2023版高三一轮总复习生物人教版选择性必修3 第10单元 科学探究系列6电泳鉴定及应用

1．核酸凝胶电泳一般用琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定和纯化DNA或RNA片段。电场强度越大、电泳分子所携带的净电荷数量越多，其迁移速率也就越快，反之则较慢。在一定的电场强度下，电泳分子的迁移速率取决于核酸分子的大小和构象以及凝胶的浓度等。在生理条件下，核酸分子的糖—磷酸骨架呈离子状态，即DNA和RNA多核苷酸链称为多聚阴离子。因此，当核酸分子被放置在电场中时，它们就会向正电极的方向迁移。由于糖—磷酸骨架结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因而它们能以同样的速度向正电极方向迁移，从而分离出相应的DNA片段。2．蛋白质凝胶电泳一般用十二烷基硫酸钠(SDS)—聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白质进行分离、纯度鉴定等。SDS是一种阴离子去污剂，可与蛋白质结合，使蛋白质变性并带上负电荷。待分离蛋白质样品在电泳中的迁移速率与蛋白质本身性质、凝胶孔径和电泳条件(如电流、电压)等密切相关，蛋白质结合大量的SDS后，各组分子间的形状和电荷差异被抵消，此时蛋白质在电场中迁移速率的快慢，仅与各自分子量的大小有关，从而分离出相应的蛋白质。1．用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述错误的是()图1酶切位点图图2电泳结果示意图A．电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程B．泳道①中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物C．若用XhoⅠ和SalⅠ两种酶同时处理该DNA片段后电泳，其泳道可能只有5条D．电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系鉴定B[电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程，A正确；限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，B错误；限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，结合题图可知，若用XhoⅠ和SalⅠ两种酶同时处理该DNA片段后电泳，可能存在相同长度的DNA片段，其泳道可能只有5条，C正确；不同生物的DNA切割后长度不同，切割后再进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，D正确。]2．用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液(Marker)，10号为电泳缓冲液。进行PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析不正确的是()A．PCR产物的分子大小在250～500bp之间B．3号样品为不含目的基因的载体DNAC．9号样品对应植株不是所需的转基因植株D．10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰B[PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段，4～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号电泳缓冲液组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250～500bp，A正确；3号PCR结果包含250～500bp片段，应包含目的基因，B错误；9号PCR结果不包含250～500bp片段，所以不是所需的转基因植株，C正确；10号加入电泳缓冲液，可排除反应体系等对结果的干扰，D正确。]3．对凝胶电泳的相关认识错误的是()A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小B．蛋白质在SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小C．SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响A[蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率决定于分子的大小和所带电荷等，A错误；由于加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质­SDS复合物”，蛋白质在SDS­聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小，B正确；SDS­聚丙烯酰胺凝胶电泳用于蛋白质混合组分的分离的原理就是不同蛋白质其相对分子质量不同，因