微生物学南京大学生命科学学院

微生物学王睿勇南京大学生命科学学院wangry@2011/1绪论微生物一切肉眼看不见或难以看清、必须借助显微镜来观察和研究的微小生物的总称，包括形体微小的单细胞、个体结构简单的多细胞以及无细胞结构的低等生物少数成员肉眼可见大型真菌纳米比亚硫磺珍珠菌：直径100-750微米2011/1微生物类群十分庞杂，形态大小、结构差异巨大主要类群有：细胞结构细胞核微生物类群无细胞结构无病毒亚病毒拟病毒类病毒朊病毒有细胞结构原核古细菌（真）细菌真核真菌酵母菌霉菌蕈菌藻类原生动物2011/1

下列各项中属于原核生物的是＿＿。A、蓝藻，支原体B、衣原体，噬菌体C、衣藻，金鱼藻D、放线菌，霉菌真菌通常是指＿＿。A、所有的真核微生物B、具有丝状体的微生物C、霉菌、酵母菌和蕈菌D、霉菌和酵母菌下列物种之间相似程度最大的一组是＿＿。A、疟原虫，血吸虫，蚊子B、痢疾杆菌，酵母菌，青霉菌C、蓝藻，硝化细菌，硫细菌D、水稻，水蛭，水绵2011/1微生物分布微生物无处不在，我们无时不生活在“微生物的海洋”中细菌数亿/g土壤每张纸币带细菌：900万个人体体表及体内存在大量的微生物口腔：细菌种类超过500种肠道：微生物总量达100万亿皮肤表面：平均10万个细菌/cm2粪便干重的1/3是细菌，每克粪便的细菌总数为：1000亿个提示：与人体相关的一些基本微生物学数据要记住2011/1微生物是人类的朋友微生物是自然界物质循环的关键环节体内的正常菌群是人及动物健康的基本保证帮助消化提供必需的营养物质组成生理屏障微生物可以为我们提供很多有用的物质有机酸、酶、各种药物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、酱油等建立在微生物学基础上的现代生物技术2011/1少数微生物也是人类的敌人14世纪，鼠疫耶森氏菌引起的鼠疫导致欧洲1/3总人数（2500万）死亡目前，肺结核、霍乱等卷土重来；艾滋病大规模传播；新的疾病不断出现：疯牛病、军团菌病、埃博拉病毒病、大肠杆菌O157新致病株、SARS（2003）、禽流感（2004)、甲型H1N1流感（2009），对人类造成巨大威胁提示：重要疾病的病原微生物大的类型一定要记住，还包括有乙肝、结核病、梅毒、疟疾2011/1以下哪些病是由病毒引起的?A、结核，脚气B、禽流感，乙型肝炎C、地中海贫血，流感D、艾滋病，梅毒下列哪几项是病毒引起的疾病？A、脊髓灰质炎、腮腺炎B、流感、艾滋病、肝炎C、灰指甲、脚癣、肺结核D、鸡瘟、狂犬病、烟草花叶病2011/1微生物学研究微生物在一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异以及微生物的进化、分类、生态等生命活动规律及其应用的一门学科微生物学的界定研究对象个体微小研究技术具有共性（无菌技术、培养基应用、分离技术、纯培养等），显著区别于动、植物研究2011/1微生物学发展历史微生物的发现列文虎克：荷兰人1676年，首次观察到了细菌制作了419架显微镜或放大镜，放大倍数：50-266倍微生物的奠基巴斯德科赫提示：列文虎克、巴斯德、科赫贡献要记住2011/1巴斯德的贡献发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说：

曲颈瓶试验免疫学——预防接种：狂犬疫苗巴斯德消毒法：60-65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物2011/1科赫的贡献微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养流动蒸汽灭菌染色观察和显微摄影对病原细菌的研究作出了突出的贡献证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌发现了肺结核病的病原菌（获诺贝尔奖）提出了证明某种微生物是否为病原体的基本原则——科赫法则提示：巴斯德、科赫贡献及其实验设计是这部分重点2011/1首创用明胶固体培养基分离细菌的科学家是＿＿。A、L.PasteurB、R.KochC、A.FlemingD、J.Lister巴斯德采用曲颈瓶试验来验证下列哪种学说?A、驳斥自然发生说B、证明微生物致病C、认识到微生物的化学结构D、提出自然发生说2011/120世纪微生物发展重要事件1928Griffith发现细菌转化1929Fleming发现青霉素1944Avery等证实转化过程中DNA是遗传信息的载体1953Watson和Crick提出DNA双螺旋结构1961Jacob和Monad提出操纵子学说1977Woese提出古生菌是不同于细菌和真核生物的特殊类群1982-1983Prusiner发现朊病毒1995第一个独立生活的细菌(流感嗜血杆菌)全基团组序列测定完成提示：整个微生物学发展过程中重要事件很多，以上这些必须记住2011/1我国微生物学的发展与贡献1950年代，汤飞凡：沙眼病原体（衣原体）的分离和确证1970年代，维生素C二步发酵法第一步：采用生黑葡萄糖杆菌或弱氧化醋杆菌，将D-山梨醇转化为L-山梨糖第二步：采用氧化葡萄糖杆菌和芽孢杆菌混合发酵，将L-山梨糖转化为1-酮基-L-古龙酸，再经化学转化为维生素C1999年，泉生热孢菌全基因组序列测定2011/1微生物特点个体微小杆菌的平均长度：2微米面积/体积比：人=1，大肠杆菌=30万这样大的比表面积特别有利于它们和周围环境进行物质、能量、信息的交换。微生物的其它很多属性都和这一特点密切相关结构简单无细胞单细胞简单多细胞2011/1代谢快速消耗自身重量2000倍食物的时间大肠杆菌：1小时人：500年繁殖快速大肠杆菌代时：20分钟一头500kg的食用公牛，24小时生产0.5kg蛋白质；同样重量的酵母菌，24小时可以生产50000kg优质蛋白质2011/1食物广泛纤维素、木质素、几丁质、角蛋白、石油、甲醇、甲烷、天然气、塑料、酚类、氰化物、各种有机物易于培养分布广泛几千米的地下数十公里的高空极端环境：强酸、强碱、高热、常年封冻的冰川提示：围绕降解特定化合物的菌株筛选可能作为实验设计题目2011/1种类繁多微生物种数多微生物的生理代谢类型多代谢产物种类多抗逆性强抗热：某些芽孢，加热煮沸8小时才被杀死抗寒：-12℃~-30℃的低温生长抗酸碱：细菌能耐受并生长的pH范围：pH0.5-13耐渗透压：蜜饯、腌制品、饱和盐水中都有微生物生长抗压力：有些细菌可在1400个大气压下生长2011/1细菌芽孢在普通条件下最长可存活＿＿。

A、几小时B、几天C、12个月D、几年及至几十年2011/1容易变异休眠长：最古老芽孢——2.5亿年起源早38亿年前，生命在海洋中出现26亿年前，陆地上就可能存在微生物2011/1微生物形态结构与主要类群特征特征内容培养特征菌落特征：形状、大小、颜色、隆起、质地、光泽、色素细胞形态形状球形、杆状、螺旋形、丝状、分枝、特殊形状大小细胞直径、宽度排列单个、成对、成链、特殊排列方式特殊细胞结构芽孢有无芽孢、芽孢形状、位置、孢囊是否膨大鞭毛有无鞭毛、着生位置、数量孢子形状、着生位置、数量、排列其他糖被、细胞附属物、超微结构细胞壁、内膜系统、孢子表面特征细胞内含物异染颗粒、PHB、硫粒、伴胞晶体、气泡等染色反应革兰氏染色、抗酸性染色2011/1原核生物与真核生物比较遗传物质原核生物：双螺旋DNA构成一条染色体，仅形成一个核区，没有核膜包被，无核仁，无组蛋白与之结合，存在质粒真核生物：双螺旋DNA构成一条或一条以上的多条染色体，形成一个真核，有核膜包被，有核仁，有组蛋白与之结合；细胞器如线粒体、叶绿体携带有自身的DNA，可自主复制有性生殖原核生物：无减数分裂，只有染色体的一部分遗传重组真核生物：减数分裂，全部染色体参与遗传重组原核生物细胞质有细胞膜包围，细胞膜大量褶皱内陷于细胞质中形成内膜系统，不含其他分化明显的细胞器；真核生物细胞质有细胞膜包围，细胞膜不内陷，内含多种细胞器，细胞器有各自膜包围，细胞器膜与细胞膜之间无直接关系蛋白质合成原核生物：在核糖体进行，核糖体为70S，由50S和30S两个亚单位构成真核生物：在核糖体进行，核糖体为80S，由60S和40S两个亚单位构成，细胞器的核糖体为70S提示：很重要的部分，要牢记2011/1原核细胞与真核细胞的不同，表现在：A.原核细胞基因组的大小仅有真核生物基因组大小的一半B．原核细胞具有单链的DNA分子C．原核细胞中与DNA结合的蛋白质较少，而且没有核膜包裹D．原核细胞具有RNA而不是DNA

原核生物

A．具有细胞器，但不具有细胞核B．能产生ATP，能独立进行生命过程C．细胞壁含几丁质D．大多具有环状DNAE．都是厌氧生物2011/1原核细胞的特点是＿＿。A、没有核膜，遗传物质集中在一个没有明确界限的低电子密度区，称为拟核。B、DNA为裸露的环状分子，通常没有结合蛋白。C、没有恒定的内膜系统。D、核糖体为70S型，和真核细胞叶绿体、线粒体的相似。2011/1细菌形态基本形态：球形、杆状、螺旋形杆菌最常见，其次球菌不同球菌细胞分裂时，会形成不同空间排列方式，可作为分类依据杆菌的排列方式常因生长阶段和培养条件发生变化，不作为分类依据螺旋形：三类：弧菌、螺旋菌、弧菌：螺旋＜1圈，霍乱弧菌、蛭弧菌螺旋菌：螺旋2-6圈，迂回螺菌螺旋体:螺旋＞6圈，梅毒密螺旋体、钩端螺旋体其他形态：柄细菌、支原体、球衣菌、星形菌、方形菌提示：注意球菌和杆菌排列方式作为分类依据方面的不同2011/1细菌的大小一般细菌大小范围球菌：直径0.5-1μm杆菌：0.5-1μm（直径）×1-3μm螺旋菌：0.3-1μm（直径）×1-50μm最小细菌：尿结石纳米细菌，直径50nm，与病毒大小类似，3天分裂1次最大细菌：纳米比亚硫磺珍珠菌：直径100-750微米提示：微生物大小的计量单位一般是微米；最大、最小细菌特例要记住2011/1绝大多数细菌的直径为＿＿。A、1～10毫米B、1～10微米C、1-10纳米D、10毫米以上细菌的测量单位是＿＿。

A、nm

B、μm

C、mmD、cm2011/1细菌细胞结构基本构造：细胞壁、细胞膜、间体、细胞质和核区，为所有细菌细胞共有特殊构造：糖被、鞭毛、芽孢、孢囊、菌毛等，只在某些种类细菌中出现，具有特定功能提示：细胞壁结构要重点掌握，其他结构要了解基本特征2011/1细胞壁包围在细胞表面，内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧、略具弹性的结构，占细胞干重10%-25%，可通过质壁分离、电镜观察、制备原生质体后细胞形态的变化，加以确定功能固定细胞外形和提高机械强度细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需渗透屏障，阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质进入细胞，保护细胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物质的损伤细菌特定的抗原性、致病性以及对抗生素和噬菌体的敏感性的物质基础细菌细胞壁具有多样性2011/1革兰氏染色细菌学研究中最重要的染色方法。根据革兰氏染色，细菌分为两大类:革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）G+和G-细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫和药物敏感性等方面都呈现明显差异2011/1G+细菌、G-细菌和支原体比较G+细菌G-细菌支原体细胞壁20-80nm肽聚糖层构成2-7nm肽聚糖层和7-8nm外膜构成无细胞壁细胞形态球形、杆状、丝状，分枝球形、杆状、螺旋状、丝状形态多变；丝状，能形成分枝繁殖裂殖裂殖；某些种类出芽出芽、断片繁殖、裂殖代谢化能异养光自养、化能自养、化能异养化能异养运动性通常不运动；运动类型具周生鞭毛运动/不运动；鞭毛着生方式多样；可有过轴丝运动；滑行通常不运动附属物通常缺乏菌毛、柄缺乏内生孢子某些种类形成不形成不形成2011/1革兰氏染色流程初染媒染脱色复染提示：革兰氏染色基本步骤及关键点应掌握2011/1

革兰氏染色的关键操作步骤是＿＿＿。A、结晶紫染色B、碘液固定C、乙醇脱色D、复染在细菌学中革兰氏染色法的染色过程中，下列操作不正确的是＿＿。A、制作细菌热固定涂片B、用含I2的乙醇溶液再染色后，然后用乙醇脱色C、用结晶紫染色后冲洗D、用蕃红(藏红)复染大肠杆菌经革兰氏染色后，菌体应呈＿＿。A、无色B、红色C、黑色D、紫色2011/1G+：厚度大，化学组分简单：90%肽聚糖+10%磷壁酸G-：外膜和肽聚糖层组成，化学组分复杂：肽聚糖、脂多糖、磷脂、蛋白质等2011/1肽聚糖细菌细胞壁特有成分G+：三部分组成——聚糖（NAG和NAM通过β-1，4糖苷键连接）、四肽尾、肽桥G-：两部分组成——聚糖、四肽尾。连接方式：甲肽尾第四位氨基酸（D-Ala）与乙肽尾第三位氨基酸（DAP，二氨基庚二酸）直接相连原核生物所特有的已糖溶菌酶作用位点提示：细菌中独有的成分必须了解2011/1

溶菌酶广泛的存在于正常体液中，其作用是对细菌细胞壁产生水解引起溶菌杀死功效，所以＿＿。A、一切细菌都可以被杀死B、可以抑制一切微生物C、只对革兰氏阳性菌有效D、对革兰氏阴性菌无效E、只对没有荚膜的细菌才有效溶菌酶水解肽聚糖的作用位点是＿＿＿。A、不同的多糖链之间的肽桥B、四肽短链与N-乙酰胞壁酸之间的酰胺键C、N-乙酰胞壁酸与N-乙酰葡萄糖胺之间的β-1,4糖苷键

2011/1肽聚糖结构的多样性肽聚糖结构中，聚糖结构是一样的，四肽尾通常只有1个氨基酸差异，即LysDAP。但仍有超过100种的肽聚糖，在这一“肽聚糖的多样性”中，主要的变化发生在肽桥上2011/1肽聚糖种类的多样性主要反映在＿＿＿结构的多样性上。A、肽桥B、粘肽C、双糖单位D、四肽尾2011/1外膜——革兰氏阴性细菌特有构成位于革兰氏阴性细菌细胞壁外层，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质组成的膜2011/1脂多糖位于G-细菌细胞壁最外层，厚为8-10nm，由类脂A、核心多糖和O-特异侧链（又称O-多糖或O-抗原）三部分组成脂多糖结构多变，决定了革兰氏阴性细菌细胞表面抗原决定簇的多样性。沙门氏菌属抗原型多达2107种，一般都源自O-特异侧链种类的变化；是躲避宿主免疫系统攻击，保持感染成功的重要手段类脂A是革兰氏阴性细菌致病物质——内毒素的物质基础2011/1LPS是革兰氏阴性细菌的内毒素，其毒性来自分子中的＿＿＿。A、阿比可糖B、核心多糖C、O特异侧链D、类脂A2011/1外膜蛋白嵌合在脂多糖和磷脂层外膜上的蛋白，有20余种孔蛋白：亲水性小分子物质进出细胞的通道。是一种三聚体跨膜蛋白，中间有一直径约1nm的孔道脂蛋白：是一种锚定蛋白，通过共价键使外膜层牢固地连接在肽聚糖内壁层上的蛋白2011/1周质空间一般指革兰氏阴性细菌中外膜与细胞膜之间的狭窄空间（宽约12-15nm），是进出细胞的物质的重要中转站和反应场所，存在着多种周质蛋白，包括水解酶类、合成酶类（如肽聚糖合成酶）、结合蛋白（如透过酶）、受体蛋白等2011/1革兰氏阳性和阴性细菌的比较提示：牢记革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物的主要区别2011/1G+和G-细菌的主要区别在于＿＿＿。A、G+有鞭毛,G-无鞭毛B、G+有肽聚糖,G-无肽聚糖C、G+有荚膜,G-无荚膜D、G+有磷壁酸,G-无磷壁酸2011/1细胞膜主要特征与真核生物细胞膜相似原核生物与真核生物细胞膜最大区别就是细胞膜中一般不包含胆固醇，而是含有藿醇膜的流动性很大程度上取决于不饱和脂肪酸的结构和相对含量。细胞膜上长链脂肪酸的链长和饱和度因细菌种类和生长温度而异，通常生长温度要求越高的种，其饱和度也越高，反之则低2011/1嗜冷菌在低温下能保持膜的流动性，是因为其细胞内含有大量的＿＿＿。

A、饱和脂肪酸B、不饱和脂肪酸C、磷脂D、脂多糖2011/1细菌内膜系统间体：细胞膜内褶而形成的囊状构造，其中充满着层状或管状的泡囊，多见于革兰氏阳性细菌间体与细胞壁合成、核质分裂、细胞呼吸、芽孢形成有关由于具有类似于真核生物线粒体功能，间体又称为拟线粒体2011/1细胞质和内含物细胞质是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称。含水量约80%。细胞质的主要成分：核糖体、颗粒状贮藏物、多种酶类和中间代谢物、质粒、各种营养物和大分子的单体等，少数细菌还有类囊体、羧酶体、气泡或伴孢晶体等2011/1颗粒状贮藏物一类由不同化学成分累积而成的不溶性沉淀颗粒，可在光镜下观察到，主要功能是贮存营养物糖原：大肠杆菌、克雷伯氏菌、芽孢杆菌和蓝细菌等碳源及能源类聚β-羟丁酸（PHB）：固氮菌、产碱菌和肠杆菌等硫粒：紫硫细菌、丝硫细菌、贝氏硫杆菌等氮源类藻青素：蓝细菌藻青蛋白：蓝细菌磷源（异染粒）：迂回螺菌、白喉棒杆菌、结核分枝杆菌2011/1颗粒状贮藏物聚-β-羟丁酸(PHB)：碳源及能源类贮藏物。它无毒、可塑、易降解，被认为是生产医用塑料、生物降解塑料的良好原料。这类物质易被苏丹黑等脂溶性染料着色，在光镜下可见。2011/1特殊休眠结构——芽孢某些细菌在其生活史一定阶段，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体，称为芽孢芽孢都在菌体内形成，又称内生孢子。含有芽孢的菌体细胞又称孢子囊芽孢成熟后可脱落生成芽孢的细菌主要是杆菌芽孢主要发现于土壤中，任何土壤样品可认为都含有芽孢菌产芽孢细菌主要有：杆菌中好氧的芽孢杆菌属，厌氧的梭菌属；球菌中只有芽孢八叠球菌；螺菌有孢螺菌属提示：芽孢特征要重点掌握2011/1芽孢特点整个生物界中抗逆性最强的生命体，是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标抗性包括抗热、抗辐射、抗化学药物、抗静水压等肉毒梭菌：100℃，5-9.5小时杀灭；121℃，10分钟杀灭芽孢不是繁殖体，只是细菌的休眠体，在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标芽孢与营养细胞相比化学组成存在较大差异，容易在光学显微镜下观察2011/1在细菌中与抗热、抗紫外线和抗化学物质有关的结构是

。A、芽孢B、荚膜C、细胞壁D、包含体某些细菌生长到某个阶段，细胞形成1个芽孢，芽孢的作用是A、繁殖B、抵抗不良环境C、储备营养D、吸收2011/1芽孢结构芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差皮层的离子强度很高，产生极高的渗透压夺取芽孢核心的水分，结果造成皮层的充分膨胀核心部分的细胞质却变得高度失水，因此，具极强的耐热性。渗透调节皮层膨胀学说独特成分：2，6-吡啶二羧酸（DPA）2011/1在芽孢各层结构中，含DPA-Ca量最高的层次是＿＿＿。A、胞外壁B、芽孢衣C、皮层D、芽孢核心2011/1伴孢晶体少数芽孢杆菌如苏云金芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素，称为伴孢晶体对200多种昆虫尤其是鳞翅目的幼虫有毒杀作用，对人畜毒性很低，故国内外均以工业化方式大量生产菌剂，作为生物农药2011/1细菌的其他休眠结构固氮菌：孢囊粘球菌：粘孢子蛭弧菌：蛭孢囊2011/1细菌细胞壁以外的构造——糖被包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质，其形成与菌种遗传特性有关，也与环境条件（主要营养物质）密切相关

层次厚：荚膜

层次薄：微荚膜在细胞壁上有固定层松散、未固定在细胞壁上：黏液层包裹在单个细胞表面包裹在细胞群上：菌胶团糖被2011/1糖被特点主要成分是多糖、多肽或蛋白质，尤以多糖居多。产生糖被是微生物的一种遗传特性，其菌落特征及血清学反应是是细菌分类鉴定的指标之一并非细胞生活的必要结构，但它对细菌在环境中的生存有利作为细胞外碳源和能源性贮藏物质保护细胞免受干燥影响增强病原菌的致病能力，使之抵抗宿主吞噬细胞的吞噬肠膜明串珠菌：荚膜，用于葡聚糖工业生产野油菜黄单胞菌：粘液层，用于黄原胶工业生产动胶菌：菌胶团，用于污水处理2011/1细菌的荚膜

。A、化学成分都是多糖B、具有保护作用，失去荚膜可导致细胞死亡C、可增强病原菌的致病力D、其产生与环境条件无关2011/1细菌细胞壁以外的构造——鞭毛某些细菌细胞表面着生的一至数十条长丝状、螺旋形的附属物，具有推动细菌运动功能，为细菌的“运动器官”鞭毛细长，长度：15-20μm；直径：10-20nm。光镜下不可见。采用特殊鞭毛染色法，使染料沉积在鞭毛上，可加粗其直径，可在光镜下可见，但真实结构只在电镜下可见。此外，采用悬滴法及暗视野法观察细菌运动状态，通过半固体培养基中生长方式和平板上菌落形态，都可判断有无鞭毛螺旋菌和弧菌一般具鞭毛；杆菌部分有鞭毛；球菌仅尿素八叠球菌有鞭毛2011/1下面的错误答案是＿＿＿。

A、所有的细菌都有鞭毛B、大多数杆菌都有鞭毛C、大多数球菌都没有鞭毛D、大多数螺旋球菌都有鞭毛下列哪些结构特征是细菌分类的依据?

A、细胞壁是否着色B、是否有鞭毛C、是否存在核糖体D、是否有核膜2011/1鞭毛推动细菌运动的特点速度：每秒20-80μm，每分钟达到3000倍体长方式：以推进方式做直线运动，以翻腾形式做短促转向运动鞭毛的功能是运动，是原核生物实现其趋向性的最有效方式趋光性趋化性趋磁性2011/1鞭毛的化学组分主要是＿＿＿。A、多糖B、脂类C、蛋白质D、核酸细菌在演化过程中形成的某些特殊结构，有助于自身向营养物质移动或逃避有害刺激的是＿＿。A、鞭毛B、菌毛C、荚膜D、芽孢2011/1细菌细胞壁以外的构造——菌毛细菌体表的纤细、中空、短直、数量较多（通常200-300根）的蛋白质类附属物，具有使菌体附着于物体表面的功能，常见于革兰氏阴性致病菌菌毛不具运动功能根据功能，可分为两类普通菌毛：吸附性菌毛：接合2011/1细菌的菌毛的主要功能是＿＿＿。A、运动B、传递遗传物质C、附着D、致病性2011/1放线菌具有分枝状菌丝、以孢子进行繁殖、革兰氏阳性的一类原核生物介于细菌与丝状真菌之间又接近细菌的一类丝状原核生物（以前观点）放线菌实际上是属于细菌范畴内的原核微生物，只不过其细胞形态为分枝状菌丝（现阶段观点）提示：了解放线菌基本特征2011/1放线菌形态与结构单细胞，大多由分枝发达的菌丝组成菌丝直径与杆菌类似，约1μm细胞壁组成与细菌类似，革兰氏染色阳性菌丝按形态和功能可分为营养、气生和孢子丝三种营养菌丝：匍匐生长于培养基内，吸收营养，也称基内菌丝。一般无隔膜，直径0.2-0.8μm，有的可产生色素气生菌丝：营养菌丝发育到一定阶段，伸向空间形成气生菌丝，叠生于营养菌丝上，可覆盖整个菌落表面。直径较粗（1-1.4μm），有的产色素孢子丝：气生菌丝发育到一定阶段，其上可分化出形成孢子的菌丝，又称繁殖菌丝2011/12011/1放线菌的菌体呈分枝丝状体，它是一种＿＿＿。A、多细胞的真核微生物B、单细胞的真核微生物C、多核的原核微生物D、无壁的原核微生物2011/1繁殖方式无性孢子菌丝断裂凝聚孢子横隔孢子孢囊孢子分生孢子厚壁孢子存在多种孢子形成方式常见于液体培养中，工业发酵生产抗生素时都以此法大量繁殖放线菌细菌的芽孢是休眠体，而放线菌的孢子是繁殖体2011/1放线菌分布及与人类关系放线菌常以孢子或菌丝状态极其广泛地存在于自然界，土壤中最多，其代谢产物使土壤具有特殊的泥腥味能产生大量的、种类繁多的抗生素（其中90%由链霉菌产生）放线菌可用于生产维生素、酶制制；此外，在甾体转化、石油脱蜡、烃类发酵、污水处理等方面也有应用少数寄生型放线菌可引起人、动物和植物疾病提示：放线菌与抗生素之间关系要掌握，几种主要抗生素产生菌要记住2011/1

放线菌是抗生素的主要产生菌，许多常用的抗生素都是＿＿属菌种的次生代谢产物。A、链霉菌B、小单孢菌C、诺卡氏菌D、放线菌工业发酵产生抗生素时，放线菌主要是借助＿＿方式产生新的菌丝体。A、有性孢子B、无性孢子C、菌丝体断裂D、有性接合2011/1立克次氏体大小介于通常的细菌与病毒之间，专性活细胞内寄生的原核微生物，形态呈球形、杆状细胞壁由脂多糖和蛋白质组成，类似于革兰氏阴性菌，细胞含DNA和RNA，以及蛋白质、脂肪、磷脂、多糖及某些酶类。某些种中有核糖体。2011/1特性某些性质与病毒相近体内酶系不完全，一些必需的养料需从宿主细胞获得专性活细胞寄生物，一般不能在人工培养基上生长繁殖细胞膜比一般细菌的膜疏松从一种宿主传至另一宿主的特殊生活方式以节肢动物为媒介立克次氏体引起的常见疾病有人类的流行性斑疹伤寒、羌虫热、Q热2011/1支原体介于一般细菌与立克次氏体之间的原核微生物特性无细胞壁，只有细胞膜，细胞形态多变个体很小，能通过细菌过滤器可进行人工培养，但营养要求苛刻，菌落微小，呈典型的“油煎荷包蛋”形状一些支原体能引起人类、牲畜、家禽和作物的病害疾病细胞膜为三层结构。内、外层，为蛋白质和糖类组成，中层为类脂和胆固醇。细胞膜中含有甾醇，在其他原核生物中罕见2011/1衣原体介于立克次氏体与病毒之间，能通过细菌滤器，专性活细胞内寄生的一类原核微生物2011/1特性细胞结构与细菌类似，具有类似的细胞壁（革兰氏阴性）专性活细胞内寄生：有一定的代谢活性，能进行有限的大分子合成，但缺乏产生能量的系统，必须依赖宿主获得ATP，因此又被称为能量寄生型生物在宿主细胞内生长繁殖具有独特的生活周期，即存在原体（也叫网状体）和始体两种形态衣原体不耐热，60℃10分钟即被灭活提示：立克次氏体、支原体、衣原体基本特性要掌握2011/1支原体的细胞特点是＿＿＿。A、去除细胞壁后的细菌

B、有细胞壁的原核微生物C、无细胞壁的原核微生物

D、呈分枝丝状体的原核微生物

下列选项中，不属于衣原体显著特征的是＿＿＿。

A、它们是小的细菌

B、它们的生命周期包括原体和网状体阶段

C、它们引起洛基山斑疹热和斑疹伤寒

D、它们只在生活的细胞中繁殖引起砂眼的病原体是＿＿＿。A、衣原体B、病毒C、支原体D、立克次氏体2011/12011/1粘细菌一类具有最复杂的行为模式和生活史的原核微生物能形成子实体是粘细菌区别于其它原核微生物的最主要标志2011/1蛭弧菌寄生于其它细菌并导致其裂解的一类弧菌，其行为类似噬菌体可能成为防治有害细菌的一种生防武器2011/1古生菌（Archaea）病毒古生菌（Archaea）细菌（Bacteria）非细胞型细胞型原核微生物真核微生物微生物真菌单细胞藻类原生动物2011/1古生菌在进化谱系上与真细菌及真核生物相互并列，且与后者关系更近，而其细胞构造与真细菌较为接近，同属于原核生物2011/1细菌古生菌真核生物具核膜的核无无有内膜细胞器无无有细胞壁含胞壁酸的肽聚糖假肽聚糖或蛋白质，无胞壁酸无胞壁酸细胞膜长链脂肪酸，酯键分支脂肪酸，醚键长链脂肪酸，酯键气泡有有无多顺反子mRNA有有无内含子无无有mRNA剪接、帽子形成和PolyA尾端无无有2011/1细菌古生菌真核生物核糖体：大小延伸因子2对氯霉素、卡那霉素敏感性70S与白喉毒素不反应敏感70S与白喉毒素反应不敏感80S与白喉毒素反应不敏感RNA聚合酶：数目结构对利福霉素敏感性15个亚基敏感几种8-12亚基不敏感312-14亚基不敏感聚合酶Ⅱ启动子无有有代谢功能产甲烷无有无固氮有有无无机化能营养有有无2011/1

概念的提出

1977年，CarlWoese以16SrRNA序列比较为依据，提出的独立于真细菌和真核生物之外的生命的第三种形式在分类地位上与真细菌和真核生物并列为三域，并且在进化谱系上更接近真核生物在细胞构造上与真细菌较为接近，同属原核生物多生活于一些生存条件十分恶劣的极端环境中，例如高温、高酸、高盐等原名：古细菌（Archaebacteria）；后改为：古生菌（Archaea）提示：三域学说基本概念要记住2011/1细胞形态在显微镜下，古生菌与细菌具有类似的个体形态2011/1细胞结构在细胞的结构与功能上，古生菌既有类似真细菌之处，也有类似真核生物之处，还具有一些自己独特的特点2011/1细胞壁具有与真细菌类似功能的细胞壁细胞壁的结构和化学成分差别甚大已研究过的一些古生菌，它们细胞壁中没有真正的肽聚糖，而是由多糖（假肽聚糖）、糖蛋白或蛋白质构成的热原体属没有细胞壁2011/1细胞质和内含物无复杂内膜的细胞器核糖体为70S有些种类的细胞质中具有有一定功能的颗粒状内含物2011/1核区没有具有核仁、核膜的细胞核染色体DNA为共价闭和环状2011/1真菌低等真核生物具有细胞核，进行有丝分裂细胞质中含有线粒体但没有叶绿体，不进行光合作用以产生有性孢子和无性孢子二种形式进行繁殖营养方式为化能有机营养（异养）、好氧不运动，少数种类的游动孢子有1-2根鞭毛种类繁多，形态各异、大小悬殊，细胞结构多样2011/1霉菌霉菌是一些“丝状真菌”的统称。霉菌菌体均由分枝或不分枝的菌丝构成。许多菌丝交织在一起，称为菌丝体2011/1在自然界，纤维素、半纤维素和木质素的主要分解者是

。

A、绿色藻类

B、霉菌

C、酵母菌

D、光合细菌

2011/1形态结构1、菌丝细胞形态无隔膜菌丝有隔膜菌丝（参见P33）菌丝由横隔膜分隔成成串多细胞，每个细胞内含有一个或多个细胞核。有些菌丝，从外观看虽然像多细胞，但横隔膜上有小孔，使细胞质和细胞核可以自由流通，而且每个细胞的功能也都相同。整个菌丝为长管状单细胞，细胞质内含有多个核。其生长过程只表现为菌丝的延长和细胞核的裂殖增多以及细胞质的增加2011/1菌丝功能营养菌丝气生菌丝繁殖菌丝霉菌菌丝直径约为2~10mm，比一般细菌和放线菌菌丝大几到几十倍2011/1菌落由粗而长的分枝状菌丝组成，菌落疏松，呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，比细菌菌落大几倍到几十倍，有的没有固定大小各种霉菌，在一定培养基上形成的菌落大小、形状、颜色等相对稳定，所以菌落特征也为分类依据之一2011/1霉菌繁殖方式及生活史繁殖方式无性孢子：厚垣孢子、节孢子、分生孢子、孢囊孢子等有性孢子：两个性细胞结合，经质配、核配合减数分裂形成，有接合孢子、卵孢子、子囊孢子等菌丝断片有一些霉菌，至尽尚未发现其生活史中有有性繁殖阶段，称为半知菌2011/1真菌的无性繁殖方式主要通过＿＿＿。A、菌丝断裂B、芽殖C、裂殖D、分生孢子E、子囊孢子一般真菌的生活史同植物的生物史相比有哪种特点？A、没有有性生殖B、不具有双倍体C、减数分裂罕见D、具有双核期2011/1霉菌孢子与细菌芽孢的比较2011/1真菌的类群鞭毛菌亚门：多为水生，菌丝无隔膜，多核。无性繁殖时的无性孢子为游动孢子（具鞭毛），有性孢子为卵孢子。代表菌：腐菌接合菌亚门：菌丝无隔膜，多核。无性繁殖时产生孢囊孢子，有性孢子为接合孢子。代表菌：毛霉、根霉子囊菌亚门：大多数种类形成菌丝，菌丝有隔膜。无性繁殖时主要产生分生孢子，有性孢子为子囊孢子。酵母菌则以芽殖、裂殖为主要繁殖方式。代表菌：赤霉、脉孢霉、酵母担子菌亚门：产生担孢子，菌丝有隔膜。大多数担子菌无性过程不发达。代表菌：伞菌、黑粉菌半知菌亚门：只发现无性阶段。代表菌：曲霉、青霉、木霉提示：每个类群的代表性菌种及其基本特征要掌握2011/1毛霉的菌丝体特征是＿＿＿。A、菌丝无隔膜B、产生分生孢子C、有假根D、有足细胞能产生植物生长刺激素的霉菌是＿＿＿。A、链格孢霉B、脉孢霉C、赤霉菌D、白僵菌下列霉菌属于半知菌亚门的是＿＿。A、毛霉和根霉B、青霉和曲霉C、赤霉和脉孢菌D、木霉和腐霉下列能产生子囊孢子的霉菌是＿＿。A、毛霉和根霉B、青霉和曲霉C、赤霉和脉孢菌D、木霉和腐霉

2011/1酵母菌单细胞的真核微生物。以芽殖或裂殖来进行无性繁殖单细胞真菌，以与霉菌区分开。有些可产生子囊孢子进行有性繁殖2011/1分布及与人类的关系多分布在含糖的偏酸性环境，如水果、蔬菜、叶子、树皮等处，及葡萄园和果园土壤中重要的微生物资源：酵母菌是人类的第一种“家养微生物”重要的科研模式微生物：啤酒酵母：第一个完成全基因组序列测定的真核生物有些酵母菌具有危害性，能引起皮肤、呼吸道、消化道、泌尿生殖道疾病，如白色假丝酵母（白色念珠菌）2011/1形态特征个体形态：卵圆、圆、圆柱、梨形等单细胞，其细胞直径一般比细菌粗10倍左右。有的酵母菌子代细胞连在一起成为链状，称为假丝酵母菌落特征：与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚，表面湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色2011/1繁殖方式无性繁殖芽殖：主要的无性繁殖方式，成熟细胞长出一个小芽，到一定程度后脱离母体继续长成新个体裂殖：少数酵母菌可以象细菌一样借细胞横割分裂而繁殖，如裂殖酵母有性繁殖：形成子囊和子囊孢子的形式进行2011/1出芽繁殖过程发生＿＿。A、主要在病毒中B、在形成分枝的细菌中C、只在原生动物中D、在酵母菌中2011/1生活史酵母菌单倍体和双倍体细胞均可独立存在，有三种类型营养体只能以单倍体形式存在（核配后立即进行减数分裂）营养体只能以双倍体形式存在（核配后不立即进行减数分裂）营养体既可以单倍体也可以双倍体形式存在，都可进行出芽繁殖酵母菌中尚未发现其有性阶段的被称为假酵母2011/12011/1酿酒酵母营养体是＿＿＿。A、单倍体B、二倍体C、单倍体或是二倍体D、多倍体假酵母是指＿＿＿。A、产假菌丝的酵母菌B、不产生菌丝的酵母菌C、只进行无性繁殖的酵母菌D、具有有性繁殖的酵母菌酵母细胞内除了细胞核内含有DNA外，其他含有DNA的部分还有＿＿＿。A、色素体和内质网B、线粒体和2μm质粒C、内质网和2μm质粒D、内质网和线粒体2011/1微生物的基本特点：小在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性微生物的物种（菌株）一般也是以群体的形式进行繁衍、保存培养技术在微生物学中具有重要意义！无菌技术、分离技术、培养技术、观察技术微生物学基本实验技术2011/1培养物：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体混合培养物：含有多种微生物的培养物；纯培养物：只有一种微生物的培养物；通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果2011/1微生物的分离和纯培养从混杂的群体中分离特定的某一种微生物，是研究和利用微生物的第一步无菌技术：用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染2011/1酒精消毒的最佳浓度为＿＿。A、75%B、50%C、90%紫外线的波长范围是15~300nm，其中波长在＿＿左右的紫外线杀菌作用最强A、60nmB、160nmC、260nm接种环常用的灭菌方法是＿＿。A、火焰灭菌B、干热灭菌C、高压蒸汽灭菌D、间歇灭菌实验室常规高压蒸汽灭菌的条件是＿＿。A、140℃，5-15秒B、72℃，15分钟C、121℃，20分钟D、100℃，5分钟

2011/1下列与间歇灭菌原理不相符的是

。A、细菌芽孢在100℃高温蒸汽下不会死亡B、细菌繁殖体在100℃高温蒸汽下死亡C、细菌芽孢在37℃湿润条件下萌发成繁殖体D、细菌芽孢在100℃和37℃之间的剧烈变化温度下死亡

在进行微生物培养实验时，如果缺乏高压灭菌锅这个设备，可以用间歇灭菌法进行灭菌。方法是常压下煮沸一段时间后，冷却至常温，然后再煮沸、再冷却，如此反复几次.这种方法能够达到灭菌目的的原因是＿＿。A、总加温时间比高压灭菌法长B、常压下微生物的抵抗力下降C、煮沸时，微生物营养体转变成芽孢D、冷却时，微生物芽孢转变成营养体2011/1用固体培养基分离纯培养培养基液体培养基固体培养基半固体培养基2011/1肉汤培养基用来培养＿＿。A、酵母菌B、霉菌C、细菌高氏培养基用来培养＿＿。A、细菌B、真菌C、放线菌实验室常用的培养细菌的培养基时＿＿。A、牛肉膏蛋白胨B、高氏一号淀粉C、麦芽汁D、察氏无氮培养基用来培养＿＿。A、自生固氮菌B、磷细菌C、根瘤菌半固体培养基的主要用途是＿＿。A、检查细菌的运动性B、检查细菌的好氧性半固体培养基的琼脂加入量通常是＿＿。A、1%B、0.5%C、0.1%实验室配置固体培养基时，琼脂加入量通常为＿＿＿。A、1%B、2%C、0.5%

2011/1菌落

单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体众多菌落连成一片菌苔（lawn）2011/1在固体培养基上，由一个微生物细胞经过细胞分裂和生长而形成的肉眼可见的具有特定形态的结构叫

。A、菌落B、菌种C、菌株D、菌苔各种微生物在一定条件下形成的菌落特征（如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等）具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。菌落特征与微生物的菌体形态结构特征密切相关。固体培养基上的一个菌落与下列哪一项最相似?A、组织B、器官C、个体D、种群2011/1使微生物在固体培养基平板上形成单个菌落的基本方法：稀释2011/1稀释倒平板法涂布平板法使用较多的常规方法，但有时涂布不均！操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好！2011/1平板划线法2011/1平板划线操作适用于下列哪些实验目的?

A、纯化大肠杆菌B、分离水生耐热细菌TaqC、计数尿素分解菌D、土壤微生物种类调查在平板计数时，细菌、放线菌每皿菌落数在＿＿个为宜。A、0~10B、10~200C、>2002011/1

一定体积某菌液以100万倍稀释后，吸取0.lml涂布于平板上，24h恒温培养后，结果如图所示。此实验的目的可能是

。A、计数菌液的微生物活细胞数目B、分离获得某种或某类微生物C、计数菌液中微生物细胞数目D、研究细菌形态

2011/1选择培养分离抑制大多数其它微生物的生长；使待分离的微生物生长更快；使待分离的微生物在群落中的数量上升，方便用稀释法对其进行纯化。微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化：没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。使待分离的微生物生长“突出”；直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养。2011/1利用选择平板进行直接分离待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制2011/1富集培养从自然界中分离到所需的特定微生物特定的环境条件仅适应于该条件的微生物旺盛生长待分离微生物在群落中的数量大大增加2011/1富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微生物的需要根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类分离培养在特定环境中能生长的微生物2011/1利用高糖培养基培养酵母菌属于＿＿。A、普通培养基B、选择培养基C、加富培养基D、鉴别培养基在EMB培养基上，反射光下大肠杆菌菌落呈现的颜色是＿＿。A、棕色B、粉红色C、绿色并带有金属光泽D、无色在筛选抗青霉素菌株时，须在培养基中加入青霉素，其作用是：A．筛选B．诱变C．既筛选又诱变D．以上答案都不对2011/1简单染色法正染色革兰氏染色法鉴别染色法抗酸性染色法芽孢染色法死菌姬姆萨染色法负染色：荚膜染色法等细菌染色法

活菌：用美蓝或TTC（氧化三苯基四氮唑）等作活菌染色2011/1若在光学显微镜下观察细菌的细致形态和主要结构时，是否需要进行染色＿＿＿。A、一般不需要B、一般需要C、没有必要D、不一定在使用显微镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片间滴加——。A、二甲苯B、水C、香柏油直接显微镜计数用来测定下面＿＿微生物群体的数目。A、原生动物B、真菌孢子