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项目二α—淀粉酶的制备及应用班级：学号：姓名：指导老师：淀粉酶属于水解酶类，是催化淀粉、糖原、糊精中糖苷键水解的一类酶的统称。此类酶广泛存在于植物和微生物中。根据对淀粉的作用方式不同，可将淀粉酶分为α—淀粉酶、β—淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、脱支酶。α—淀粉酶是一种内切酶，其相对分子量约50000左右作用于淀粉时，可从淀粉分子内部随机切开α—1，4糖苷键，不能切开α—1，6糖苷键以及与α—1，6糖苷键相连的α—1，4糖苷键，但能越过支点切开内部的α—1，4糖苷键。其水解产物中除含葡萄糖、麦芽糖外还含有具有α—1，6糖苷键的极限糊精含α—1，6糖苷键的具葡萄糖残基的低聚糖。α—淀粉酶α—淀粉酶广泛分布于动物、植物及微生物。微生物的酶几乎都是分泌性的。此酶以Ca2+为必需因子并作为稳定因子，既作用于直链淀粉，亦作用于支链淀粉，无差别地切断α—1，4链。因此，其特征是引起底物溶液粘度的急剧下降和碘反应的消失，最终产物在分解直链淀粉时以麦芽糖为主，此外，还有麦芽三糖及少量葡萄糖。另一方面在分解支链淀粉时，除麦芽糖、葡萄糖外，还生成分支部分具有α—1，6键的α—极限糊精。一般分解限度以葡萄糖为准是35-50％，但在细菌的淀粉酶中，亦有呈现高达70％分解限度的。α—淀粉酶分布α—淀粉酶通常在PH5.5—8.0时稳定，在PH4.0以下易失活其作用的最适PH为5.0—6.0，但不同来源的酶其最适PH值差别很大。动物的α—淀粉酶在氮离子存在时其最适作用PH为7.0，高等植物在PH3.6以下时失活，耐酸性的α—淀粉酶最适作用PH为4.0左右，在PH2.5—6.5稳定；非耐酸的α—淀粉酶最适PH为6.5左右，在PH5.5—9.5稳定。1.PH值对酶活性的影响温度对酶活性有很大影响，温度升高，酶的反应速度就增加，一般每升高十摄氏度，反应速度可增加2—3倍，但是大多数酶都是蛋白质，温度过高则可导致蛋白质变质，从而使酶失活。在一定条件下，在某一温度时酶的反应速度最大。这使得反应速度是最适合反应温度。2.温度对酶活性的影响1.菌种：枯草芽孢杆菌JD—32生产法2.仪器：培养皿、试管、发酵罐、灭菌锅、振荡培养箱、高速冷冻离心机实验器材工艺流程1.培养基的制备与灭菌发酵培养基：蛋白胨5g，酵母膏2.5g，葡萄糖0.5g，可溶性淀粉2.5g，KH2PO41g，MgSO4.7H2O0.25g，CaCl2.2H2O0.1g,H2O500ml，PH7.0。分装与100ml锥形瓶中，每瓶50ml，121℃灭菌20min。实验步骤将菌种接种于培养基斜面，35℃培养三天，然后转接到摇瓶种子培养基，摇瓶培养一定时间，当菌体进入对数生长期时，以0.5％接种量接入固体培养基，在厚层通风制曲箱内，通风保持37—42℃，培养48小时出去风干。2.接种与产酶培养麸曲用1％食盐水3—4倍浸泡，3

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