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文档简介
..现代生物科技专题基因工程一、DNA重组技术的基本工具(填空)1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”。(1)本源:主要从________中分别纯化出来的。(2)作用特点:能够鉴别双链DNA分子__________________,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的______断开。(3)作用结果:产生________或________。答案:1.(1)原核细胞(2)特定核苷酸序列磷酸二酯键(3)黏性尾端平尾端2.DNA连接酶——“分子缝合针”。(1)作用:将________拼接成新的DNA分子。(2)种类:E·coliDNA连接酶:只能连接_____T4DNA连接酶:既能连接又能连接答案:2.(1)DNA片段(2)黏性尾端黏性尾端平尾端3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”。(1)作用:将________送入受体细胞中。(2)常用种类:______、λ噬菌体的衍生物、______。(3)特点:含有__________、______________切点,能在受体细胞中________________。DOC版...答案:3.(1)目的基因(2)质粒动植物病毒(3)标记基因多个限制酶复制并牢固保存二、基因工程的基本操作程序(填空)目的基因主要指编码蛋白的第一步①从基因文库中获取目的基因目的基因方法②利用扩增目的基因的获取③用直接人工合①启动子位于基因首端,是鉴别和结合部位第二步②停止子位于基因,使转录在所需地方停止基因表达③标记基因鉴别受体细胞中可否含有,载体成立从而将含的细胞精选出来④目的基因是插入的外源基因①导入植物细胞常用方法、基因第三步枪法和将目的基因②导入动物细胞常用方法导入受体细胞③导入微生物细胞常用方法①检测目的基因可否插入到染色体DNA上常用第四步技术目的基因②检测目的基因可否转录出了mRNA可用的检测与技术DOC版...表达③检测目的基因可否翻译成蛋白质可用杂交④检测转基因植物可否拥有抗虫或抗病特点,可做的接种实验答案:结构基因PCR技术化学方法RNA聚合酶尾端目的基因目的基因农杆菌转变法花粉管通道法显微注射法2+办理法DNA分子杂交分子杂交抗Ca原—抗体抗虫或抗病三、基因工程的应用(填表)技术名称应用动物基提高动物__________来提高产品产量;改进畜产质量量;用转基因动因工程物生产______;用转基因动物作器官移植的供体植物基培育__________植物、抗病转基因植物和________植物;利用转基因因工程改进植物的质量基因把________导入病人体内,使______________发挥功能,从而达到治治疗疗疾病的目的,分为______基因治疗和______基因治疗答案:生长速率药物抗虫转基因抗逆转基因正常基因该基因的表达产物体外体内四、蛋白质工程的盛行(判断正误)1.蛋白质工程是对组成蛋白质的氨基酸或蛋白质的空间结构进行操作,来改造蛋白质的技术。( )2.蛋白质工程的流程是:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测应有的氨基酸DOC版...序列→找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)。( )答案:1.×2.√1.(2013·苏卷,江22)(多项选择)小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应,为了战胜这个弊端,可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。以下相关表达正确的选项是( )A.设计扩增目的基因的引物时不用考虑表达载体的序列B.用PCR方法扩增目的基因时不用知道基因的全部序列C.PCR系统中必然要增加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D.必然要依照目的基因编码产物的特点选择合适的受体细胞解析:设计引物时应当与表达载体两端的序列进行互补配对A错误;PCR法扩增目的基因只需要知道基因两端的序列设计合适的引物即可,而不用知道其全部序列,B正确;PCR中应用耐高温的DNA聚合酶C错误;依照目的基因的编码产物选择合适的受体细胞,以有利于基因的表达,D正确,因此答案为BD。答案:BD2.(2013·徽卷,安6)以下列图为经过DNA分子杂交判断含有某特定DNA的细菌克隆表示图。以下表达正确的选项是( )DOC版....依照培育皿中菌落数能够正确计算样品中含有的活菌实质数量B.外源DNA必定位于重组质粒的启动子和停止子之间才能进行复制C.重组质粒与探针能进行分子杂交是由于DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接D.放射自显影结果能够显示原培育皿中含有特定DNA的细菌菌落地址解析:依照菌落数只能大体推测出活菌数,A错误;外源DNA作为一个完满的基因,自己含有启动子和停止子,B错误;DNA杂交是利用碱基互补配对原则进行的,C错误;由于放射性标记的DNA探针能与相应的DNA杂交,而产生放射自显影,而只有特定的DNA才与探针相结合,因此能够显示原培育皿中含有特定DNA的细菌菌落地址,D正确。答案:D3.将ada(腺苷酸脱氨酶基因)经过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。以下表达错误的选项是( ).每个大肠杆菌细胞最少含一个重组质粒B.每个重组质粒最少含一个限制性核酸内切酶鉴别位点C.每个限制性核酸内切酶鉴别位点最少插入一个adaD.每个插入的ada最少表达一个腺苷酸脱氨酶分子解析:将重组质粒导入大肠杆菌中并成功表达,说明大肠杆菌内最少含有一个重组质粒;DOC版...每个重组质粒都含有目的基因ada,则该重组质粒最少含一个能被该限制性核酸内切酶切割的位点;限制性核酸内切酶拥有特异性,种类不同样,识其余位点不同样,切割出的黏性尾端也就不同样,因此其实不是每个位点都能插入ada;依照题干信息,导入重组质粒的大肠杆菌成功表达出腺苷酸脱氨酶,说明插入的ada最少表达出一个腺苷酸脱氨酶分子。答案:C4.北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白拥有11个氨基酸的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强。以下列图是获取转基因抗冻番茄植株的过程表示图,相关表达正确的是( ).过程①获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能够获取抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②组成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行精选D.应用DNA探针技术,能够检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完满表达解析:将多个抗冻基因编码区相连成能表达的新基因,合成的蛋白质为新的蛋白质,不能获取抗冻性增强的抗冻蛋白,应选项B正确;过程①是利用反转录法合成目的基因,由于没有非编码区和编码区中的内含子,不能够用于比目鱼基因组测序;用作载体的质粒,必定拥有标记基因才能便于检测和精选;应用DNA探针技术,可检测转基因抗冻番茄中目的基DOC版...因的存在和转录,但不能够检测可否成功表达,应选项A、C、D错误。答案:B5.(2013·京卷,北30)斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。拥有纯合突变基因(dd)的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白(G)基因整合到斑马鱼17号染色体上,带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。用个体M和N进行以下杂交实验。在上述转基因实验中,将G基因与质粒重组,需要的两类酶是_____________和_____________。将重组质粒显微注射到斑马鱼______________中,整合到染色体上的G基因_____________后,使胚胎发出绿色荧光。(2)依照上述杂交实验推测:①亲代M的基因型是______(选填选项前的符号)。a.DDggb.Ddgg②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括______(选填选项前的符号)。a.DDGGb.DDGgc.DdGGd.DdGg(3)杂交后,出现红·绿荧光(既有红色又有绿色荧光)胚胎的原因是亲代________(填“M”或“N”)的初级精(卵)母细胞在减数分裂过程中,同源染色体的________________发生了互换,以致染色体上的基因重组。经过记录子代中红·绿荧光胚胎数量与胚胎总数,可计算获取该亲本产生的重组配子占其全部配子的比率,算式为_____________________。DOC版...解析:(1)基因工程操作过程中需要两类工具酶:限制性核酸内切酶DNA连接酶。动物细胞工程的受体细胞一般是受精卵。(2)由于出现了绿色荧光(D_G_)和红色荧光(ddgg)的子代胚胎,则亲代M中必然均含有d基因,同时可推出M和N的基因型是:Ddgg、DdGg,由此可知第一问选b,第二问选b、d。(3)由题可知,D与G是连锁遗传的,再由第(2)题的分析可知,其基因解析以以下列图(左)所示,因此正常情况不会产生红·绿荧光胚胎,除非亲代N的在减数分裂过程中同源染色体发生了交织互换,形成以以下列图(右)所示的情况。若亲代N产生的配子中重组的配子(
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