AC十三章+莨菪烷类抗胆碱药物的分析(2011)课件

第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析

一、基本结构与化学性质（一）典型药物的结构

由莨菪烷衍生氨基醇和不同有机酸缩合成酯类生物碱,常见颠茄生物碱类和古柯生物碱

硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱（atropinesulfate）(copolaminehydrobromide）α-（羟甲基）苯乙酸8-甲基-8-氮杂双环〔3，2，1〕-3-辛酯硫酸盐9-甲基-3-氧杂-9-氮杂三环[3.3.1.02,4]壬烷-7-醇(-)-alpha-(羟甲基)苯乙酸酯（二）主要化学性质

1.水解性结构中具有酯的结构，易水解。

阿托品，水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。

莨菪醇(Ⅰ)莨菪酸(Ⅱ)2.碱性

阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有叔胺氮原子,具有较强的碱性,易与酸成盐。如阿托品的pKb1为4.35。

东莨菪碱三元氧环的存在，N上孤电子产生显著立体效应（增强了空间位阻），使N原子不易给出电子，碱性较弱（与莨菪碱比）。3.旋光性

氢溴酸东莨菪碱结构中含有不对称碳原子，呈左旋体，比旋度为-24ο至-27ο，而阿托品结构中虽然也含有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋体，无旋光性。利用此性质可区别阿托品与东莨菪碱。

一、Vitaili（维特立）反应

阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱等托烷类生物碱均显莨菪酸结构的特征反应

第二节鉴别试验生物碱水解莨菪酸发烟硝酸三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固体KOH有色的醌型产物二、氧化反应

本类药物水解后，生成的莨菪酸，可与硫酸和重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味。其反应式为：

如：阿托品+氯化汞醇试液黄色沉淀东莨菪碱+氯化汞醇试液白色沉淀四、光谱鉴别1.紫外光谱法2.红外光谱法五、色谱法TLC,GC,HPLC

六、硫酸盐与溴化物反应第三节特殊杂质的检查一、氢溴酸东莨菪中特殊杂质检查

1.酸度

东莨菪碱碱性很弱，对石蕊试纸几乎不显碱性反应。氢溴酸东莨菪碱为强酸弱碱形成的盐，通过其5%水溶液的pH值为4.0～5.5，来控制本品中的酸性杂质。

本品水溶液+氨试液不混浊合格混浊存在其他生物碱+KOH试液混浊（东莨菪碱）2.其他生物碱取本品0.10g，加水2ml溶解后，分成两等份：一份中加氨试液2～3滴，不得发生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发生瞬即消失的类白色浑浊。

3.易氧化物

主要是检查本品在生产中可能引入的阿扑阿托品及其它含有双键的有机物质，可使KMnO4溶液褪色。返回取本品0.15g,加水5ml溶解后，在15～20℃加高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)0.05ml，10分钟内红色不得完全消失。

供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正

由于氢卤酸在冰醋酸中酸性较强，对测定有干扰，必须先加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难以电离的卤化汞，而氢卤酸盐药物，则转变成可测定的醋酸盐。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可获得满意的结果。如：氢溴酸山莨菪碱

1.氢卤酸盐类药物测定应用实例硫酸阿托品测定：阿托品为碱性较强的一元碱药物，因而硫酸阿托品的化学结构式可以简写为(BH+)2·SO42-，用高氯酸直接滴定时的反应式为：(BH+)2·SO42-+HClO4→(BH+)·ClO4-+(BH+)·HSO4-可根据1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的关系计算其含量。

1.基本原理二、酸性染料比色法★pH（酸性）BH+，In－BH+In-★pH（碱性）

In-，BH+BH+In-(2)酸性染料及其浓度：常用酸性染料有溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等。酸性染料浓度，对测定影响不大，有足够量即可。

磺酸酞类指示剂溴麝香草酚蓝(BTB)bromthymolbluepH6.0~7.6（黄~蓝）溴甲酚绿(BCG)bromcresolgreenpH3.6~5.2（黄~蓝）(4)水分的影响：

严防水分混入有机溶剂中，水相中过量有色酸性染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影响比色测定。一般加入脱水剂，或滤纸过滤的方法，除去混入的水分。Ch.P中硫酸阿托品片、氢溴酸东莨菪碱片和氢溴酸山莨菪碱片等，采用本法测定含量测定。3.应用示例生物碱药物于分液漏斗染料加有机溶剂调pH缓冲液水层有机溶剂BH+In-UV法测定A对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的硫酸阿托品对照品25mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品2.5mg），置50ml量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度，用干燥滤纸滤过，收集续滤液，即得。

测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml,分别置预先精密加入氯仿10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液2.0ml,振摇提取2分钟后，静置使分层，分取澄清的氯仿液，照分光光度法（附录ⅣB），在420nm的波长处分别测定吸收度，计算，并将结果与1.027相乘，即得供试量中含有(C17H23NO3)2.H2SO4.H2O的重量。三、高效液相色谱法(一)反相高效液相色谱法硅胶表面的硅醇基并未全部硅烷化.在分离碱性的药物时,硅醇基与有机含氮药物发生吸附或离子交换作用使碱性药物色谱峰产生拖尾分离效能下降、保留时间过长、甚至不能洗脱。加入扫尾剂：醋酸胺、三乙胺、二乙胺（二）离子对高效液相色谱法

返回离子对高效液相色谱法是通过在流动相中加入与待测组分带相反电荷的离子对试剂，与待测物质形成中性离子对，增大待测组分在非极性固定相中的分配与溶解度，从而改善其色谱保留行为。分析碱性物质常用的离子对试剂为烷基磺酸盐阴离子，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠等。分析酸性物质常用的离子对试剂为季铵碱阳离子，如四丁基溴化铵、四丁基氢氧化铵。杂环类药物离子对高效液相色谱法测定的影响条件：流动相一般呈酸性，以利于生物碱的离解；离子对试剂的非极性部分越大，形成的离子对分配系数越大，保留时间越长（十二烷基磺酸钠＞庚烷磺酸钠＞戊烷磺酸钠）。丁溴酸东莨菪

碱片和注射液的HPLC法C18；检测波长:210nm流动相：乙腈-0.004%磷酸（60：35：5）-

十二烷基磺酸钠对照品：0.4mg/ml

测定：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于40mg），置100ml量瓶中，加流动相溶解定容，……摇匀，滤过，精密量取续滤液20μl进样。同法测定对照品。按外标法计算。高效液相色谱法测定硫酸阿托品片的含量

色谱条件:色谱柱为SpherisorbC185μm流动相为0.025mol/L磷酸(三乙胺调pH为3.0)-乙腈(80:20)；柱温为30℃；检测波长为215nm；n=58