新闻伟刚杨红霞杜洪忠吴品珊
:、、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T31800—2015
李痘病毒检疫鉴定方法
1范围
本标准规定了李痘病毒的免疫学和分子生物学检疫鉴定方法
。
本标准适用于植物材料包括无性繁殖材料组培苗种子花和果实中李痘病毒的检疫鉴定
,、、、。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析试验室用水规格和试验方法
GB/T6682
植物病毒免疫电镜检测方法
SN/T1840
3仪器设备和主要试剂
31仪器设备
.
普通仪实时荧光仪酶标仪电子天平电泳仪电泳槽凝胶成像系统水
PCR、PCR、、(1/1000g)、、、、
浴锅台式高速冷冻离心机超低温冰箱超净工作台高压灭菌锅制冰机微波炉涡旋振荡
、、-80℃、、、、、
器可调式微量移液器及相应的无吸头无
。(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)RNase、
离心管管和研钵等
RNase、PCR。
32主要试剂
.
除特别规定外所有实验用试剂均为分析纯实验用水应符合中相关规定
,,GB/T6682。
焦碳酸二乙酯液氮三氯甲烷异丙醇乙醇β巯基乙醇反转录酶
Trizol、(DEPC)、、、、、-、RNA、
Taq聚合酶相对分子质量标准物溴化乙锭琼脂糖溴酚蓝等双抗体酶
DNA、SYBRgreenI、DNA、、、。
联免疫吸附测定方法检测试剂配制方法见附录中
(DAS-ELISA)BB.1。
4检疫鉴定方法
41症状检查
.
仔细检查植株的叶片及花果实果核是否有褪色环斑畸形等可疑症状如果出现了典型症状参
、、、、,(
见附录可采集表现症状的花叶片或果实进行后续检测
A),、。
42双抗体酶联免疫吸附测定方法DAS-ELISA
.()
具体操作步骤见附录
DAS-ELISAB。
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