疟原虫常识与镜检

关于疟原虫常识与镜检第1页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

主要内容：

一.疟原虫的种类与分布

二.疟原虫生活史与病症概述

三.疟原虫的形态与镜检技术

四.培训实时测验

第2页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

“疟”字释疑：

根据《新华字典》“疟”属多音字

1.疟（读Yào）指疟疾，俗称。

2.疟（读Nüè）指疟疾，一种急性传染病，病原体是疟原虫，传染源是蚊子，为周期性发冷发热的症状。第3页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

历史回顾3千多年前，“疟”的象形文字出现在隋代《诸病源候论》，及以后国内外某些医学家均认为疟疾是“瘴气”所引起的。

1880年法国人AlphonseLaveran在疟疾病人红细胞中发现疟原虫。1897年英国人RonaldRoss发现蚊虫与传播疟疾的关系。1948-1960年Shortt及Garnham证实了人类疟原虫的肝细胞外期。1977-1980年Lysenko和Krotoski等提出“休眠子”学说。

经过一个世纪的研究，疟原虫生活史得以基本阐明。第4页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

疟原虫的分布与种类

分布

疟原虫主要分布在地球热带、亚热带各国，即非洲、东南亚、南美等地区，约有20亿人口在疫区。每年死于疟疾的儿童约100万。我国在华南、华中的某些地区，特别是云南和海南省，因此，疟疾仍是我国重点防治的寄生虫病之一。种类

至今全球发现疟原虫有130多种，宿主：人类、哺乳动物、鸟类及爬行类。

寄生于人体的疟原虫共有如下四种：

第5页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五间日疟原虫

（PlasmodiumvivaxP.v）间日疟48h温带普遍感染流行最广恶性疟原虫

(PlasmodiumfalciparumP.f)恶性疟36—48h热带亚热带海南、云南、贵州三日疟原虫

(PlasmodiummalariaeP.m)三日疟72h热带少见卵形疟原虫

(PlasmodiumovaleP.o)卵形疟48h热带罕见目前，我省只有间日疟和恶性疟。卫生部要求：我省应在2012年消除疟疾！寄生于人体的四种疟原虫第6页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五通过按蚊叮咬进入人体第7页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五二.疟原虫生活史概述子孢子雌蚊吸血，经皮肤侵入人体移入肝细胞速发型子孢子迟发型子孢子（约6-12个月休眠）无性裂体生殖裂殖体胀破肝C释放裂殖子某些因素刺激侵入血流进入RBC环状体裂体增殖大滋养体早期裂殖体成熟裂殖体裂殖子

胀破RBC释放经过几次裂体增殖雌配子体雄配子体雌蚊吸血进入蚊胃雌配子雄配子合子配子结合动合子穿过胃壁在胃壁下卵囊孢子增殖侵入新的RBC遗传基因多态性分型自然气温16℃-30℃蚊体内P.V8-9天P.f10天RBC外期P.V8天P.f5天RBC内期P.V48hP.f36-48h

内潜伏期外潜伏期第8页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

人疟原虫完成其生活史需要人和按蚊两个宿主。

1.在按蚊体内进行有性繁殖，按蚊是疟原虫的终末宿主。

2.在人体内进行无性增殖，人是疟原虫的中间宿主。电镜下MP感染的RBC和裂殖子的释出（人卫版本科教材）第9页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五疟疾病症典型症状：

周期性寒战、高热（T：39-40℃）、出汗,

每次发作时间6~10h。热型：

即周期性与红内期裂体增殖周期一致。

P.v、P.o—48h

P.f—36~48h，渐不规则

P.m—72h贫血：

A.与RBC大量直接破坏有关。

B.脾亢，脾肿大、单核巨噬细胞增生所致，2~6

倍大，巨噬细胞增多，吞噬增强。

C.骨髓中RBC生成障碍。

D.自身免疫破坏RBC。第10页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五37C

0

发烧发烧

裂体增殖48h隔日PV热型与原虫发育的关系第11页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五海南省琼中县儿童因疟疾引起的脾脏肿大（人卫版本科教材）第12页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

疟原虫营养代谢胞饮、吞噬摄取营养蛋白质：氨基酸来自血红蛋白、血浆

RBC珠蛋白+血红素—疟色素（R除外各期消化分解Hb后的最终产物

）能量：葡萄糖来自血浆，但要利用RBC

中的G6PD

缺乏G6PD的病人对疟原虫有选择抗性第13页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

疟原虫的寿命

疟原虫在人体内有一定的寿命，恶性疟原虫约1年，其中大部分只活到6~8个月；间日疟原虫为1年半至3年，不超过4年。人体免疫力对疟原虫的生存是有影响的，所以，这里说的疟原虫的寿命与指疟原虫在一定条件下的寿命；或者说是感染后的疟疾病程。第14页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五疟原虫的形态与镜检技术

1.形态

人体疟原虫的基本构造：胞核、胞质和包膜疟原虫形态检查三要素：胞核、胞质和虐色素胞核即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈鲜红色，呈圆形或不规则的颗粒状。核的结构致密，只有在个别发育阶段较为疏松。例如间日疟原虫雄配子体的核，有时因胞浆厚密或染色深蓝，使核呈暗红或紫红色。胞质被染成蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细胞浆逐渐增多。间日疟原虫发育到大滋养体阶段，胞浆呈阿米巴样活动，胞浆内有空泡。

疟色素不着色，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒呈细小杆状，黄褐色；恶性疟原虫色素呈块状，黑褐色；三日疟原虫的色素呈砂粒状，深褐色；卵形疟原虫的色素与间日疟原虫相似。疟色素在虫体内散在分布或聚集成团块。第15页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

各期疟原虫形态比较英文缩写代号：

MP——疟原虫

P.v——间日疟原虫

P.f——恶性疟原虫

P.m——三日疟原虫

P.o——卵形疟原虫

R——环状体（小滋养体）

T——大滋养体

S——裂殖体

G——配子体

P.f的T、S主要在皮下、脂肪和内脏微血管中发育，G成熟后，约在无性体出现后7~10天才见于外周血液中。因此，通常外周血检查只见到R和G这两期的P.f，这是鉴别P.v、P.f的要点之一。第16页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五被疟原虫寄生的RBC变化

虫种RBC大小RBC颜色间日疟胀大变淡恶性疟正常或缩小正常第17页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

薄血膜中P.v的形态环状体(P.v.R)P.v.R

约占寄生红细胞的1/3，很少见到一个红细胞寄生2个环状体和一个环状体有2个核。P.v.R第18页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五大滋养体(P.v.T)经8～10小时，虫体增大，胞质增多，伸出伪足。出现黄褐色的疟色素。红细胞胀大，变形，颜色变淡，并出现数量较多，淡红色的小点，称薛氏小点第19页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五成熟裂殖体（P.v.S）红细胞：胀大，褪色，可见薛氏小点。大小：个体较大。胞浆和核：裂殖子12~24个平均16个，排列不规则，核红色，胞浆浅兰色。色素：黄褐色常集于疟原虫的一边。第20页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五P.v.S实体标本镜检形态（吉氏染色）第21页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五间日疟原虫雄配子体(P.v.G)

间日疟原虫雌配子体(P.v.G)虫体较小，占满胀大的红细胞胞质浅蓝核大疏松，淡红色，多位于虫体的中央。疟色素分散虫体较大，占满胀大的红细胞胞质致密，色深蓝核小致密，深红色，多位于虫体一侧疟色素分散

第22页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五P.V雄配子体P.V雌配子体实体标本镜检形态（吉氏染色）P.V.G的雌雄实体第23页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五间日疟大滋养体(T)与配子体(G)的区别

TG虫体：较小较大胞浆：边缘不规则可见空泡边缘规则无空泡

核：

较小、不规则较大有不染色带色素：

较少、分布不匀，色素分布均匀TG第24页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五薄血膜中P.f的形态虫体：约占RBC的1/5-1/6,环状。常见几个虫同时寄生在同一细胞核：小致密规则、常见2个核胞浆：纤细完整P.f.R第25页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五P.f.GP.f.G第26页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五疟原虫厚、薄血膜镜检的主要形态变异

薄血膜：原虫寄生在红细胞里,形态典型,易鉴别,但一般只用于教学和虫种鉴别.

厚血膜：经染色血红蛋白溶解，轮廓消失，但有时尚留下残骸的“影子”或点彩。厚血膜由于细胞重迭，干燥缓慢，虫体形态发生较大变化,特别是小滋养体和大滋养体变化就更大，常呈分号“；”和感叹号“！”状；飞鸟“⌒.⌒”、“V”状。而大滋养体空泡消失，胞浆断裂成块是它的特点。裂殖体和配子体的形态则无明显变化。虽然大、小滋养体形态千变万化，但只要掌握疟原虫的核、胞浆、色素三个要点是不难鉴别的。第27页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五

厚血膜

一般门诊须检查200~1000个油镜视野（相当于0.5~2.5μl血量），才能确保镜检的敏感性和可重复性。通常的敏感性可达约10~20个原虫/μl血。由于厚血膜比薄血膜用血量大，涂布面积小，阳性检出率较高。查出疟原虫数是薄血膜的15～25倍。因此，疟疾诊断性镜检应以检查厚血膜为主。均应查完整个厚血膜，未查见疟原虫则判为阴性。第28页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五间日疟原虫恶性疟原虫厚血膜集中视野第29页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五各种不同时期疟原虫形态的比较第30页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五薄血膜

P.v.R

P.f.R大小：约占RBC的1/3约占RBC的1/5部位：RBC里少见多个虫同时寄生RBC的边缘、常见多个虫同时寄生核：大、较松、两核少见小、致密、两核多见胞浆：较粗、不规则纤细、规则第31页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五P.v.R对比P.f.R厚血膜第32页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五厚血膜P.v.G对比P.f.G第33页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五血片中的PC、杂质注意杂质与疟原虫的区分PC杂质第34页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五镜检技术

1.采血时间：

P.v——发作后10小时内采血，各期（R、T、S、G）疟原虫均可查见。

P.f——发作时采血可查到R；发作后10天左右采血可查见G。

2.厚薄片的制作：

厚血膜—取约4ul血液置于玻片合适位置上，用推片一角由里向外旋转2-4圈，涂成直径0.8-1厘米大小的圆形均匀血膜。薄血膜—取约1ul血液置于玻片合适位置上，推成宽2厘米、长2.5厘米的血膜。

同片可制作两个厚血膜，一个薄血膜（见下图）。玻片头可粘贴患者信息，亦可在薄片头以铅笔写上患者姓名、编码等。

第35页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五3.染色（1）首先晾干血片，以甲醇或无水酒精固定薄血膜。应用

吉氏染色法，每张玻片约需染液1ml。（2）配制染色工作液：1ml清洁水（Ph7.0-7.2）+1-2滴吉氏原液/血片，混匀。须现配现用。（3）将配好的吉氏染液滴入血片，并均匀分布染色10-20分钟。然后用清水轻轻将染液冲洗干净，晾干待检。4.镜检

（1）一般只查厚片，薄片仅作为疟原虫分类参考和编号用。（2）可先以油镜头配合5X低倍目镜镜检，有疑问时可调换10X目镜进行观察。（3）检查时应从厚血膜的上缘开始，按下图示意的顺序方向，视野稍叠视野地查完整个血膜。第36页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五厚血膜镜检示意图第37页，共40页，2022年，5月20日，16点56分，星期五5.结果报告

阴性：报告“未查到MP”阳性：报告“查到XXXMP”厚血膜疟原虫镜检“记号”报告法：