抗肾小球基底膜病

关于抗肾小球基底膜病第1页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病的背景抗GBM病：循环中出现抗GBM抗体、脏器中沉积为特征的自身免疫病1919:Goodpasture首先报道1例18岁男性病人，咯血、急性肾衰竭主要累及肺和肾脏：Goodpasture病内科危重症：危及生命80%就诊时已进入尿毒症（ESRD）GoodpasureEM.AmJMedSci1919;158:863-870CuiZ,ZhaoMH.NatRevNephrol.2011Dec7:697-706第2页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五少见病：1-2/百万人口本研究所：累计诊断500余例国际上最大的临床资源库治疗依赖血浆置换：昂贵，但多为时已晚抗GBM病仍然是我国

内科医生的重大挑战抗GBM病的发生情况CuiZ,ZhaoMH.NatRevNephrol.2011Dec7:697-706第3页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病研究现状HudsonGB.VanderbiltUniversityGBMmoleculararchitectureofconformationalepitopesPuseyCD.HammersmithImperialCollegeLondonPEinanti-GBMdiseaseWKYratmodelGeneticsofEAGmodelsSegelmarkM&WieslanderJLundUniversityRecombinantantigensDetectionofanti-GBMdiseaseZhaoMH&CuiZPekingUniversityHumananti-GBMdiseaseLinearepitopesMolecularmimicryKitchingAR.MonashUniversity.MHCandTcellactivationAnimalmodelsLouYH.UniversityofTexasTcellepitopeAnimalmodel第4页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病是典型的自身免疫病靶抗原3(IV)NC1（肺、肾）EpitopeEa和Eb---构象性SausJ,etal.JBiolChem1988;15;263:13374-80SalantDJ.NEnglJMed2010;363;4:381-391第5页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五6抗GBM病的科学问题病因表型差异病因遗传易感背景自身免疫T细胞B细胞3(IV)NC1表型？免疫耐受？诱发因素？第6页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五7抗GBM病的科学问题病因表型差异肾受累轻重1/3合并ANCA少数合并MN病因遗传易感背景自身免疫T细胞B细胞3(IV)NC1表型？免疫耐受？诱发因素？第7页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五823/M间断咯血4个月，加重1个月HGB:71g/L;PO258mmHg;Scr94.0μmol/l尿常规:protein(+),RBC5-8/HPF血清抗GBM抗体(+),ANCA(-)肾活检:IgG沿GBM线样沉积,肾小球轻微病变治疗：Pred1mg/kg/dx8w,无PE和CTX随访7年肾功能正常CuiZ,etal.KidneyInt2007;72:1403-8肾受累轻患者介于正常人与重症患者之间？转换机制？第8页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五既往：健康人血清无抗GBM抗体发现天然抗GBM抗体：中国和瑞典：各10名献血员IgG成分---亲和层析“阴性选择”？如何发展成致病性抗体？CuiZ,etal.KidneyInt2006:69:894-9Cui

Z,

et

al.

KidneyInt2010;78:590-7Naturalanti-GBMab第9页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM抗体如何转变成致病性？天然抗GBM抗体Anti-GBM(+)严重肾受累Anti-GBM(+)正常肾功能正常人病人A病人CIntra-moleculeEpitopespreading3,41、2、3、4和5SubclassswitchingIgG2、IgG4IgG1、IgG2、IgG3和IgG4治疗个体化T细胞调控3Ea、Eb3内其他位点Anti-GBM(+)轻度肾受累病人BCuiZ,etal.KidneyInt

2006;69:894-9.YangR,etal.JAmSocNephrol2007;18(4):1338-43.CuiZ,etal.KidneyInt

2007;72(11):1403-8.ZhaoJ&CuiZ,etal.

KidneyInt.2009;76:1108-15.CuiZ,etal.KidneyInt

2010;78(6):590-7.ChenJL&HuSY,etal.ClinJAmSocNephrol.2013;8(1):51-8.Inter-moleculeEpitopespreading第10页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五

NATUREREVIEWS|NEPHROLOGYCuiZ,ZhaoMH.NatRevNephrol.2011Dec;7:697-706.第11页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病的科学问题病因表型差异肾受累轻重1/3合并ANCA少数合并MN病因遗传易感背景自身免疫T细胞B细胞3(IV)NC1表型？免疫耐受？诱发因素？第12页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五13抗GBM病合并MN个例报道MN→GBMdamage：释放α3→抗GBM病抗GBM病→足细胞损伤：表达M-PLA2R→MN第13页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五8patientswithMNandanti-GBMdiseaseSequentialorsimultaneousBetterprognosisAnti-α3(+):narrowantigenspectrumAnti-PLA2R(-)JiaXY,etal.KidneyInt2014Apr;85(4):945-52第14页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病的科学问题病因易感性：HLA？诱发因素病因表型差异病因遗传易感背景自身免疫T细胞B细胞3(IV)NC1表型？免疫耐受？诱发因素？第15页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五16抗GBM病的免疫学发病机制?LineartoConformational涉及感染、抗原递呈、抗原决定簇扩展、分子模拟第16页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五Background(HLA)HLAgeneLocation:CHR6p21.3ClassicalHLAgeneMHCclassIImolecular:Distribution:DCs、Bcells、MøStructure:hetero-dimerrecognizedbyCD4+TcellAgprocessed、presentationMHC&disease:

MS、RA、IDDM、SLEetal.

第17页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五18(Rees,KidInt,1999)DominantlyprotectiveallelesDR1andDR7NogenedosageeffectMHCIIdominantprotectionHLA-DRB1*01:01generates3136-146specificregulatoryTcells.HLA-DRB1*15:01generates3136-146specificeffectorTcellprecursors.InHLA-DRB1*15:01x01:01mice,3136-146specificeffectorTcellprecursorsaredominantlysuppressedby3136-146specificregulatoryTcellsReesetal,KidneyInt1999Ooietal,JAmSocNephrol2013第18页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五DRB1*1501allele：p=1.597×10−7

DRB1*0404allele：p=0.037PatientswithDRB1*1501or*0404hadmorecrescentformation.(p=0.021).YangR.etal.ClinImmunol2009;133:245-250第19页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五AssociationofHLAalleles(4digits,P<3.55E-4)AlleleCase_freControl_freORP_valDRB1*15010.43840.14694.5495.658E-28DQB1*06020.38400.15443.3362.032E-17DQA1*05020.0255470.000834730.696.987E-7DQB1*03030.04710.14440.28858.575E-6DRB1*09010.065220.14940.39111.611E-4Determinethesignificant

variationmarkerofgenotypeCase:

138vs.Control:

599rs41541412:theonlysignificantSNP,

belongsto

DQA1*0502

nonsensemutation,changethe82thAAofDQαpolypeptide.CHRSNPCaseControlCHISQP-valOR632609249.C0.02550.00083524.626.99E-730.69632609249.G0.02550.00083524.626.99E-730.69AssociationofanovelHLASNP(P<1.9E-4)Unpublisheddata第20页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五21Extendedhaplotypecase_freControl_freHaplo.scoreP-valDRB1*1501-DQB1*06020.290.0958.8389.7×10-19DRB1*1501-DRB1*06010.0270.00784.1183.8×10-5DRB1*0901-DQB1*03030.0220.1-4.3121.6×10-5DRB1*1501-DQA1*0102-DQB1*06020.190.094.621.0×10-6DRB1*0901-DQA1*0302-DQB1*03030.0110.092-4.487.3×10-6DRB1*1501-DQA1*0102-DQB1*0602-DPB1*02010.0840.0343.50.00042DRB1*0901-DQA1*0302-DQB1*0303-DPB1*05010.00410.056-3.50.00042ExtendedhaplotypesamongHLA-DRB1,DQA1,DQB1,DPB1inanti-GBMdiseaseUnpublisheddata第21页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五Allele-1Allele-2D'r2LODscoreDRB1*1501DQB1*06020.5620.30551.22DRB1*1501DRB1*090110.03910.41DRB1*1501DQB1*03030.8170.0244.44DRB1*1501DQA1*05020.2430.0011.03DQB1*0602DRB1*09010.6850.0182.81DQB1*0602DQB1*030310.0358.55DQB1*0602DQA1*05020.460.0050.82DQB1*0303DRB1*09010.6410.38556.05DQB1*0303DQA1*050210.0010.47DQA1*0502DRB1*09010.14800LOD>3:Confirmedlinkage.LOD<-2:Nolinkage.LOD=0:thepossibilityisequal

LinkageanalysisamongthesignificantallelesUnpublisheddata第22页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病的科学问题病因易感性诱发因素：环境？病因表型差异病因遗传易感背景自身免疫T细胞B细胞3(IV)NC1表型？免疫耐受？诱发因素？第23页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五24抗GBM病的科学问题病因易感性诱发因素病因：感染？表型差异病因遗传易感背景自身免疫T细胞B细胞3(IV)NC1表型？免疫耐受？诱发因素？第24页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五25假说：微生物可能是抗GBM病的病因之一1919:Goodpasture首先报道1例18岁男性病人，咯血、急性肾衰竭流感？60%的患者发病前有前驱感染症状病原微生物----分子模拟?GoodpasureEM.AmJMedSci1919;158:863-870分子模拟B细胞表位T细胞表位第25页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五B细胞的线性抗原决定簇合成24条重叠肽段：覆盖3(IV)NC1的234aa起始的线性抗原决定簇：P14（aa129-150）

Initiation

epitope?Risk

epitope?JiaXY,etal.ClinJAmSocNephrol

2012Jun;7(6):926-33第26页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五P14(22mer)诱发WKY大鼠抗GBM肾炎P14（aa129-150）分子内抗原决定簇扩展诱发自身免疫性T细胞增殖T/B细胞共同抗原决定簇Unpublished

data第27页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五B细胞的关键抗原决定簇与核心氨基酸基序P14氨基酸序列:P14:TDIPPCPHGWISLWKGFSFIMFP14a:

TDIPPCPHGWISL

P14b:

CPHGWISLWKGFSP14c:ISLWKGFSFIMFTP14c逐个氨基酸突变B细胞识别的关键氨基酸基序GFxF

Unpublished

data第28页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五CriticalmotifonP14forpathogenicityP14-1ADIPPCPHGWISLWKGFSFIMFP14-2TAIPPCPHGWISLWKGFSFIMFP14-3TDAPPCPHGWISLWKGFSFIMFP14-4TDIAPCPHGWISLWKGFSFIMFP14-5TDIPACPHGWISLWKGFSFIMFP14-6TDIPPAPHGWISLWKGFSFIMFP14-7TDIPPCAHGWISLWKGFSFIMFP14-8TDIPPCPAGWISLWKGFSFIMFP14-9TDIPPCPHAWISLWKGFSFIMFP14-10TDIPPCPHGAISLWKGFSFIMFP14-11TDIPPCPHGWASLWKGFSFIMFP14-12TDIPPCPHGWIALWKGFSFIMFP14-13TDIPPCPHGWISAWKGFSFIMFP14-14TDIPPCPHGWISLAKGFSFIMFP14-15TDIPPCPHGWISLWAGFSFIMFP14-16TDIPPCPHGWISLWKAFSFIMFP14-17TDIPPCPHGWISLWKGASFIMFP14-18TDIPPCPHGWISLWKGFAFIMFP14-19TDIPPCPHGWISLWKGFSAIMFP14-20TDIPPCPHGWISLWKGFSFAMFP14-21TDIPPCPHGWISLWKGFSFIAFP14-22TDIPPCPHGWISLWKGFSFIMAUnpublished

dataTryptophan138,

Isoleucine139,

Leucine141,

and

Tryptophan142P14129-150:TDIPPCPHGWISLWKGFSFIMF第29页，共35页，2022年，5月20日，2点25分，星期五抗GBM病---病因研究针对致病微生物的研究细菌、病毒等培养（尚无来源）合成抗原分子利用生物