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文档简介

ー、名词解释.品种:经多代人工选育成的,具有遗传稳定,并有别于原种或同种内其它群体,具有优良经济性状及其它表型性状的水生生物群体;.品系:来源于ー个亲本对(或)共同祖先形成的群体,它具有突出的特点和性状,相对稳定的遗传性和一定数量的个体;.家系:由一对系祖繁育而来的群体;.单系:由一个系祖繁育而来的群体;.种群:通过交配以及具有一定的亲缘关系发生联系,并享有共同的基因库的群体;.人工选择:以人类需要为依据,定向的改变种群的基因频率,进而改变生物类型,打破种群在自然环境中繁殖的随机性,从而形成各种不同的品种的选择方式;.限性基因:只在雌性或雄性身上出现的基因;.选择差:指已选择个体性状的平均值与选择前整个群体该性状平均值间的差数;.选择强度:是标准化的选择差,在数值上等于选择差(S)除以被选择群体的表型值标准差(0);.选择压カ:是指作育种对象的个体数(n)占选择前群体总个体数(N)的百分比值,也称中选比例;.选择反应:又称选择效应,是ー种衡量选择效果的指标,指受选择性状经一世代的选择后,性状平均值的变化情况,在数值上等于选择亲本所繁殖的子代表型平均值减去选择前群体的表型平均值;12.世代间隔:指子代出生时其父母的平均年龄;13.育种值:又称为种用价值,是个体育种植的简称,指的是种用个体的遗传特性,就某ー性状而言,则是个体的遗传型(基因型);14.级进育成杂交:又称吸收杂交,是根据当地的自然条件、经济条件和生产需要以及原有地方品种品质等客观条件确定的育成目标,将一个品种的某些基因逐渐引进到另一个品种的基因库中的过程;.近交系数:表示反系亲缘关系相近程度的系数;(越高越好).回交:是指杂种后代与亲本之一再行杂交;.杂种优势:指两个或两个以上不同遗传类型的个体杂交所产生的杂种第一代,往往在生活力、生长势和生活性能等方面在一定程度上优于两个亲本种群平均值的现象;.远缘杂交:指亲缘关系比较远的生物类型之间的杂交,即起码是种与种之间的杂交;.雄核发育:通过用放射线照射或其他方法完全使卵核的遗传物质失活,仅把卵子作为营养源,依靠精子由来的精核发育成胚胎的现象;.多倍体育种:系统地研究生物染色体倍性变异的规律,并利用倍性变异选育新品种或新的养殖对象;.细胞融合:又称体细胞杂交或超性杂交,在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质融合形成一个杂种细胞的现象称为细胞融合;.细胞核移植:应用显微操作技术,将一种动物细胞的细胞核移入到同种或异种动物的去核成熟卵内的精细技术;.克隆:由一个细胞或个体以无性繁殖方式产生遗传物质完全相同的一群细胞或一群个体;.胚胎干细胞:(ES)细胞,是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的ー类细胞,它具有体外培养无线增殖,自我更新和多向分化的特性,无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型;.转基因:借助基因工程技术将确定的外源基因通过生殖细胞或早期胚胎导入植物体或动物体的染色体上,称为转基因;.启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因首端,,是聚合酶结合和识别的部分,能驱动基因转录;(是DNA分子结构RNA聚合酶形成转录起始复合物的区域,他和增强子(增强转录活性的结构)ー起构成了基因转录的顺式作用原件);.编码序列:编码特定蛋白质的核甘酸序列,能使转基因生物产生新的表现型;.全鱼基因:在做鱼的转基因时,转入外源基因的启动子,目的基因和终止子全部来源于本身的叫全鱼基因;.目的基因:编码蛋白质的结构基因;.转化:使目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程;.随机扩增多态性DNA(RAPD):利用人工随机合成的寡聚脱氧核甘酸为引物(通常长度为10个核甘酸),PCR扩增基因组DNA片段;二、填空水产缶物的育种目标中主要目标性状有生长率,饲料转化率,繁殖特性,抗病能力,适应特性,体色与体形,产品品质(风味,肉质);水产动物的遗传特点:群体大,个体间交配随机性大,群体内遗传多样性丰吉杂厶度高;水产动物育种方法有选择育种、杂交育种、引种和驯化、生物技术;其中生物技术包括单倍体育种,多倍体诱导,细胞核移植,转基因技术,分子标记技术;品种应具备的条件:性状及适应性相似,具有稳定的遗传性,生产性能优良,具有一定数曷•品种分为育成M种,自然后种,原种,杂交种;品种的命名中,G为“国"的第一个拼音字母,以表示国家级品种;S为“审”的第一个拼音字母,表示审定通过的品种;品种和引进种统称为品种,01,03代表品种和引进品种的顺序号;001,002为品种顺序号;年代为审核通过的时间,如GS01001-2000为团头鲂浦江1号的命名登记号;根据亲缘关系分类,将基因库分为初级基因库(同一种内的材料),次级基因库(种间材料或近缘野生种),三级基因库(远缘种属);按照来源分类,种质资源分为四类:本地种质资源、外地种质资源、野生种质资源、人工创造种质资源;种质资源的保存方式有活体保存,标本保存,精子冷冻保存,细胞、分子保存技术,利用天然水域保存种质资源技术,种质资源数据库;种质材料的形式有:群体、器官、个体,染色体等;选择育种的原理:达尔文的选择学说和纯系学说;质量性状举例:显性性状如马赛克和草尾;隐性如孔雀鱼的白子和粉红,虎斑;设群中隐性基因的频率是0.10,每代均将隐性纯合个体淘汰,经六代选择,其隐性基因的频率(q6)为?q产q。/(1+nq。);所以q6=0.10/(1+6*0.10)=0.0625;数量性状数学模型:数量性状表型值(P)线性剖分为基因型值(G)和环境效应值(E);(ス是基因型和环境的互作偏差效应可忽略不计);可将基因型值G剖分为育种值(A)、显性效应偏差值(D)和上位效应偏差值(I)三个部分,D和I具有一定的随机性,一般均将他们归并到环境效应偏差之中,统称为剩余值,记为R;P=G+E=A+D+I+E=A+R,其中能稳定遗传个下一代的是基因的加性效应A;遗传カ的分析方法有完全同胞或半同胞的方差分析;用以说明人工选择情况与效果的参数有选择差、选择强度、选择压カ、选择反应和世代间隔等;选择育种的方法有家系选择,亲本选择(后裔选择),混合选择(个体选择),综合选择,多样性状选择;多性状选择基本方法有顺序选择法,独立淘汰法和综合指数法;育种值估计方法有选择指数法(综合指数法)、最佳线性无偏预测法(BLUP)、标记辅助BLUP法(MBLUP)育成杂交分为简单育成杂交,级进育成杂交,引入育成杂交,

综合育成杂交;级进育成杂交到第一代时,后代亲本基因占(改良品种)50除第二代时占75%,第三代占87.5%,第四代占93.75%;引入育成杂交在引F3中,含当地被改良品种遗传性的87.5%,含改良品种遗传性的12.5%;双亲纯合程度越高,杂种优势就越大;杂种优势在杂种第一代表现最为明显,F1自交或杂交产生的F2优势就显著降低,而且杂种优势越强的组合,其优势下降程度越大,因此在生产上多用杂种第一代;杂种优势的理论基础有显性学说,超显性学说,遗传平衡学说;杂种优势的度量用杂种优势率,H=Yab-1/2(Ya+Yb);H为杂种优势,Yab为杂种AB的群体均值,匕为A群体的均值,Yb是B群体的均值;杂种优势中的杂交组合方式有普通经济杂交(二品种经济杂交,多品种经济杂交),轮回经济杂交,双杂交;杂交育种分类;恒心声图挙作]多・林向ヨ卓血肆女

單述育成杂交二必科•垓音冃血糸々学经讲糸文・,多盘,聊慳单•经济杂交先讲杂交怆先讲杂交怆ひ其经诉杂交双拳交远缰经讲步交雌核发育分为天然雌核发育,人工雌核发育;多倍体按来源不同可分为同源多倍体和异源多倍体;细胞融合包括精子和卵子的融合,正常情况下不能进行有性杂交的异种细胞融合成杂种细胞;细胞融合的方法有生物融合(病毒融合),化学融合,电融合,激光融合;化学融合剂有聚乙二醇(PEG),硝酸盐,磷酸盐,丙三醇,膜动剂(AZC)等,聚乙二醇作为融合剂应用最广,效果最好;由于细胞质(线粒体)中含有少量的遗传物质,故细胞核移植所得杂种称为核质杂种,也称克隆动物;世界首例转基因鱼的诞生是通过显微注射方法,将人的生长激素基因和小鼠重金属螯合蛋白启动子相结合,注入鲫鱼受精卵;转基因品种主要涉及经济鱼类(虹鱒、鲤鱼、罗非鱼),小型实验动物鱼类(斑马鱼、青鏘)、观赏性鱼类(斑马鱼、青鏘、唐鱼);经济品种的转基因研究主要集中在生长、抗寒和抗病方面,因此生长激素基因、抗冻蛋白基因、抗菌肽和溶菌酶基因等为主要的目的基因;在转基因研究早期,使用的启动子大多为小鼠金属硫蛋白(mMT)基因或病毒如猴空泡病毒(SV40)和禽肉瘤病毒(RSV)等;转移到受体中的外源基因其结构一般包括启动子,目的基因和转录终止信号;原核基因可直接分离得到真核基因,用反转录法和化学合成法;PCR技术扩增目的基因的原理是;DNA双链复制;外源基因结构、;目的基因+启动子+终止子+标记基因;表达载体一般为质粒或噬菌体;整合分为有效整合,无效整合,毒性整合;检测染色体DNA上是否插入目的基因,用DNA分子杂交技术;检测目的基因是否转录出mRNA,用标记目的基因做探针与mRNA杂交;检测目的基因是否翻译成蛋白质,从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原一抗体杂交;基因复制有两种方法;PCR扩增技术和用载体(质粒或噬菌体)做扩增;可用载体做扩增的原因是质粒或噬菌体可转入大肠杆菌随大肠杆菌的增长而复制;做PCR需要引物,DNA聚合酶,dNTP;RELP标记有共显性的特点;三、选择判断.稳定性选择;淘汰极端变异个体,保留中间类型;单向性选择;保存趋向于某ー极端个体,淘汰另一极端个体ー一向某ー变异方向发展;分裂性选择;保留不同方向极端个体,淘汰中间型ー分裂不同亚种;.质量性状对隐性基因的选择是选隐淘显,对显性基因的选择是选显淘隐;.遗传カ反映的是亲代的数量性状遗传给子代的能力,遗传カ高的形状,子代重现亲代性状的可能性就大;.一般认为!?>0.2的遗传カ性状就有选择效果,一般情况下所说的遗传カ就是狭义遗传カ;.个体加性效应的高低反映了在育种贡献上的大小,因此称为育种值;.体细胞杂交属于生物技术中细胞工程学的ー个分支,与染色体エ程,染色体组工程和细胞质工程有所区别;.仙台病毒通过破坏细胞壁使细胞融合;是最早发现的可使细胞融合的病毒;8,核移植个体的性状以细胞核供体为主,部分显示细胞质受体的个别性状(细胞质遗传);9.在斑马鱼和青鏘中建立了ES细胞系;转基因培育出来的第一个动物是超级小鼠;是将大鼠的生长激素基因转入小鼠体内;生长激素基因是最常用的外源基因;目前克隆鱼类自身的高效启动子常用Bー鲤鱼肌动蛋白启动子;鱼类转基因的研究是从生长激素(GH)基因开始的;目的基因用来编码序列;标记基因用来鉴定受体细胞中是否含有目的基因,常用抗生素抗性基因;.目的基因随质粒的复制而复制;.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达;.转基因植物(GMP)有大豆(62%),玉米(21%),棉花(12%),油菜,番茄;四、简答.品种应具备的条件有哪些?答(1)性状及适应性相似(2)具有稳定的遗传性(3)生产性能优越(4)具有一定的数量;.达尔文选择学说的内容;答、有三大要素是变异、遗传和自然对变异的选择;变异是选择的基础,遗传是选择的保证,选择是便宜能有效遗传的手段;.质量性状选择;答、A、对隐性基因的选择:选隐淘显;B、对显性基因的选择:选显淘隐;步骤:第一步:根据表型淘汰隐性纯合体:设群中隐性基因的频率是0.10,每代均将隐性纯合个体淘汰,经六代选择,其隐性基因的频率(q6)为?qn=q0/(l+nq°);所以q6=0.10/(1+6*0.10)=0.0625;第二步:利用测交法或自交法淘汰杂合体;C、对杂合子的选择:如红鲤和五花金鱼的选择(看哪个显色哪个不显色);分为两种情况:(1)等位基因完全显性,不能区分显性纯合子和杂合子,需测交或自交;(2)等位基因是共显性、不完全显性或镶嵌显性,非常容易根据表现型区分纯合子和杂合子。纯合子表型与杂合子表型区别极大,通过直观观察即可选出;D、对伴性基因的选择:举例:雄鱼外观靓丽,大部分的表现都是限性基因,如白金、珊瑚、蛇王、日本蓝等等;少数伴性基因,雌鱼发色浓厚且明显就可以判断是伴性基因,如草尾,ネL服。.影响数量性状选择效果的三因素;答、数量性状的选择效果受性状的变异程度、性状的遗传カ和人工选择情况三方面因素的影响,变异程度和遗传カ是生物的内部属性,也是影响选择效果的主要因素;人工选择情况是影响选择效果的外部因素,在一定条件下对选择效果起决定性作用,用以说明人工选择情况与效果的参数有选择差、选择强度、选择压カ、选择反应和世代间隔等;.怎样防止近交衰退?.杂种优势的特点;答、(1)杂种优势不是某ー两个性状表现突出,而是许多性状综合地表现突出。因此,凡是表现杂种优势的组合,其生长势,抗逆性,产量和适应性等方面通常都有优势;(2)杂种优势的大小大多取决于双亲性状间的相对差异和互补程度;一定范围内,差异越大,杂种优势越强;(3)双亲的纯合程度越高,杂种优势越强,反之则弱;(4)杂种优势在杂种第一代表现最为明显,F1自交或杂交产生的F2优势就显著降低,而且杂种优势越强的组合,其优势下降程度越大,因此在生产上多用杂种第一代;.举例孔雀鱼的杂交育种;答、ー、稳定系统中加入缺少表现型;例1、红色自交系,但色泽不亮丽;方法:现已发现有大约4-5个不同的基因控制红色的表型,如红色系缺少了其中某个基因,可以杂交的方式重新引入这些基因,以增加系统中红色的表现;例2、选育大型背鳍:方法1.传统自交方法,经过几代选种,可能得到大型鳍的个体;2、利用杂交育种,快速引入大型背鳍的基因,短时间内完成育种;在引入系统外的基因时,必须维持原有系统的优良性状;步骤:(1)杂交用系统的选择:①杂交用系统必须是经过自交或同品系内互相交配多代后所得到的稳定系统ー(近交系),即系统中每ー个雄鱼的外表都不会有太大的差异;②杂交用系统必须和原有系统为同一类型种类,如红色系和红色系杂交,蓝色系和蓝色系,礼服同色系之间也可以互相交配;(2)正反交试验:分别选择两系统中表现型最好的雄鱼和雌鱼,互相交配(正反交),得到两组交配的组合数,子代分开饲养,分辨何种组合最佳;(3)表现型的选择:如果F1雄鱼中发现想要引入的特性已经表现出来,表示此基因为显性,将F1雄鱼挑出与原系统雌鱼交配(要维持好原系统)(4)连续回交,引入新基因并保持原有性状;.维持一已建立系统到如子代体形缩小或后代数目大量减少的情形有哪些?答、隐性基因的个体(如白子,黄化种等)必须进行同种异质基因交配,否则(例如:白子蛇王未搭配普通色的蛇王),系统便难以维持,普通种到第四代时,基因会急剧衰退,因此F2或F3代时就必须与另ー系统的普通种进行同种交配;白子同胎交配时,约到第二代体型开始变小,所以维持白字系统的方法有白子(aa)X第一代(Aa)»后代白子(aa)和普通种(Aa)各50%的比例,是系统维持的理想作法,但是同胎交配基因衰退,因此F3就必须再进行同种异质基因交配;.孤雌生殖和雌核发育的区别;答、孤雌生殖;在有性生殖的生物中卵子不经授精而发育成子代的ー种生殖方式,可分为(1)产雄孤雌生殖;eg:蜂王(n=32)产生需精卵和非需精卵,未受精卵发育成雄蜂(n=16),受精卵发育成工蜂和蜂王;(2)产雌孤雌生殖:轮虫、水蚤等在夏季食物充足,气候适宜的条件下,雌体产夏卵,营孤雌生殖,后代全为雌性;(3)人工孤雌生殖;雌核发育;有三种类型,即第一极体抑制型,第二极体抑制型,卵裂抑制型;在不受精染色体在极体排放和卵裂前均为n,为了使染色体加倍;鱼类需要抑制第二极体排出和卵裂;贝类需要抑制第一或第二极体排出和卵裂;因此鱼类的雌核发育二倍体只有第二极体抑制型和卵裂抑制型;贝类雌核发育二倍体有三种类型;.雄核发育的应用前景?答、(1)濒危物种保护(2)全雄生产(3)克隆(4)有害隐性基因的排除(5)核质杂种. 人工雌核发育在水产养殖中的应用;答、(1)生产上凡银鲫卵子+异源精子人工授精所产后代均为异育银鲫(2)快速建立纯系;. 诱导鱼类多倍体方法有几种?答、(1)物理方法;①温度休克法;温水性鱼类可以用热休克,也可用冷休克,温度范围在0T0℃左右;鲤鱼用热休克可以获得较高比例的三倍体,香鱼三倍体的诱导用冷、热休克均可获得令人满意的结果;②静水压カ处理③电休克法;(2)化学方法;秋水仙素,细胞松弛素B,聚乙二醇,6一二甲基氨基喋吟,咖啡因;(3)生物学方法:远缘杂交;核移植及细胞融合;. 温度休克诱导鱼类多倍体应注意几点?答、(1)处理开始时间(2)持续时间及温度高低(3)鱼类温度休克敏感性的差异除了遗传背景外,还与卵子成熟度有关;. 通过细胞核大小鉴定鱼类多倍体的依据?.性反转在水产养殖中的应用ーー罗非鱼的三系配套技术;答、三系为原系(XX雌、XY雄),转化系(XY雌),雄性纯合系(YY雄),在生产中只要将原系中染色体为XY雄的个体诱导成雌性(XY雌)(转化系),再与原系中的雄性(XY雄)交配,就可产生两种雄鱼,一种为XY雄,ー种是YY雄型,通过测交可把两者分开,得到染色体为YY雄的雄性纯合系;.化学融合的机理和优缺点;答、高浓度(40%以上)的聚乙二醇溶液中,由于PEG与水之间的氢键作用,使溶液中自由水消失,导致细胞脱水发生膜结构的变化,引起细胞融合;优点;适应性广泛,简便、快速、高效;缺点:诱导细胞融合的有效范围浓度很窄,最适浓度为50-55%此时对细胞毒性很大;.激光融合的机理和优缺点;答、利用激光微束破坏相邻细胞的接触区,从而导致细胞膜的融合;优点:无毒,融合体成活率高;缺点:每次只能产生一个融合体,激光微数系统设备昂贵;3、细胞融合过程的三阶段;答、(1)点接触:两个细胞表面结合在ー起的凝集状态,其结合力不那么强,而且各个细胞保持完整的球形;(2)面接触:病毒/PEG等使细胞进入面接触状态,在此阶段各个细胞呈斜球形,细胞膜开始发生融合;(3)融合:融合过程进ー步进行,到全部形成球或卵形融合细胞;4、鱼类细胞核移植的发展阶段;答、第一阶段;全部以不分化的囊胚细胞作核供体;第二阶段:使用鱼类成体组织已分化的培养细胞作为核供体;5、核移植的分类;答、根据供体细胞核的来源分为胚胎干细胞核移植(囊胚内细胞),胚胎细胞核移植,体细胞移植;根据核移植的目的分为生殖性克隆和治疗性克隆;根据供受体间的关系分为同种核移植和异种核移植;6、做一条克隆鱼步骤;答、例如:鲤鱼细胞核移植到鲫鱼细胞质;胞质受体是鲫鱼未受精卵,供体是鲤鱼受精卵囊胚期细胞核;选择发育良好的雌雄鲤鱼和鲫鱼亲鱼,进行正常人工催产;步骤如下(1)准备胞质受体:接受供体核前,受体卵去除卵膜和卵核,当鲤鱼受精卵在培养皿中发育至囊胚期时,迅速取待排卵的鲫鱼,轻压腹部,挤出成熟的卵子,置于盛有消毒水(冷却了的煮沸开水)培养皿内,同时轻摇培养皿,粘性卵均匀粘在皿底,2-3min后,卵膜吸水膨胀,镒子在解剖镜下剥开卵膜,游离出卵子;(2)准备核供体:即鲤鱼细胞核;①胚胎细胞作为核供体:一般为发育良好的囊胚期细胞,易于分散,用吸管反复吹打或置于分离液中;②体细胞或培养细胞作为核供体;常用体细胞:肾细胞、肝细胞或尾鳍细胞;培养细胞有胚胎细胞,分化的体细胞(短期培养液优于继代培养细胞);移核的关键:必须做到鲤鱼受精卵发育至囊胚期时,鲫鱼正好产卵;(3)将鲤鱼细胞核移到鲫鱼去卵核卵中;将分离的囊胚细胞立刻用吸管移入有去核卵的培养皿内,囊胚少量细胞质和核注入卵子胚盘细胞质内;(4)克隆细胞的培养;郝氏液内培养观察发育过程;移核卵在郝氏培养液中发育至2-4细胞期时,转入1/2郝氏液中,发育至原肠期后,即可用曝气水培养;克隆鱼和克隆哺乳动物的区别:鱼在之前要先去核,哺乳动物不用;7、核移植中细胞质的作用?举例答、细胞质和细胞核对遗传信息的表达都有影响,后代的表型是细胞核和细胞质共同作用的结果,细胞核起主导作用;如不同品系金鱼间细胞核的多代移植:经过一次移核,后代性状与核供体基本相同;2次移核,表现出胞质受体的尾鳍特征;3-4次移核,影响更加明显;8、低温冻存技术(核移植技术相关)的三种途径;答、(1)鱼类精子的超低温冷冻保存;(2)鱼类胚胎细胞冷冻保存;(3)鱼类组织细胞超低温保存;目的、;实现鱼类优良品种和珍稀物种的种质保存;9、鱼类胚胎玻璃化冷冻方法的特点;答、区别于慢速冷冻法在降温的冷冻过程中会形成冰晶,进而造成胚胎的伤害,其特色是使细胞本身及冷冻溶液在冷冻时,呈现粘稠而不产生结晶的玻璃化状态;10、硬骨鱼类被称为脊椎动物生物学的模型动物原因?答、与哺乳类相比,鱼类产卵量大,胚胎经基因转移操作后不需放回母体内培养,携带的与人类相关的病原体较少,因此硬骨鱼类称为脊椎动物生物学的模型动物;11、转基因鱼的研究重点;答(1)经济品种的转基因研究主要集中在生长、抗寒和抗病方面,因此生长激素基因、抗冻蛋白基因、抗菌肽和溶菌酶基因等为主要的目的基因,以提高其生长速度和饲料转化率,控制繁殖或性别表型、增强抗性、对环境因子的耐受力或生存能力等;(2)小型实验动物鱼类一般通过转入特定基因,研究其表达与调控机理,用于基础研究;(3)转基因观赏鱼类主要有斑马鱼、青鏘、金鱼和唐鱼四种,转入目的基因主要为荧光蛋白基因(斑马鱼、青鏘、金鱼和唐鱼)和生长激素基因(金鱼,唐鱼),外形表现为体色改变并发出荧光和超大型个体(金鱼,唐鱼);12、转基因转入基因的种类;答、(1)生长激素基因

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