《临床免疫学和免疫检验》实验教学大纲

PAGEPAGE5《临床免疫学和免疫学检验》实验教学大纲（供五年制本科医学检验专业使用）Ⅰ前言本大纲供五年制本科医学检验专业学生使用组成，便于学生重点学习。44学时。版，2003年。Ⅱ正文实验一抗体的制备（综合性实验）一教学目的通过制备抗伤寒沙门菌抗血清，熟悉多克隆抗体的制备流程及抗血清的鉴定方法。二教学要求（一）掌握抗体产生的原理。（二）熟悉制备多克隆抗体的实验设计（三）了解抗血清的分离和保存三教学内容（一）免疫原（抗原）的纯化和制备。（二）实验动物的选择条件。（三）免疫方案的设计。（四）动物采血和分离血清。（五）抗血清效价滴测定定（试管法凝集试验。实验二单向免疫扩散试验一教学目的学习单向免疫扩散实验的实验原理、试剂与器材及操作方法。二教学要求（一）掌握单向免疫扩散实验的实验原理、试剂与器材及操作方法。（二）熟悉单向免疫扩散试验的结果判断。（三）了解实验注意事项及方法学评价。三教学内容（一）单向免疫扩散试验的测定免疫球蛋白的原理、方法及结果判断。（二）单向免疫扩散试验的测定免疫球蛋白影响因素。实验三胶乳凝集试验一教学目的学习类风湿因子（RF）测定的原理、方法及结果判断。二教学要求（一）掌握胶乳凝集试验的原理、方法及结果判断。（二）熟悉胶乳凝集抑制试验。（三）了解胶乳凝集抑制试验检测绒毛膜促性腺激素（HCG）方法及结果判断。三教学内容（一）胶乳凝集试验检测类风湿因子原理。（二）非特异反应的判断和排除。实验四酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原一教学目的学习酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的原理、试剂组成与所需器材、操作方法、结果判断。二教学要求（一）掌握酶联免疫吸附试验的原理、试剂与器材、操作步骤。（二）熟悉酶标免疫定量测定。（三）了解酶免疫组化技术，酶标记抗体的制备。三教学内容（一）酶联免疫吸附试验（ELIS）检测乙型肝炎表面抗原（HBsA。的原理作、结果判断。临界值的确定原则。（二（hook（zone的判断和克服办法。实验五免疫荧光显微技术检测抗核抗体一教学目的学习免疫荧光显微技术检测抗核抗体。鼠肝印片的制作。斑点金免疫渗滤试验检测抗DNA抗体。二教学要求（一（HEP-2细胞印片操作方法、结果判断。（二）熟悉抗核抗体阳性细胞核型分析。斑点金免疫渗滤试验。斑点免疫层析试验。（三）了解免疫标记技术的发展趋势。三教学内容（一）免疫荧光显微技术检测抗核抗体，鼠肝印片的制作。（二）斑点金免疫渗滤试验（dotimmunogoldfiltrationassay，DIGFA）检测抗DNA抗体。实验六单个核细胞的分离一教学目的离及活细胞计数。二教学要求（一）掌握单个核细胞分离的方法评价和临床意义。（二）熟悉单个核细胞分离的注意事项。（三）了解淋巴细胞E受体检测，淋巴细胞转化试验，NK细胞功能检测。三教学内容（一）密度梯度离心法分离单个核细胞的原理。（二）外周血单个核细胞分离及活细胞计数的试剂与方法、结果判断。实验七 淋巴细胞E受体检测—教学目的E受体为人类T细胞的重要标志，通过淋巴细胞E受体的检测，既能计数T细胞的量，又能反映T细胞的活性，从而了解机体细胞的免疫水平。二教学要求（一）掌握：淋巴细胞E受体的临床意义。（二）熟悉T淋巴细胞E花环的操作。三教学内容（一）淋巴细胞E受体检测实验原理、试剂与器材。（二）淋巴细胞E受体检测的操作方法、注意事项、方法评价及临床意义。实验八免疫印迹法检测-ENA抗体—教学目的学习免疫印迹技术的概念、实验原理、试剂与器材、结果判别及注意事项。二教学要求（一）掌握免疫印迹技术的概念、实验原理、试剂与器材及注意事项。（二）熟悉ENA抗体检测操作方法及结果判断。（三）了解ENA抗体检测的临床意义。三教学内容（一）免疫印迹技术的概念、实验原理及注意事项。（二）ENA抗体检测操作方法及结果判断。（三）ENA抗体检测的临床意义。Ⅲ教学组织与方法一实施机构：由医学检验系临床微生物免疫检验教研室执行。二组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、多媒体教学手段等。三教学方法：实验教学：布置实验内容，课堂讲解和演示，以151教学点：在医学检验学实验室教学，承担教师由临床微生物免疫检验教研室委派。辅导形式：课堂巡视和指导、讨论、复习等结合。四考核办法：实验考试占总评成绩的30%。其中学习态度占实验成绩的10%、综合（设计）实验成绩占30%、平时实验成绩占60%。内容学时内容学时实验类型抗体的制备（综合性实验）4（8综合型同学抽空完成）试管凝集试验4验证型单向免疫扩散试验（免疫球蛋白测定）4验证型酶联免疫吸附