培养基模拟灌装(小容量注射剂)无菌生产工艺验证方案

1、审批部门姓名签名日期批准人针剂车间 针剂车间 质检中心 分发部门：培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组一、概述2010GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品生产使用。某某产品因无法进行 F08 分钟湿热灭菌，以达到 SAL10-6，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。染风险的两项重要措施为：人员的培训 无菌工艺验证。本次验证关键生产工艺流程图安瓿的清洗称量配安瓿的清洗称量配料工器具清洗和灭菌除菌过滤干热灭菌灌封灯D级背景C级背景A级背景一般区验证原理失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新

2、进行验证。验证次数2010GMP1要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行连续三个批次的验证活动。二、验证目的通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求；通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险；GMP法规要求。三、验证范围和实施时间本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动；20133月4月连续三个批次。并将记录附于验证报告后。姓名职务生产技术部经理职责验证小组组长，负责验证文件的审核和工作总体安排和实施，组织调查和处理验证过程中出现

3、的异常情况技术管理员负责验证文件的起草，提供验证过程中相关技术支持，参与验证异常情况调查工作车间主任安排车间岗位人员配合验证工作的实施，对验证过程的异常情况进行协助调查，负责验证文件的审核车间技术副主任负责验证文件的起草，提供验证过程中相关技术支持，参与验证异常情况调查工作配料岗位人员洗瓶岗位人员负责配料操作和除菌过滤以及灭菌操作并记录负责洗瓶和安瓿灭菌操作并记录灌封岗位人员负责灌封操作并记录灯检岗位人员负责灯检操作和产品7和14天的观察与统计维修员QCQCQA QA负责验证相关检验工作和检验数据收集统计工作，参与验证过程异常情况调查工作，负责验证结束后培养基的灭活处理工作调查处理GMP取样工

4、作QA负责验证文件的起草，组织验证方案相关培训，参与验证异常情况调查工作调查工作质量负责人负责验证文件的批准，验证证书的签发各部门职责品质管理部协助验证活动的执行参与验证异常情况的调查和处理参与验证文件的起草工作负责验证过程的取样负责生产监督，保证所有数据的真实性和完整性负责验证文件的审批和归档质检中心协助验证活动的执行，提供必要的取样工具参与验证异常情况的调查和处理负责相关检验工作，提供相关检验数据负责最终培养基的处理生产技术部负责验证活动的执行负责验证数据的收集和相关文件的起草负责组织验证过程中异常情况的调查和处理生产车间负责验证相关操作活动参与异常情况的调查和处理参与验证文件的起草和审核

5、工程部协助验证活动确保其顺利完成维修人员参与验证活动的实施物料管理部协助提供验证活动过程中所需物料五、风险评估分析表通过风险评估，确认本次验证活动需要验证的项目可可严可风险风险描述风险控制措施验证项目能重测指数性性性环境达不到相关生产要求中高高高建立厂房清洁消毒规程，定期环境监测并趋势分析培养基灌装全程对环境进行动态监测人员培训并更衣考核上岗，所有相关人员，模拟生产实人员造成污染中高高高每批对进入无菌区人员取际活动后取样，对最多允许样监控人数进行挑战验证灭菌后储存方式和有相关验证操作与正常生产灭菌后的衣服，效期，操作人员培训考核上一致，生产结束后对关键表器具等发生二低高高高岗，生产过程中进行严

6、格监面取样，储存方式和有效期次污染控，生产结束后与产品接触在相关清洁灭菌验证中完表面取样成灭菌效果未达到低高中中所有灭菌装载和参数须经式灭菌在设备验证中完成配液/灌封超过规定时限要求低中低中工艺规程中明确规定时限按照工艺规定工序最大时间挑战进行验证灌封设备故障并维修中中低中人员培训，使用前通过试机，并定期设备维护保养模拟维修操作进行挑战验证过滤系统有效性和污染低高高高过滤后对除菌过滤器进行洁和灭菌处理在无菌过滤系统工艺验证中完成，并取过滤后的药液进行无菌检查所有相关工具，记录等进入取样工具，记录等传入污染中低高高要的经酒精消毒和紫外加在消毒效果验证中完成消毒从传递窗进入清洁工具和清洁消毒剂使用

7、低高高高剂需除菌过滤后进入无菌在无菌过滤效果和设备验证中完成带来的污染带来的污染区在洗烘线验证中完成灭菌灌封所用安瓿工艺规程规定安瓿的灭菌效果和单向流保护动态监低高高高造成污染参数和暂存时间安瓿进行取样压缩空气带来低中高高压缩空气系统验证中完成的污染周期性进行压缩空气系统验证和监测生产过程中，异严格异常操作的要求于常操作造成的中低中中可能污染的药品报废处理瓶等情况进行挑战验证风险产品暴露过长挑战工艺规程中允许的最中低高低严格控制允许的灌封速度带来的风险慢速度进行灌1确保已完成下列验证和确认工作： WFIPW系统验证HVAC 系统的验证压缩空气系统的验证过滤系统的验证无菌区人员更衣确认灭菌系统灭

8、菌效果和储存期确认洗烘灌联动线确认无菌区清洁消毒方法验证恒温恒湿箱确认配制罐的确认无菌分析方法学验证生产工艺规程某某品种的批生产记录配料岗位 SOP工器具处理岗位 SOP洗烘瓶岗位 SOP灌封岗位 SOP各相关设备的清洁、操作和维护保养 SOP验证可接受标准模拟灌装数量/瓶污染控制数量/瓶2996474204743629416295775127752模拟灌装数量/瓶污染控制数量/瓶29964742047436294162957751277523201047灌装试验的目标是零污染，应当遵循以下要求：（一）5000支时，不得检出污染品。（二）500010000支时：12支污染，需调查后，进行再验证

9、。（三）10000支时：12支污染，需调查后，进行再验证。（四）发生任何微生物污染时，均应当进行调查。综合上述标准，本次验证数量50006294瓶之间1瓶。验证活动前其他准备工作经确认合格的胰酶酪胨大豆肉汤培养基(TSB)250g2206015个，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、生孢梭菌，枯草芽孢杆菌和白色念珠菌等各类菌种，API 鉴别菌种试纸，经灭菌的具塞三角10个，80005ml23283035的培养区域以及便于观察和运输的中转箱若干。工器具灭菌和准备SOP要求储存， SOP要求进行清洁消TSB和相关包材存放在车间内。配料配料前取该岗位所需注射用水进行内毒素检查，确保内毒素检验合格后

10、，取胰酶酪胨大豆肉汤培养基(TSB)360g6012L， 搅拌0BA50ml，在瓶身标明取样位置、取样数量、取样时间和样品名称后送质检中心测定溶液中微生物负载。其合格标准应1cfu/ml。除菌过滤（是否使用前进行完整性测试按新工艺规程定0.2m上述培养基溶液。QA50ml2瓶过滤完的培养基，在瓶身标明取样位置、取样数量、取样时间和4180ml1810ml的试管中，送质检中心进行培养基的微生物生长实验。培养基无菌性检查232814303514天。14天内应无任何微生物生长。培养基的微生物生长试验：QCQA18210ml种量100cfu/210ml2支接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、黑曲霉、生孢

11、梭菌， 接种量100cfu/4金黄色葡7 天。可接受标准：7TSB培养基中应出现明显的所接种的微生物的生长，且空白对照管应无菌生长则判定该培养基微生物性能生长试验符合要求规定。洗烘瓶8000SOP6294瓶。2ml 56时（由生产工艺规程定。全过程，设备慢速运行120/2000(不走瓶每灌封一盘及时记录好灌封时间和盘号放在装中间产品的盘内。灌封完的样品及时传出无菌区。最差灌装条件的模拟：30分钟，进行设备模拟维修，保持现有人员在P约0录上做好备注。模拟现场人员最大控制数7支/管调整、更换在灌装正常运行过程中，进行紧急停机，模拟调整、更换灌装针2 支或以上，标记更换针管后灌约0模拟空瓶倒瓶、破瓶

12、约0支模拟药液瓶破瓶约0支模拟中控抽样处理的过程灌装过程的中间控制接触碟和沉降菌的取样应做好空白对照。5个位置的用接触A碟（mu；Bm。A2h更A4m4小时。格标准为所监控悬浮粒子数（0.5m）3520/立方米。对灌装区域的动态浮游菌取样：灌封过程中选定灌装针头处，出瓶口，和封口处以及取样人员1立方米，要求其折算后平均值1cfu/立方米。mu。9.2.53支已灭菌的安瓿瓶放置在装有足量已灭菌23283035环境内各培养七天，要求无菌生长。所有进入无菌区人员均应登记进出时间。灯检检查按原灌装盘号分别装盘每盘内放入原灌封物料标签和灯检合格数量。培养23287天，期间在第三天将所有产品翻转一次，在第

13、七天观30357天，在第七天培养结束后统计污染数。接受标准：根据实际考察数，按照本文件 3.1 和 3.2 项目要求，50006294 之间，污染总数应11支，除非有明确证明是破瓶所致，否则该验证失败。发现被污染的样品应进行菌种分析。培养基阳性对照试验60320（05培养（若无则取消该组试验100cfu/5550%TSB培养基中应出现明显的所接种的微生物的生长； 1瓶进行镜检、API等已确定是添加的菌。七、可能的偏差或漏项的处理进行培养基无菌模拟灌装试验。原因调查至少应包括如下项：a、生产环境微生物监测数据； d、生产环境浮游菌监测数据； e、操作间的空气流向、压差；f、操作人员的操作方法、培

14、训情况； g、模拟灌装试验过程中的异常情况；h、无菌室生产工具及其他用品的储存状况；j、无菌室的清洁、清洁堆规程的培训及执行情况； k、无菌生产用设备的控制系统和监测系统的校正；l、生产后过滤器的完整性检测结果；m、相关产品、相关生产过程存在的问题等。实施之后应重复模拟灌装试验。八、再验证周期当空气净化系统、灌封和过滤设备、除菌过滤和灌封工艺以及灌封操作人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装无菌生产工艺验证。1个月，重新开启生产前未出现异常情况时也需每半年至少进行一个批次培养基模拟灌装无菌生产工艺验证。九、附件培训记录,TSB TSB 小容量注射剂多少规格）附件 1确认相关验证和确认工作项

15、目WFI系统验证PW系统验证HVAC压缩空气系统验证过滤系统验证灭菌设备确认洗瓶机确认灌装机确认无菌区清洁消毒验证恒温恒湿箱确认配制罐确认无菌分析方法学验证备注确认人/日期附件 2验证报告文件号 验证有效期至 检查结论符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合复核人/日期确认相关文件确认相关文件文件名称检查结论文件名称检查结论工艺规程符合不符合符合不符合批生产记录符合不符合符合不符合SOP符合不符合SOP符合不符合配制罐清洁、操作和配制罐清洁、操作和符合不符合灭菌柜清洁、

16、操作和符合不符合洗瓶机清洁、操作和符合不符合隧道烘箱清洁、操作符合不符合SOP备注确认人/日期复核人/日期附件 3培养基信息确认表TSB培养基进厂批号TSB培养基有效期至培养基全称制方法备注：TSB培养基过滤前微生物限度检查培养基灌封验证批号培养条件试验方法TSB培养基过滤前微生物限度检查培养基灌封验证批号培养条件试验方法将mlTSB232848h303548h，统计菌落数。培养时间24h48h72h96h菌落数(cfu/ml)结论合格（1cfu/ml）不合格确认人/日期：复核人/日期：供应商上海中科昆虫生物科技开发有限公胰酪胨大豆肉汤培养基30g,1L蒸馏水，加热溶解；分装，12115min

17、品出现结块，请勿使用。复核人/日期：TSB培养基无菌性检查记录TSB培养基无菌性检查记录培养基灌封验证批号培养日期培养天数12345678910111213142328培养3035培养备注(打“-”表示不长菌，打“+”表示长菌)结论合格（14天后均无任何微生物生长）不合格确认人/日期：复核人/日期：培养基微生物生长试验培养基灌封验证批号试验日期培养基微生物生长试验培养基灌封验证批号试验日期菌种名称菌种信息培养条件12空白结论枯草芽孢杆菌白色念珠菌球 菌 菌黑曲霉生孢梭菌备注备注结论：合格（所有接种管出现明显的所接种的微生物的生长，空白管显阴性）不合格确认人/日期：复核人/日期：安瓿瓶无菌检查记

18、录培养基灌封验证批号培养日期取样时间安瓿瓶无菌检查记录培养基灌封验证批号培养日期取样时间前期中期后期培养结果备注示不长菌，打“+”表示长)结论合格（14天后均无任何微生物生长）不合格确认人/日期：复核人/日期：人员进出无菌区登记台账培养基灌封验证批 号 人员进出无菌区登记台账培养基灌封验证批 号 进出无菌区时间主要操作活动备注备注培养基灌封试验产品培养过程温湿度记录灌封试验批号：生产日期：培养基灌封试验产品培养过程温湿度记录灌封试验批号：生产日期：2328培养期间温湿度记录产品入库的日期/时间：入库时温湿度：是否符合要求：是否（标准：2328）培养上午下午备注记录人天数1时间温度湿度时间温度湿度234545672328培养结束日期/时间：3035培养期间温湿度记录产品入库的日期/时间：入库时温湿度：是否符合要求：是否（标准：3035）培养上午下午备注记录人天数8时间温度湿度时间温度湿度910111213143035培养结束日期/时间： 备注：附件 10模拟灌封样品培养最终结果记录灌封批号生产日期培养日期至盘号1长菌数发现日期菌种鉴定盘号长菌数发现日期菌种鉴定192203214225236247258269271028112912301331143215331634173