《凝集反应》教学课件

第九章凝集反响第九章凝集反响1学习目标1.解释凝集反响的概念。2.解释直接凝集反响、间接凝集反响、协同凝集反响的原理。3.说出抗人球蛋白试验的应用。4.了解自身红细胞凝集。学习目标1.解释凝集反响的概念。2凝集反响细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。凝集反响细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原3抗原抗原排斥抗原抗体凝集反响Y抗原抗原抗原YYYYYYYYYYYYYYYYY凝集原：凝集反响中的抗原。凝集素：凝集参与反响的抗体抗原抗原排斥抗原抗体凝集反响Y抗原抗原抗原YYYYYYYYY4反应阶段：抗原抗体的特异性结合出现肉眼可见的凝集现象反应特点：IgM的作用比IgG大数百倍IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体凝集反响反应阶段：凝集反响5可见反响形成可见反响形成6第一节直接凝集反响直接凝集反应：

颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。第一节直接凝集反响直接凝集反应：7YYY+方法评价：简便和快速、敏感度低，用于定性试验临床应用：菌种鉴定、血清学分型、血型鉴定及抗体效价测定。第一节直接凝集反响YYY+方法评价：简便和快速、敏感度低，用于定性试验第一节8一、玻片凝集试验YYY+一、玻片凝集试验YYY+9《凝集反应》教学课件10方法评价:定性试验简便和快速敏感度低临床应用:菌种鉴定血清学分型血型鉴定一、玻片凝集试验方法评价:临床应用:一、玻片凝集试验11

在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。二、试管凝集试验在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，120.50.50.50.50.5弃掉0.5

试管凝集试验原理结果

1234567菌液0.50.50.50.50.5弃掉0.513试管凝集试验试管凝集试验14结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照一样++小、局部凝集块中等混浊+++大多凝集管底轻度混浊++++大的凝集块清亮凝集程度沉淀上清结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照一样++小、局部凝15管底沉淀凝集程度最高稀释比例待测血清的滴度管底沉淀凝集程度最高稀释比例待测血清的滴度16方法评价：半定量试验简便、快速敏感度低可有假阳性临床应用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布鲁菌病穿插配血试验二、试管凝集试验方法评价：临床应用：二、试管凝集试验17一、玻片凝集反响:未知抗原+抗体凝集团块混浊?二、试管凝集反响：定量抗原+系列稀释抗体不同程度的凝集反响YESNO确定抗体的滴度一、玻片凝集反响:未知抗原+抗体凝集团块?二、试管凝集反181.O凝集、H凝集与Vi凝集2.穿插反响与凝集吸收试验三、与凝集反响有关的概念1.O凝集、H凝集与Vi凝集三、与凝集反响有关的概念191、O凝集、H凝集与Vi凝集1、O凝集、H凝集与Vi凝集20穿插凝集反响ABAC乙菌

甲菌2、穿插凝集反响有凝集吸收试验穿插凝集反响ABAC乙菌甲菌21共同抗原与穿插反响抗原1抗原2+

+抗血清穿插反响2、穿插凝集反响有凝集吸收试验共同抗原与穿插反响抗原1抗原2+

+抗血清穿插反响2、穿插凝222、穿插凝集反响有凝集吸收试验凝集吸收试验:用一种过量的细菌抗原与发生穿插凝集反响的抗血清相结合。可将其共同抗体吸去，剩下抗体只能与特异性抗原起反响，这种试验即称凝集吸收试验。2、穿插凝集反响有凝集吸收试验凝集吸收试验:23第二节间接凝集反响间接凝集反应:

将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象第二节间接凝集反响间接凝集反应:24载体可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒间接凝集试验示意图载体可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒间接凝集试验示意图25载体种类及其处理方法红细胞：

新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一般先醛化后应用。聚苯乙烯胶乳颗粒：

可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团的颗粒载体种类及其处理方法红细胞：26正向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验间接凝集反响的类型正向间接凝集试验间接凝集反响的类型27用抗原致敏载体--检测抗体一、正向间接凝集试验用抗原致敏载体--检测抗体一、正向间接凝集试验28二、反向间接凝集试验用抗体致敏载体----检测抗原二、反向间接凝集试验用抗体致敏载体----检测抗原29三、间接凝集抑制试验用抗原致敏载体--检测抗原三、间接凝集抑制试验用抗原致敏载体--检测抗原30间接凝集抑制试验待测抗原抗体特异结合抗原抗体复合物NS＋致敏颗粒无凝集颗粒阳性间接凝集抑制试验待测抗原抗体特异结合抗原抗体复合物NS＋致敏31间接凝集抑制试验待测抗原抗体无结合抗原抗体分散NS＋致敏颗粒有凝集颗粒阴性间接凝集抑制试验待测抗原抗体无结合抗原抗体分散NS＋致敏颗粒32《凝集反应》教学课件33第三节其他凝集反应第三节其他凝集反应34SPA:SPA-IgGFc;SPA抗体致敏------测抗原一、协同凝集试验SPA:SPA-IgGFc;一、协同凝集试验35

原理图IgGSPASPA-IgG待测抗原SPA-IgG-待测抗原凝集颗粒混合参加原理图IgGSPASPA-IgG待测抗原SPA-IgG36抗球蛋白试验又称Coombs试验二、抗人球蛋白凝集试验抗球蛋白试验又称二、抗人球蛋白凝集试验371945年由Coombs建立的一种抗球蛋白参与的间接血凝试验，检测抗红细胞不完全抗体的一种非常经典的方法。二、抗人球蛋白凝集试验1945年由Coombs建立的一种抗球蛋白参与的间接血凝试验381、直接Coombs试验不完全抗体检测红细胞上抗体1、直接Coombs试验不完全抗体检测红细胞上抗体392、间接Coombs试验检测血清中的抗红细胞抗体2、间接Coombs试验检测血清中的抗红细胞抗体40临床应用：在输血上的应用血型抗原抗体的检查对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断对溶血性贫血的研究对细菌或立克次体的不完全抗体检查抗人球蛋白凝集试验临床应用：抗人球蛋白凝集试验41自身红细胞凝集试验未经致敏的受检者新鲜红细胞试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体临床应用：HIV检测、HBV检测自身红细胞凝集试验未经致敏的受检者新鲜红细胞临床应用：HIV42自身红细胞凝集试验自身红细胞凝集试验43胶乳凝集试验胶乳凝集试验44《凝集反应》教学课件45明胶凝集试验

将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时，若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见的粉红色凝集

明胶凝集试验将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明胶颗粒46间接凝集反响的应用抗原的检测

反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。抗体的检测

检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。

间接凝集反响的应用抗原的检测47小结

凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原的颗粒性载体与相应抗体结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。可以分为直接凝集反应和间接凝集反应。在临床检验中最常用的为间接血凝试验、胶乳凝集试验和明胶试验。抗球蛋白试验又称为Coombs试验，是检测抗红细胞不完全抗体的一种很有用的方法。直接Coombs试验用于病人红细胞上不完全抗体检测；间接Coombs试验用于检测游离的血清中的不完全抗体。小结凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原48第九章凝集反响第九章凝集反响49学习目标1.解释凝集反响的概念。2.解释直接凝集反响、间接凝集反响、协同凝集反响的原理。3.说出抗人球蛋白试验的应用。4.了解自身红细胞凝集。学习目标1.解释凝集反响的概念。50凝集反响细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。凝集反响细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原51抗原抗原排斥抗原抗体凝集反响Y抗原抗原抗原YYYYYYYYYYYYYYYYY凝集原：凝集反响中的抗原。凝集素：凝集参与反响的抗体抗原抗原排斥抗原抗体凝集反响Y抗原抗原抗原YYYYYYYYY52反应阶段：抗原抗体的特异性结合出现肉眼可见的凝集现象反应特点：IgM的作用比IgG大数百倍IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体凝集反响反应阶段：凝集反响53可见反响形成可见反响形成54第一节直接凝集反响直接凝集反应：

颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。第一节直接凝集反响直接凝集反应：55YYY+方法评价：简便和快速、敏感度低，用于定性试验临床应用：菌种鉴定、血清学分型、血型鉴定及抗体效价测定。第一节直接凝集反响YYY+方法评价：简便和快速、敏感度低，用于定性试验第一节56一、玻片凝集试验YYY+一、玻片凝集试验YYY+57《凝集反应》教学课件58方法评价:定性试验简便和快速敏感度低临床应用:菌种鉴定血清学分型血型鉴定一、玻片凝集试验方法评价:临床应用:一、玻片凝集试验59

在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。二、试管凝集试验在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，600.50.50.50.50.5弃掉0.5

试管凝集试验原理结果

1234567菌液0.50.50.50.50.5弃掉0.561试管凝集试验试管凝集试验62结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照一样++小、局部凝集块中等混浊+++大多凝集管底轻度混浊++++大的凝集块清亮凝集程度沉淀上清结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照一样++小、局部凝63管底沉淀凝集程度最高稀释比例待测血清的滴度管底沉淀凝集程度最高稀释比例待测血清的滴度64方法评价：半定量试验简便、快速敏感度低可有假阳性临床应用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布鲁菌病穿插配血试验二、试管凝集试验方法评价：临床应用：二、试管凝集试验65一、玻片凝集反响:未知抗原+抗体凝集团块混浊?二、试管凝集反响：定量抗原+系列稀释抗体不同程度的凝集反响YESNO确定抗体的滴度一、玻片凝集反响:未知抗原+抗体凝集团块?二、试管凝集反661.O凝集、H凝集与Vi凝集2.穿插反响与凝集吸收试验三、与凝集反响有关的概念1.O凝集、H凝集与Vi凝集三、与凝集反响有关的概念671、O凝集、H凝集与Vi凝集1、O凝集、H凝集与Vi凝集68穿插凝集反响ABAC乙菌

甲菌2、穿插凝集反响有凝集吸收试验穿插凝集反响ABAC乙菌甲菌69共同抗原与穿插反响抗原1抗原2+

+抗血清穿插反响2、穿插凝集反响有凝集吸收试验共同抗原与穿插反响抗原1抗原2+

+抗血清穿插反响2、穿插凝702、穿插凝集反响有凝集吸收试验凝集吸收试验:用一种过量的细菌抗原与发生穿插凝集反响的抗血清相结合。可将其共同抗体吸去，剩下抗体只能与特异性抗原起反响，这种试验即称凝集吸收试验。2、穿插凝集反响有凝集吸收试验凝集吸收试验:71第二节间接凝集反响间接凝集反应:

将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象第二节间接凝集反响间接凝集反应:72载体可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒间接凝集试验示意图载体可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒间接凝集试验示意图73载体种类及其处理方法红细胞：

新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一般先醛化后应用。聚苯乙烯胶乳颗粒：

可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团的颗粒载体种类及其处理方法红细胞：74正向间接凝集试验反向间接凝集试验间接凝集抑制试验间接凝集反响的类型正向间接凝集试验间接凝集反响的类型75用抗原致敏载体--检测抗体一、正向间接凝集试验用抗原致敏载体--检测抗体一、正向间接凝集试验76二、反向间接凝集试验用抗体致敏载体----检测抗原二、反向间接凝集试验用抗体致敏载体----检测抗原77三、间接凝集抑制试验用抗原致敏载体--检测抗原三、间接凝集抑制试验用抗原致敏载体--检测抗原78间接凝集抑制试验待测抗原抗体特异结合抗原抗体复合物NS＋致敏颗粒无凝集颗粒阳性间接凝集抑制试验待测抗原抗体特异结合抗原抗体复合物NS＋致敏79间接凝集抑制试验待测抗原抗体无结合抗原抗体分散NS＋致敏颗粒有凝集颗粒阴性间接凝集抑制试验待测抗原抗体无结合抗原抗体分散NS＋致敏颗粒80《凝集反应》教学课件81第三节其他凝集反应第三节其他凝集反应82SPA:SPA-IgGFc;SPA抗体致敏------测抗原一、协同凝集试验SPA:SPA-IgGFc;一、协同凝集试验83

原理图IgGSPASPA-IgG待测抗原SPA-IgG-待测抗原凝集颗粒混合参加原理图IgGSPASPA-IgG待测抗原SPA-IgG84抗球蛋白试验又称Coombs试验二、抗人球蛋白凝集试验抗球蛋白试验又称二、抗人球蛋白凝集试验851945年由Coombs建立的一种抗球蛋白参与的间接血凝试验，检测抗红细胞不完全抗体的一种非常经典的方法。二、抗人球蛋白凝集试验1945年由Coombs建立的一种抗球蛋白参与的间接血凝试验861、直接Coombs试验不完全抗体检测红细胞上抗体1、直接Coombs试验不完全抗体检测红细胞上抗体872、间接Coombs试验检测血清中的抗红细胞抗体2、间接Coombs试验检测血清中的抗