红细胞和血红蛋白检测课件

红细胞和血红蛋白检测1红细胞和血红蛋白检测1目的掌握红细胞及血红蛋白的参考值及其临床意义掌握红细胞计数（显微镜计数法）、血红蛋白测定（氰化高铁光电比色法-HiCN法）的方法2目的2全自动血细胞分析仪3全自动血细胞分析仪3血常规4血常规4造血干细胞淋系髓系红系粒单系巨核系单粒B细胞T细胞血小板白细胞红细胞细胞免疫止血抗感染携氧体液免疫5造血干细胞淋系髓系红系粒单系巨核系单粒B细胞T细胞血小板白细原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞骨髓造血干细胞Epo红系祖细胞6原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞骨髓双凹圆盘形大小一致直径6-9μm厚2μm，中央约1μm四周呈浅橘红色，中央淡染异常：大小形态染色反应结构7双凹圆盘形异常：7复习成年男性、成年女性及新生儿红细胞及血红蛋白的正常参考值是多少？8复习8红细胞和血红蛋白正常值红细胞数血红蛋白成年男性(4.0～5.5)×1012／L120～160g/L成年女性(3.5～5.0)×1012／L110～150g/L新生儿(6.0～7.0)×1012／L170～200g/L网织红细胞：0.5％～l.5％意义：反映骨髓的造血功能9红细胞和血红蛋白正常值红细胞数血红蛋白成年男性(4.0～5.一般以血红蛋白为标准，成年男性血红蛋白＜120g／L，女性＜110g／L，即可认为有贫血贫血分为四级轻度血红蛋白＜参考值低限至90g／L中度90—60g／L重度60—30g／L极度＜30g／L病因红细胞生成不足、红细胞破坏过多、丢失过多贫血10一般以血红蛋白为标准，成年男性血红蛋白＜120g／L，女性升高：

相对升高——与脱水有关（吐、泻、汗、尿、灼等）绝对升高——与乏氧有关

生理性（高原、胎儿、新生儿、运动、精神因素）

病理性（心肺疾患、肿瘤、真性红细胞增多症）降低：

生理性降低——妊娠、婴幼儿、老年人

病理性降低——生成降低、原料不足、造血障碍、丢失增多（失血）、

破坏增多（溶血）

1111红细胞计数方法原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，滴入血细胞计数池内，然后于显微镜下计数一定范围内的RBC数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。12红细胞计数方法原理：12步骤1.准备：试管1只，加红细胞稀释液或生理盐水1.99ml2.采血：用血红蛋白吸管采血10ul3.稀释：4.冲液：要求一次冲液成功，静置两分钟后计数5.计数：先低倍镜后高倍镜

双线作单线计上不计下计左不计右

每个中方格内红细胞数相差超过15个应重做13步骤1.准备：试管1只，加红细胞稀释液或生理盐水1.991414为红细胞计数区域(低倍镜)15为红细胞计数区域(低倍镜)15RBC计数16RBC计数16充液位置充液位置17充液位置充液位置171818压线细胞的计数原则：计上不计下、计左不计右高倍镜，19压线细胞的计数原则：计上不计下、计左不计右19计算RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×106

＝5个中方格内RBC数/100×1012

报告方式×1012／L

R

B

C

：手工显微镜法红细胞计数(RBC)20计算RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×10血红蛋白测定方法氰化高铁光电比色法（HiCN法）碱羟高铁血红素法（AHD575法）十二烷基硫酸钠血红蛋白法(SDS-Hb法)21血红蛋白测定方法氰化高铁光电比色法（HiCN法）碱羟高铁血红原理血红蛋白被高铁氰化钾[K3Fe（CN）6]氧化成高铁血红蛋白（Hi）再与氰离子（CN-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白（hemigl-obinCyanide，简称HiCN）氰化高铁血红蛋白在波长540nm处有吸收峰，可用校准的高精度分光光度计进行直接定量测定。或用HiCN参考液进行比色测定。22原理血红蛋白被高铁氰化钾[K3Fe（CN）6]氧化成高铁血2323试剂：常用的Hb转化液为文齐氏液

静置操作：血液20ul+转化液5ml———

比色

5分钟计算：Hb（g/L）=

测定吸光度（A）×64458/44000×251

=

A×367.764458是目前国际公认的血红蛋白平均分子量44000是1965年国际血液学标准化委员会（ICSH）公布

的血红蛋白摩尔吸光度。251是稀释倍数24试剂：常用的Hb转化液为文齐氏液24作业实习指导思考题第2题25作业实习指导思考题第2题25谢谢大家26谢谢大家26红细胞和血红蛋白检测27红细胞和血红蛋白检测1目的掌握红细胞及血红蛋白的参考值及其临床意义掌握红细胞计数（显微镜计数法）、血红蛋白测定（氰化高铁光电比色法-HiCN法）的方法28目的2全自动血细胞分析仪29全自动血细胞分析仪3血常规30血常规4造血干细胞淋系髓系红系粒单系巨核系单粒B细胞T细胞血小板白细胞红细胞细胞免疫止血抗感染携氧体液免疫31造血干细胞淋系髓系红系粒单系巨核系单粒B细胞T细胞血小板白细原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞骨髓造血干细胞Epo红系祖细胞32原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞骨髓双凹圆盘形大小一致直径6-9μm厚2μm，中央约1μm四周呈浅橘红色，中央淡染异常：大小形态染色反应结构33双凹圆盘形异常：7复习成年男性、成年女性及新生儿红细胞及血红蛋白的正常参考值是多少？34复习8红细胞和血红蛋白正常值红细胞数血红蛋白成年男性(4.0～5.5)×1012／L120～160g/L成年女性(3.5～5.0)×1012／L110～150g/L新生儿(6.0～7.0)×1012／L170～200g/L网织红细胞：0.5％～l.5％意义：反映骨髓的造血功能35红细胞和血红蛋白正常值红细胞数血红蛋白成年男性(4.0～5.一般以血红蛋白为标准，成年男性血红蛋白＜120g／L，女性＜110g／L，即可认为有贫血贫血分为四级轻度血红蛋白＜参考值低限至90g／L中度90—60g／L重度60—30g／L极度＜30g／L病因红细胞生成不足、红细胞破坏过多、丢失过多贫血36一般以血红蛋白为标准，成年男性血红蛋白＜120g／L，女性升高：

相对升高——与脱水有关（吐、泻、汗、尿、灼等）绝对升高——与乏氧有关

生理性（高原、胎儿、新生儿、运动、精神因素）

病理性（心肺疾患、肿瘤、真性红细胞增多症）降低：

生理性降低——妊娠、婴幼儿、老年人

病理性降低——生成降低、原料不足、造血障碍、丢失增多（失血）、

破坏增多（溶血）

3711红细胞计数方法原理：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，滴入血细胞计数池内，然后于显微镜下计数一定范围内的RBC数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。38红细胞计数方法原理：12步骤1.准备：试管1只，加红细胞稀释液或生理盐水1.99ml2.采血：用血红蛋白吸管采血10ul3.稀释：4.冲液：要求一次冲液成功，静置两分钟后计数5.计数：先低倍镜后高倍镜

双线作单线计上不计下计左不计右

每个中方格内红细胞数相差超过15个应重做39步骤1.准备：试管1只，加红细胞稀释液或生理盐水1.994014为红细胞计数区域(低倍镜)41为红细胞计数区域(低倍镜)15RBC计数42RBC计数16充液位置充液位置43充液位置充液位置174418压线细胞的计数原则：计上不计下、计左不计右高倍镜，45压线细胞的计数原则：计上不计下、计左不计右19计算RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×106

＝5个中方格内RBC数/100×1012

报告方式×1012／L

R

B

C

：手工显微镜法红细胞计数(RBC)46计算RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×10血红蛋白测定方法氰化高铁光电比色法（HiCN法）碱羟高铁血红素法（AHD575法）十二烷基硫酸钠血红蛋白法(SDS-Hb法)47血红蛋白测定方法氰化高铁光电比色法（HiCN法）碱羟高铁血红原理血红蛋白被高铁氰化钾[K3Fe（CN）6]氧化成高铁血红蛋白（Hi）再与氰离子（CN-）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白（hemigl-obinCyanide，简称HiCN）氰化高铁血红蛋白在波长540nm处有吸收峰，可用校准的高精度分光光度计进行直接定量测定。或用HiCN参考液进行比色测定。48原理血红蛋白被高铁氰化钾[K3Fe（CN）6]氧化成高铁血4923试剂：常用的Hb转化液为文齐氏液

静置操作：血液20ul+转化液5ml———

比色