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文档简介

1、支原体 Mycoplasma1编辑版ppt支原体 概述定义缺乏细胞壁形态上呈高度多形性能通过除菌滤器在无生命培养基中能生长繁殖最小的原核细胞型微生物能形成有分支的长丝,故称支原体 2编辑版ppt概述定义2编辑版ppt柔膜体纲支原体目肺炎支原体,人型支原体,生殖支原体,穿透支原体,发酵支原体,梨支原体脲脲原体支原体分类支原体科无胆甾原体科螺原体科支原体属脲原体属3编辑版ppt柔膜体纲支原体目肺炎支原体,人型支原体,生殖支原体,穿透支原一、生物学性状(一)形态 0.30.5 m 无细胞壁 高度多形性:球、杆、丝状和分枝状等 一般Giemsa染色较好,染为淡紫色 4编辑版ppt一、生物学性状(一)形

2、态4编辑版ppt支原体集落5编辑版ppt支原体集落5编辑版ppt(二)结构 内外两层为蛋白质及糖类,中层为脂类(磷脂为主),凡作用于胆固醇的物质,如皂素、二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。 特殊的顶端结构: 粘附宿主上皮 细胞表面,与支原 体的致病有关。6编辑版ppt(二)结构6编辑版ppt(三)培养特性 营养丰富的培养基: 10%20%人或动物血清以提供胆固醇与其 它长链脂肪酸,多数还需添加酵母浸液、组 织浸液、核酸提取物和辅酶。 pH:适宜7.68.0(7.0易死亡),但解脲脲 原体最适pH5.56.5 兼性厌氧: 大多寄生性支原体在37时在微氧环境(含 5%CO2和90%N2)中生长最

3、佳。 繁殖方式多样:二分裂繁殖外,还有分节、断裂、 出芽或分枝等方式7编辑版ppt(三)培养特性7编辑版ppt固体培养基: 27天长出直径约10600 m的典型的“荷包蛋样”菌落:低倍镜下见菌落呈圆形,心致密隆起,深入琼脂,外周由颗粒包绕。液体培养基: 清亮,用颜色变化单位(CCU)表示。需用放大镜/低倍显微镜观察8编辑版ppt固体培养基:需用放大镜/低倍显微镜观察8编辑版ppt支原体典型菌落9编辑版ppt支原体典型菌落9编辑版ppt支原体与细菌L型的异同点 不同点 相同点 鉴别点 支原体 细菌L型细胞壁缺失原因 在遗传上与细菌无关 与原菌相关,可以回复细胞膜 含高浓度固醇 细胞膜不含固醇 培

4、养特性 需要胆固醇 大多需要高渗培养 菌落大小 生长慢,菌落小 菌落稍大 ( 0.61.0) 液体培养 液体培养混浊度极低 有一定混浊度,可附壁缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤菌器。固体培养菌落呈荷包蛋样或颗粒状。临床表现相似间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等 相同点10编辑版ppt支原体与细菌L型的异同点 不同点 相同点 鉴别点 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性 肺炎支原体 + 红细胞 肺炎、支气管炎人型支原体 + 泌尿生殖道感染生殖器支原体 + 泌尿生殖道感染穿透支原体 + + 红细胞 条件感染 CD4+T细胞 多见于艾滋病 巨噬细胞 溶脲脲原体 + 泌尿生殖道感染 流产及不孕

5、不育 生化反应11编辑版ppt 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 (四)抗原结构 补体结合试验可检测糖脂类抗原 ELISA试验可检测蛋白质类抗原 血清抗体可用生长抑制试验(growth inhibition test, GIT)和代谢抑制试验 (metabolic inhibition test, MIT)以 鉴定12编辑版ppt(四)抗原结构12编辑版ppt GIT是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上, 经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现 象 MIT是将支原体接种在含有抗血清培养 基中,若抗体与支原体型一致,则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若

6、干血清型。13编辑版ppt GIT是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种(五)抵抗力 对化学消毒剂敏感,对结晶紫、 醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力; 对影响细胞壁合成的抗生素如青 霉素类天然耐受,但对干扰蛋白 质合成的抗生素如强力霉素、交 沙霉素等敏感。14编辑版ppt(五)抵抗力14编辑版ppt二、致病性与免疫性(一)致病机制荚膜或微荚膜:抗吞噬作用毒性代谢产物:神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤超抗原:免疫调节其它:如穿透支原体粘附侵入CD4 T细胞引起损伤粘附素:粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞15编辑版ppt二、致病性与免疫性(一)致病机

7、制15编辑版ppt(二)所致疾病存在广泛,多不致病肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎溶脲脲原体、人型支原体和生殖支原体可引起泌尿生殖系统感染和不育症穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的辅助致病因素二、致病性与免疫性16编辑版ppt(二)所致疾病二、致病性与免疫性16编辑版ppt(三)免疫性 体液免疫:抗膜蛋白的抗体包括 IgM、IgG和SIgA 细胞免疫:主要是特异性CD4Th1 细胞分泌细胞因子 二、致病性与免疫性17编辑版ppt(三)免疫性二、致病性与免疫性17编辑版ppt肺炎支原体溶脲脲原体主要病原性支原体18编辑版ppt肺炎支原体溶脲脲原体主要病原性支原体18编辑版ppt0.20.3m,高度

8、多形性,如球形、球杆状、棒状、分枝状和丝状;初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中,一般10天左右长出菌落;多次传代后生长加快,菌落呈“油煎蛋”状;能发酵葡萄糖,不能利用精氨酸与尿素;对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感。肺炎支原体一、生物学性状19编辑版ppt0.20.3m,高度多形性,如球形、球杆状、棒状、分枝状20编辑版ppt20编辑版ppt(一)致病性 1.主要经飞沫传播,但大多数发生于夏 末秋初,515岁青少年发病率最高。 2.含特殊的顶端结构:P1表面蛋白(170 kDa)和P30(32 kDa)为主要的粘附蛋白,使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原体具有超抗原作用,能刺激炎

9、症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如TNF-、IL-1、IL-6)引起组织损伤。二、致病性与免疫性21编辑版ppt(一)致病性二、致病性与免疫性21编辑版ppt(二)所致疾病 原发性非典型性肺炎(primary atypical pneumonia),临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主,有时并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。二、致病性与免疫性22编辑版ppt(二)所致疾病二、致病性与免疫性22编辑版ppt(三)免疫性 血清特异性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴细胞; 呼吸道局部黏膜产生的SIgA对防止再感染有较强保护作用; 出现IgE介导的I型超敏反应,促使哮喘病急性发作

10、 23编辑版ppt(三)免疫性23编辑版ppt(一)分离培养 痰或咽拭子接种在SP-4培养基(四碘化铂),挑选可疑菌落,经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定,进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。三、微生物学检查法24编辑版ppt(一)分离培养三、微生物学检查法24编辑版ppt(二)血清学检查 冷凝集试验: 即用病人血清与人O型血红细胞或自身红细胞混合,4过夜时可发生凝集,而在37时这种凝集又分散解离开,但仅50左右的患者才出现阳性。此反应为非特异性。 快速诊断 ELISA:检测P1和P30蛋白mAbs PCR:从痰标本中检测16S rRNA或 P1蛋白基因三、微生物

11、学检查法25编辑版ppt(二)血清学检查三、微生物学检查法25编辑版ppt防治原则 大环内酯类药物 喹诺酮类药物四、防治原则26编辑版ppt防治原则四、防治原则26编辑版ppt解(溶)脲脲原体形态:0.50.3 m,单个或成双排列固体培养:48 h后长出直径1530 m “油煎蛋”状菌落。 最适pH为5.56.5。生化反应:分解尿素,不分解糖类和精氨酸抵抗力:对1:2000醋酸铊不敏感抗原:MB抗原是其主要膜抗原,将解脲脲原 体分为A、B两大群,14个血清型一、生物学性状27编辑版ppt解(溶)脲脲原体形态:0.50.3 m,单个或成双排列一28编辑版ppt28编辑版ppt(一)致病机制 -粘

12、附于宿主细胞表面,引起细胞膜损伤; -产生毒性代谢产物如NH3,对宿主细胞有 急性毒性作用; -磷脂酶损伤宿主的细胞膜。二、致病性与免疫性29编辑版ppt(一)致病机制二、致病性与免疫性29编辑版ppt (二)所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睾炎等泌尿生殖道疾病,还与自然流产、早产、死胎和男性不孕有关。二、致病性与免疫性30编辑版ppt (二)所致疾病二、致病性与免疫性30编辑版ppt 病原体检测 接种液体培养基,分解尿素产碱,酚红指示剂由橘黄色变为红色;再取0.2 ml培养物转种于固体培养基,在5%CO2和90%N2的环境中经37培养2448 h,用低倍镜观察菌落,进一步鉴定需用特异抗

13、血清做GIT与MIT。三、微生物学检查法31编辑版ppt 病原体检测 三、微生物学检查法31编辑版ppt核酸检测 PCR检测: 检测尿素酶基因、多带抗原(MB-Ag)基因和16S rRNA基因。此法快速、特异,适宜于大批量标本检测。三、微生物学检查法32编辑版ppt核酸检测 三、微生物学检查法32编辑版ppt加强宣传教育,注意性卫生,切断传播途径。四环素类、喹诺酮类药物治疗,但有耐药株产生。四、防治原则33编辑版ppt加强宣传教育,注意性卫生,切断传播途径。四、防治原则33编辑人型支原体-分解精氨酸,不分解尿素和葡萄糖。最适pH7.27.4。固体培养基上形成200300 m的较大菌落,呈典型的

14、“油煎蛋”状。-寄居于泌尿生殖道,通过性接触传播,可引起附睾炎、盆腔炎、产褥热等。-微生物学检测和防治原则同解脲脲原体。34编辑版ppt人型支原体-分解精氨酸,不分解尿素和葡萄糖。最适pH7.2塞麦尔维斯 产褥热35编辑版ppt塞麦尔维斯 产褥热35编辑版ppt细胞膜由蛋白质和脂质(固醇)组成三层结构36编辑版ppt细胞膜由蛋白质和脂质(固醇)组成三层结构36编辑版ppt37编辑版ppt37编辑版ppt生殖支原体-生殖支原体基本形态为烧瓶状,能发酵葡萄糖使培养基变酸,不分解尿素和精氨酸。-培养基上不生长,须在无醋酸铊SP-4培养基生长但缓慢,菌落呈典型的“油煎蛋”状。-能粘附在人泌尿生殖道上皮,主要引起尿道炎。-较难培养,生长慢,不适宜于常规实验室分离培养。38编辑版ppt生殖支原体-生殖支原体基本形态为烧瓶状,能发酵葡萄糖使培养基穿透支原体 1991年Lo首次从1例艾滋病患者尿中分离出一种新支原体

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