白血病免疫分型培训课件

1、白血病免疫分型白血病免疫分型应用目的： 确定淋巴系病变的起源和分化程度； 鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病； 确定髓系白血病各亚型； 对形态学分类不明细胞进行定性； 诊断急性未分化型白血病； 诊断急性混合细胞白血病； 诊断微小残留白血病或白血病浸润； 判断白血病/淋巴瘤预后。 白血病免疫分型2应用目的：白血病免疫分型2 流式细胞术(Flow Cytometry): 对高速流过检测区的单个细胞或生物颗粒进行多参数、快速分析（或分选）的一种技术。白血病免疫分型3 流式细胞术(Flow Cytometry):白血病免白血病免疫分型4白血病免疫分型4数据显示方式： 单参数直方图 双参数二维点图 等

2、高图 二维密度图 三维图白血病免疫分型5数据显示方式：白血病免疫分型5单参数直方图双参数点图白血病免疫分型6单参数直方图双参数点图白血病免疫分型6荧光素FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（绿）PE（藻红蛋白）：575nm（橙黄） PI(碘化丙啶）： 620nm（橙红）PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白）：675nm（深红）APC(别藻兰蛋白）： 660nm（红） 白血病免疫分型7荧光素FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（绿）白血病免疫 检测物： 细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质白血病免疫分型8 检测物：白血病免疫分型8CD（cluster of differentiation）：1982年

3、起将识别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。其他非CD系列抗原：如TCR、HLA等白血病免疫分型9CD（cluster of differentiation）正常血细胞中的抗原表达特点1. 系列保守性2. 时序性3. 抗原表达量的模式化白血病免疫分型10正常血细胞中的抗原表达特点1. 系列保守性白血病免疫分型10干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞定向髓系干细胞红系巨核系粒单核系粒系单核系CD36 CD71 CD235aCD41 CD42a/b CD61CD4 CD11b CD14 CD64 HLA-DRCD36CD15 CD71 C

4、D16(TDT CD7)CD34 CD117 CD13 CD33CD38 MPOCD34 CD13 CD33 CD117MPO白血病免疫分型11干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞定向髓系干细胞红系巨核系粒单核系粒抗原刺激干细胞早前B前B静止期BPro-B ALLPre-B ALLCommon-B ALLCLL/SLL免疫母细胞浆细胞样淋巴细胞大B细胞淋巴瘤淋巴浆细胞淋巴瘤外套细胞滤泡区母细胞中心母细胞中心细胞边缘带细胞浆细胞套细胞淋巴瘤伯基特淋巴瘤大B细胞淋巴瘤滤泡淋巴瘤边缘带淋巴瘤骨髓瘤TDT+ CD34+ cCD79a+CD19+ CD10 c-TDT+ CD34+ cCD79a+ CD19+ C

5、D20 CD10+ c-TDT+ CD34 cCD79a+CD19+ CD20+ CD10 c+CD5+ CD19+ CD20 CD22+ CD23 + sIg+ FMC7-CD38 CD138 CD56 cIg CD19- CD45-CD22+ CD5-CD10- CD23- CD22+ CD10+ FMC7+ CD23 bcl-2+ CD5- CD19+ CD20+ CD22+ CD38+ IgM+ sIg+ CD22+ CD10+ sIg+ CD34-TDT- CD5+ CD22+ sIg+ FMC7+ Cyclin D1+ CD23- CD22+ bcl-6+ CD10 CD5 CD3

6、0 白血病免疫分型12抗原刺激干细胞早前B前B静止期BPro-B ALLPre-B干细胞胸腺期胸腺期TDT+CD34+CD2cCD3CD7CD71TDT+CD34CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8胸腺期TDT+CD2CD3CD5CD7CD4/CD8TCRPrecursor-T ALL成熟T细胞各分化群白血病免疫分型13干细胞胸腺期胸腺期TDT+TDT+胸腺期TDT+Pre 造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的有无、表达强弱与血细胞的分化发育阶段密切相关，表现出与细胞系列及其分化程度相关的特性。白血病免疫分型14白血病免疫分型14白血病细胞中的抗原表达特点 表达模式基本

7、与相应阶段正常细胞相似，还具有以下特点： 1. 跨系表达 2. 时相混乱 3. 抗原表达量的改变白血病免疫分型15白血病细胞中的抗原表达特点 表达模式基本与相应阶段正常免疫分型四种急性白血病单表型急性白血病表达某一个系列抗原为主的急性白血病双表型/双克隆急性白血病未分化型急性白血病白血病免疫分型16免疫分型四种急性白血病单表型急性白血病白血病免疫分型16各系急性白血病重要抗原指标1. 急性淋巴细胞白血病 (AL) 敏感性 特异性B-ALL:CD19 100% 非特异cCD79a 99% 特异T-ALL:CD7 100% 非特异cCD3 100% 特异白血病免疫分型17各系急性白血病重要抗原指标

8、1. 急性淋巴细胞白血病 (AL)2. 急性髓细胞白血病 (AML) 表达率 特异性CD13 70% 非特异CD33 70% 非特异CD117 70% 特异cMPO 70% 特异白血病免疫分型182. 急性髓细胞白血病 (AML)白血病免疫分型18白血病免疫分型培训课件ALL CD13， CD33t(9;22)AML CD2+， DR-M3 t(15;17)，或RAR+，t(11;17) CD2+， DR+M4Eo inv(16)或 t(16;16) CD19+M0t(9:22)多见 M2t(8;21) TdT+, CD7+见于M0 CD56+ M5/M4白血病免疫分型20ALL 白血病免疫分

9、型20双表型急性白血病记分系统分值 B系 T系 髓系 2 cCD79a cCD3 cMPO CD22 TCR cIgM TCR 1 CD19 CD2 CD117 CD10 CD5 CD13 CD20 CD8 CD33 0.5 TdT TdT CD14 CD24 CD7 CD15 CD64白血病免疫分型21双表型急性白血病记分系统分值 部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型 CD5CD10CD19CD22CD23HLA-DRFMC7SIgCD11cCLL+-+/-+-+/-PLL-+-+-MCL+-/+-+-HCL-+-+FCL-+-/+/-+-MZL-+-+/-LPL-+-/+-/+注：HCL

10、 CD103+ CD25+白血病免疫分型22部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型 CD5CD10CD1部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD2CD3CD5CD7CD4CD8CD25CD56CD57T-CLL/PLL+/-/+-T-LGL+/-+/-+-/+NK-LGL+-+/-+-ATL+-+肝脾T细胞淋巴瘤：CD2+ CD3+ CD7+ TCR+ CD16+/- CD56+/- CD8-/+ CD4- TCR-白血病免疫分型23部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD2CD3CD5CD标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、淋巴结等。标本要求：细胞有活

11、性，最好不要超过48h。白血病免疫分型24标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹光散射特征与细胞形态的关系白血病免疫分型25光散射特征与细胞形态的关系白血病免疫分型25淋巴单核粒细胞CD45CD45M4/M5M 3正常白血病L13, M02 M6, M7TSSCSSCMM 非造血 来源细胞CD45在免疫分型中的应用意义原始嗜碱嗜酸白血病免疫分型26淋巴单核粒细胞CD45CD45M4/M5M 3正常白血病L1正常骨髓白血病免疫分型27正常骨髓白血病免疫分型27AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5白血病免疫分型28AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5白血病AML-M6非造血细胞非特异性染色（死亡细胞）ALL白血病免疫分型29AML-M6非造血细胞非特异性染色（死亡