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1、疏肝健脾活血法对肝郁大鼠影响的实验研究【摘要】目的讨论疏肝健脾活血法对肝郁大鼠子宫、卵巢、性激素程度的影响。方法采用夹尾法建立肝郁动物模型,采用光镜观察组织学改变,测定子宫重量,观察雌二醇E2,孕酮P的变化。结果疏肝健脾活血法能增加肝郁大鼠子宫重量,进步大鼠体内E2,P的含量,并能改善子宫、卵巢的病理改变。结论疏肝健脾活血法对肝郁大鼠进步性激素程度有一定的治疗作用,增加子宫重量。【关键词】疏肝健脾活血法肝郁雌二醇孕酮Abstrat:bjetiveTinvestigatetheeffetsfdispersingstagnatedliver-qi,invigratingspleenandprtin
2、gbldirulatinethdnratsithstagnatinfliverqi.ethdsThestagnatinfliverqidelasinduedbylapingtail.Thehangefhistlgyasbservedbylightirspe,andtheEightfuterusandthehangesfE2andPeredeterined.ResultsThedispersingstagnatedliver-qi,invigratingspleenandprtingbldirulatinethduldenhanetheeightfuterusandenhanetheexpres
3、sinfE2andPinthebdy,andiprvethepathlgialhangesfuterusandvary.nlusinDispersingstagnatedliver-qi,invigratingspleenandprtingbldirulatinethdhassetherapeutiatinnenhaneentflevelfgnadalhrnefstagnatinfliverqiandeightfuterus.Keyrds:Dispersingstagnatedliver-qiandinvigratingspleenandprtingbldirulatin;Syndrefsta
4、gnatinfliverqi;E2;P肝郁证是临床常见的证候之一,多见于妇科疾玻疏肝健脾活血法是临床治疗肝郁证的有效方法之一,为了进一步讨论疏肝健脾活血法治疗肝郁证的作用机理,本研究重点观察了疏肝健脾活血法对肝郁大鼠子宫、卵巢、雌二醇E2及孕酮P的影响,同时检测了大鼠阴道脱落细胞的变化,进一步讨论疏肝健脾活血法治疗肝郁证的作用机理。1器材1.1动物安康istar成熟雌性大鼠,体重18020g,黑龙江中医药大学实验动物中心提供。1.2药物与试剂盐酸肾上腺素,广州明兴制药厂产品。美兰染液,黑龙江中医药大学附院化验室提供。疏肝健脾活血复方、逍遥散处方药材,由黑龙江中医药大学附院提供。雌二醇、孕酮试剂
5、盒,北京北免东雅生物技术研究所提供。1.3仪器LIANG-100微机显示自动记录血浆粘度计上海医科大学消费、显微镜lypus日本、扭力天平TN-100B上海第二天平仪器厂等。2方法2.1动物分组取istar雌性大鼠70只,连续进展阴道涂片两个性周期,从中选择4日性周期明显,为动性间期的大鼠作为实验对象1,共50只,随机分为5组,实验组分高、低两组,中药对照组,模型组及正常组。每组动物数为10只。2.2造模与给药将大鼠710只置于同一笼内,用尖端包扎纱布的止血钳钳夹一只大鼠尾部,然后立即放开,使其与其它大鼠撕打,导致整笼大鼠保持激怒状态,每天刺激45in,同时皮下1次肌注0.1%肾上腺素0.08
6、l/100g2。正常组、模型组:每日2l/只生理盐水灌胃。中药对照组:每日2l/只含量1.418g/l逍遥散灌胃。中药治疗组:高剂量组每日2l/只含量1.8217g/l;低剂量组每日21/只含量0.607g/l,疏肝健脾活血复方灌胃。2.3样品采集与指标检测刺激造模12d后,摘取大鼠一侧眼球取血,检测血液流变学指标,观察造模是否成功,于模型成功后第2天开场给药,同时继续给于造模,0.1%肾上腺素0.08l/100g1周注射2次,夹尾方法同前。各组连续灌胃14d,于末次给药后禁食24h,摘眼球取血,离心,用于E2、P含量测定。然后处死大鼠,剖开腹腔,切取子宫、卵巢,剥离周围脂肪组织,将子宫以扭力
7、天平称重,换成子宫/体重指数。将子宫、卵巢组织放于4%多聚甲醛,固定,供HE染色。2.4统计方法数据采用s表示,数据统计分析均在SPSS11.0软件中进展,采用方差分析,多组间两两比拟用LSD法。3结果3.1造模前后大鼠血液流变学比拟结果见表1。表1造模前后大鼠血液流变学(略)3.2对子宫/体重指数、E2及P的影响结果见表2。表2对子宫/体重、E2及P的影响略中药高剂量组与模型组比拟子宫/体重指数增高,E2及P程度明显升高,差异有显著性意义P0.05,从数值分析中药高剂量组效果优于中药对照组。3.3阴道脱落细胞涂片同期变化正常组10只大鼠同期均稳定;模型组10只大鼠均无典型同期变化;高剂量组6
8、只大鼠同期稳定;低剂量组2只同期稳定;中药对照组3只同期稳定。3.4HE染色结果正常大鼠子宫内膜上皮细胞为高柱状,腺体数量多,排列整齐;模型组上皮细胞呈立方型,腺体数量较少,排列不整齐;中药高、低剂量组上皮细胞多为柱状或高柱状,腺体数量较多,排列较整齐。正常大鼠卵巢内有许多原始卵泡、初级卵母细胞、次级卵泡及黄体,模型组各级卵泡数量减少,黄体数量少;中药低、高剂量组均可见发育正常卵泡,退化卵泡减少,黄体数量增加。4讨论肝郁证是临床妇科最常见的证候之一,肝郁气滞进一步影响血液运行形成淤血,且肝郁日久多影响脾之运化功能,故运用疏肝健脾活血法治疗肝郁证。疏肝健脾活血复方由调肝汤加减变化,药物组成有当归
9、、白芍、枳壳、青皮、茯苓、川楝子、牛膝、通草等,具有疏肝健脾、活血通络之功,临床主要治疗肝气郁滞引起的病证。方中当归、白芍养血柔肝;茯苓健脾;枳壳、青皮、川楝子疏肝解郁、理气。其中当归属配川楝子,一为活血,一为行气,气血并治,同入肝经,疏肝止痛,养血柔肝,使用并治;青皮配白芍,青皮疏肝理气,白芍养血柔肝止痛,两药相伍疏肝理气之功相得益彰。牛膝入肝肾二经、活血通络,理气祛淤,肝肾同治;通草下乳通经之品,使之疏肝通络。诸药相配那么肝气得疏,血得运,气血和调,经络通利那么诸病得治。现代医学研究说明,肝郁日久可引起内分泌系统的变化,如下丘脑-垂体-卵巢性腺轴的改变3。本研究发现肝郁大鼠E2及P程度明显下降,卵巢功能降低。疏肝健脾活血法可使肝郁大鼠子宫重量增加,E2及P程度升高,提示疏肝健脾活血法能改善肝郁大鼠性腺轴的变化,为疏肝健脾活血法治疗肝郁证的作用机理初步讨论,亦为下丘脑-垂体-卵巢轴的疾病治疗
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