缺血性脑卒中课件

1、电刺激对大鼠缺血性脑卒中保护作用研究 缺血性脑卒中电刺激对大鼠缺血性脑卒中保护作用研究 缺血性脑卒中Stroke200万150万700万200亿2007年中国脑血管防治指南 缺血性脑卒中Stroke200万150万700万200亿2007年中国脑Chinas battle with stroke Fuelled by the spread of unhealthy western lifestylessuch as poor diet, physical inactivity, and tobacco smokingchronic diseases cause about 80% of dea

2、ths in China each year, a third of which are due to stroke. Lancet Neurol. 2008 Dec;7(12):1073脑卒中鏖战中国缺血性脑卒中Chinas battle with stroke脑卒中鏖Ratio67%33%Ischemic stroke缺血性脑卒中Ratio67%33%Ischemic stroke缺血性脑美国卒中协会溶栓治疗指南推荐 Intravenous rtPA (0.9 mg/kg, maximum dose 90 mg) is recommended for selected patients w

3、ho may be treated within 3 hours of onset of ischemic stroke. (Class I, Level of Evidence A) Intra-arterial thrombolysis is an option for treatment of selected patients who have major stroke of 6 hours duration due to occlusions of the MCA and who are not otherwise candidates for intravenous rtPA. (

4、Class I, Level of Evidence B)狭窄的溶栓时间窗是溶栓治疗的瓶颈临床的实际使用率3-5%缺血性脑卒中美国卒中协会溶栓治疗指南推荐 Intravenous rt谷氨酸损伤机制谷氨酸神经毒性脑缺血期谷氨酸显著升高谷氨酸浓度与神经损伤呈正相关升高机制一次升高：缺血后突触前膜去极化，ATP合成不足，再摄取障碍。二次升高：胞浆膜完整性受到损害，加重谷氨酸释放。损伤作用非NMDA受体： Na、H2O进入细胞；Cl失衡，导致细胞水肿。NMDA受体： Ca2进入细胞，钙超载，血脑屏障破坏。 缺血性脑卒中谷氨酸损伤机制谷氨酸神经毒性脑缺血期谷氨酸显著升高升高机制一神经营养因子保护机制B

5、DNF促进中枢神经存活、增殖和分化促进突触生长和重塑脑创伤后BDNF的表达显著提高如能有效增加缺血区域BDNF的表达可显著降低梗死比，促进功能恢复。缺血性脑卒中神经营养因子保护机制BDNF促进中枢神经存活、增殖和分化促进神经营养因子保护机制增加血脑屏障的渗透性，加重脑损伤促进神经、血管再生；神经保护作用急性期晚期VEGF缺血性脑卒中神经营养因子保护机制增加血脑屏障的渗透性，加重脑损伤促进神经谷氨酸VEGF超急性期急性期VEGFBDNF缺血损伤后期缺血性脑卒中谷氨酸VEGF超急性期VEGFBDNF缺血损伤后期缺血性脑卒电刺激肌张力障碍 特发性震颤 癫痫 精神性疾病 帕金森 高频低频高频刺激可减少

6、谷氨酸释放低频刺激可增加神经营养因子表达缺血性脑卒中电刺激肌张力障碍 特发性震颤 癫痫 精神性疾病 帕第一部分：深部电刺激对急性缺血性脑 卒中保护作用及机制研究第二部分：皮层电刺激对急性缺血性脑 卒中保护作用及机制研究缺血性脑卒中第一部分：深部电刺激对急性缺血性脑缺血性脑卒中第一部分：深部电刺激对急性缺血性脑卒中保护作用及机制研究缺血性脑卒中第一部分：深部电刺激对急性缺血性脑卒中保护作用及机制研究缺血 双极电极 旁前囟右侧4.3mm深度为距颅平面1.7mm电极植入部位缺血性脑卒中 双极电极 电极植入部位缺血性脑卒中实验分组250280g雄性SD大鼠 对照2Hz20Hz100Hz100/2Hz缺

7、血性脑卒中实验分组250280g雄性SD大鼠 对照2Hz20Hz1技术路线TTC染色行为学评分建立大鼠MCAO模型缺血24小时处死大鼠提取脑组织保护效果观察 机制研究免疫印迹法测定VEGF的表达免疫印迹法测定BDNF的表达植入电极，于缺血3h开始电刺激2h筛选成功的大鼠模型缺血性脑卒中技术路线TTC染色行为学评分建立大鼠MCAO模型缺血24小时深麻醉取脑冰盐水10min冠状面切片(2mm)2TTC染色10福尔马林固定37 30min拍照并进行图象分析TTC染色借助于鼠脑槽缺血性脑卒中深麻醉取脑冰盐水10min冠状面切片2TTC染色10福尔TTC染色*P0.05, vs Control grou

8、p; # P0.05, vs other group缺血性脑卒中TTC染色*P0.05, vs Control groupGarcia 评分标准测试得分0123自主运动（笼中活动5分钟）没有活动几乎不能活动能活动，但活动范围没有达到鼠笼中的3面活动范围至少在能达到鼠笼中的3面四肢活动对称性左侧：没有活动左侧肢体有轻微的活动左侧肢体缓慢活动双侧肢体活动对称前肢的对称性（提起尾巴时前肢的伸展情况）左侧：不活动无法伸展左侧能活动，肢体能轻微的伸展左侧活动和肢体伸展的不如右侧双侧前肢对称伸展金属丝鼠笼中的攀援情况不能攀援左侧稍弱攀援正常触摸双侧躯干反应左侧无反应左侧反应减弱反应对称触须反应左侧无反应左

9、侧反应减弱反应对称缺血性脑卒中Garcia 评分标准得分0123自主运动（笼中活动5分钟）Garcia行为学评分a P0.05, vs Control group; b P0.05, vs 2Hz group缺血性脑卒中Garcia行为学评分a P0.05, vs Contro免疫印迹法测定BDNF/VEGF的表达*P0.05, vs Control group; 缺血性脑卒中免疫印迹法测定BDNF/VEGF的表达*P0.05, vs小 结2Hz血管内皮生长因子VEGF降低了梗死比显著提高了行为学表现 抑制了血脑屏障通透性的升高？缺血性脑卒中小 结2Hz血管内皮生长因子VEGF降低了梗死比 抑

10、制了血第二部分：皮层电刺激对急性缺血性脑卒中保护作用及机制研究缺血性脑卒中第二部分：皮层电刺激对急性缺血性脑卒中保护作用及机制研究缺血旁前囟右侧4.3mm电极置于硬脑膜外电极植入部位 单级电极anodal/cathodal缺血性脑卒中旁前囟右侧4.3mm电极植入部位 单级电极缺血性脑卒中 实验分组250280g雄性SD大鼠 假手术组sham group对照组vehicle group阳极刺激组anodal阴极刺激组cathodal缺血性脑卒中 实验分组250280g雄性SD大鼠 假手术组对照建立大鼠MCAO模型技术路线TTC染色缺血24小时处死大鼠提取脑组织保护效果观察 机制研究免疫印迹法测定

11、VEGF的表达免疫印迹法测定BDNF的表达植入电极，于缺血3h开始电刺激3h筛选成功的大鼠模型行为学评分TUNEL染色伊文氏蓝灌注测定血脑屏障渗透性缺血性脑卒中建立大鼠MCAO模型技术路线TTC染色缺血24小时保护效果观TTC染色*P0.05, vs Vehiclel group; # P0.05, vs cathodal group缺血性脑卒中TTC染色*P0.05, vs Vehiclel grouGarcia行为学评分*P0.05, vs Vehiclel group缺血性脑卒中Garcia行为学评分*P0.05, vs VehicleTUNEL染色P0.05 vs sham group

12、; *P0.05, vs Vehiclel group; # P0.05, vs cathodal group缺血性脑卒中TUNEL染色P0.05 vs sham group; 免疫印迹法测定VEGF的表达P0.05 vs sham group; *P0.05, vs Vehiclel group; # P0.05, vs cathodal group缺血性脑卒中免疫印迹法测定VEGF的表达P0.05 vs sham 免疫印迹法测定BDNF的表达P0.05 vs sham group; 缺血性脑卒中免疫印迹法测定BDNF的表达P0.05 vs sham 伊文氏蓝染色实验P0.05 vs sha

13、m group; *P0.05, vs Vehiclel group; # P0.05, vs cathodal group缺血性脑卒中伊文氏蓝染色实验P0.05 vs sham group; 小 结皮层电刺激血管内皮生长因子VEGF降低血脑屏障的渗透性降低了梗死比提高了行为学表现减少了细胞凋亡缺血性脑卒中 小 结皮层电刺激血管内皮生长因子VEGF降低血脑屏障的渗透讨论与分析100Hz刺激组与对照组相比其行为学表现、梗死比差异无统计学意义，其可能与刺激的开始时间有关。2Hz刺激组与对照组相比BDNF的表达无统计学差异，其可能与刺激持续时间较短有关。电刺激对缺血性脑卒中的保护机制除急性期降低VE

14、GF表达外是否存在其他因素尚有待进一步实验验证。缺血性脑卒中讨论与分析100Hz刺激组与对照组相比其行为学表现、梗死比差在大鼠永久性脑卒中模型，电刺激有明显的保护作用。且以频率为2Hz的阳极电刺激保护作用最显著。 在大鼠永久性脑卒中模型，低频短时电刺激可降低VEGF的表达，且VEGF表达水平与神经保护作用呈负相关。电刺激为临床治疗脑卒中提供了新的思路。小 结缺血性脑卒中在大鼠永久性脑卒中模型，电刺激有明显的保护作用。且以频率为21.刘竞辉 等。电刺激对大鼠缺血性脑卒中的保护作用 中华神经外科疾病研究杂志，2013，12(1)：8-11. 2. Jinghui Liu, Jiang Li, Zh

15、enwei Zhao,et al.Protective effect of cortical electric stimulation on cerebral ischemia injury in rats.（ submission ）论文发表缺血性脑卒中1.刘竞辉 等。电刺激对大鼠缺血性脑卒中的保护作用论文发表缺衷心的感谢恩师赵振伟教授，在我求学期间给予了我无私的关怀和帮助。导师高尚的医德，精湛的医术，严谨的治学态度，让我能够成为他的学生而倍感自豪。所有的一切，无不深深的影响着我，激励着我，使我受益终身。衷心的感谢高国栋教授，在我求学期间给予的无私帮助和深切关怀，为我在今后的学习过程中树立了更高更远的志向，为我今后的工作中注入了认真严谨，不断创新，勇攀高峰的精神。衷心的感谢辅导老师李江副教授对我实验工作的指导和帮助，使我受益匪浅。衷心的感谢杨倩教授，在我实验期间给予了我很多关