益气化瘀补肾方治疗气虚血瘀肾虚型颈椎病大鼠的机制研究

1、益气化瘀补肾方治疗气虚血瘀肾虚型颈椎病大鼠的机制研究【关键词】益气化瘀补肾方;气虚;血瘀;肾虚;颈椎病;大鼠reeiveday30,2021;aeptedjuly24,2021;publishednlinejanuary15,2021.freefulltext(htlandpdf)isavailableat.frardlinkingandreferenelinkingviarssref.di:10.3736/ji20210108penaessehanisfyiqihuayubushenreipeintreatingervialsyndreinratsithqidefiieny,bldstasi

2、sandkidneydefiienyinstitutefspinedisease,lnghuahspital,shanghaiuniversityftraditinalhineseediine,shanghai200032,hinabjetive:texplretheehanisfyiqihuayubushenreipe(yhbr),apundtraditinalhineseherbalediine,intreatingervialsyndre(s)ithqidefiieny,bldstasisandkidneydefiienyinrats.nlusin:yhbrayiprvethenditi

3、nfervialsyndreithqidefiieny,bldstasisandkidneydefiienybyregulatingiunesyste,agulatinsysteandendrinesyste,anddelaythedegeneratinfervialintervertebraldisbyregulatingextraellularatrixandetallprteasesinintervertebraldis.keyrds:yiqihuayubushenreipe;qidefiieny;bldstasis;kidneydefiieny;ervialsyndre;rats益气化

4、瘀补肾方是施杞教授的经历方。本研究利用气虚血瘀肾虚型颈椎病动物模型，讨论益气化瘀补肾方对气虚血瘀肾虚型颈椎病的作用机制。1材料与方法1.1实验材料1.2分组与造模方法简称模型组和益气化瘀补肾方组，每组10只。1.3指标测定其他血液样本同此，使各组样本量分别为7、7、7。参加pe标记鼠抗人d62p抗体20l，混合，4放置20in；加2l红细胞溶解液放置10in破红细胞；离心2000r/in，5in，弃上清液；用磷酸盐缓冲液phsphatebuffersaline,pbs洗涤细胞23次，再悬浮于0.3lpbs中，用流式细胞仪检测d62p的表达。实验由中国科学院上海生命科学研究院细胞所完成。每组8个

5、样本。比较采用单因素方差分析。2结果2.1动物行为和体征正常组大鼠喜动、活动灵敏、皮毛光泽、无眼眯眼睑下垂和缩肩拱背现象。其余两组大鼠造肾虚模型后，形体逐渐肥胖，少动；在造气虚模型后7d左右，开场出现倦怠少动、喜卧、皮毛蓬乱无光泽、眼眯和缩肩拱背现象，随着时间的延长病症逐渐加重；造血瘀模型后67d大鼠出现舌质瘀紫，尾色瘀青。益气化瘀补肾方组动物上述行为和体征状态恢复较快。2.2子宫及附件形态和质量模型组和益气化瘀补肾方组与正常组比较，子宫缩小，输卵管变细，质量明显减轻，益气化瘀补肾方组与模型组比较无明显差异。2.3血浆ap、gp含量和ap/gp比值模型组与正常组比较，血浆ap、gp含量及ap/

6、gp比值差异无统计学意义；益气化瘀补肾方组与正常组比较，血浆gp含量降低p0.05，与正常组和模型组比较，ap/gp比值增高p0.05。见表1。2.4血液流变学变化与正常组相比，模型组和益气化瘀补肾方组全血低切黏度、全血高切黏度和低切复原黏度均明显增高p0.01；益气化瘀补肾方组与模型组比较全血高切黏度显著降低p0.01；各组间聚集指数差异无统计学意义。见表2。表1血浆ap、gp含量和ap/gp比值表2血液流变学指标变化2.5血d62p表达与正常组相比，模型组和益气化瘀补肾方组d62p表达明显增高p0.01。益气化瘀补肾方组与模型组相比，d62p表达明显降低p0.05。见表3。2.6血清e2含

7、量与正常组相比，模型组和益气化瘀补肾方组血清e2含量明显降低p0.01。益气化瘀补肾方组血清e2含量比模型组增高p0.05。见表4。2.7颈椎间盘he染色正常组颈椎间盘纤维环排列稍紊乱，髓核稍有皱缩，软骨终板潮标明晰可见，关节软骨层较薄；模型组与正常组相比，颈椎间盘高度降低，纤维环出现裂隙，纤维排列紊乱，髓核缩小，软骨终板变薄；益气化瘀补肾方组颈椎间盘高度维持正常，纤维环排列稍紊乱，髓核构造良好，软骨终板变化不明显。见图1。2.8颈椎间盘型胶原免疫组化染色正常组型胶原在髓核与纤维环以及软骨终板均有分布；与正常组相比，模型组型胶原表达减少，主要表如今纤维环；与模型组相比，益气化瘀补肾方组型胶原在

8、纤维环的表达有所增加。见图2。表3血d62p的表达表4血清e2含量3讨论颈椎病属中医学“筋伤范畴，无论外邪侵袭还是劳损等病因所致，皆离不开气血的变化。颈椎病的发生开展除离不开气和血外，其与肾的关系亦较为亲密。?素问六节脏象论?曰：“肾者主蛰，封藏之本，精之处也。所谓精，据?灵枢本神?所曰“生之来谓之精，即指先天之精气，也就是肾气，它对人体之生长、发育及形体之盛衰始终起着主导作用。颈椎病发生之相关因素中，椎体骨质增生、骨质疏松都与肾气是否充盈、骨与髓能否得到滋养不无关系。?张氏医通?云：“有肾气不循故道，气逆挟脊而上，至肩背痛。这里也提出了肾与颈椎病的相关性。大鼠的行为状态，血浆ap和gp含量与

9、免疫和代谢功能亲密相关，血液流变学和d62p是血瘀证的重要指标，血清雌二醇含量的减少表示肾功能低下。本实验中，这些实验室指标的测定结果说明模型组大鼠出现了气虚、血瘀、肾虚证的相关病理改变。颈椎间盘形态学、免疫组织化学及分子生物学的变化，证实了模型组大鼠有明显的椎间盘退变。该模型可以用于气虚血瘀肾虚型颈椎病的相关研究。益气化瘀补肾方由黄芪、川芎和补骨脂等中药组成。黄芪不仅有增强免疫、扩张血管、改善微循环、强心和抗衰老等作用，也具有保护肾脏的作用4。川芎为“血中之气药，其有效成分川芎嗪和阿魏酸等具有去除氧自由基、钙拮抗、扩张血管、抗血小板聚集和抗血栓形成等作用5。补骨脂有较强的雌激素样作用6，还能通过调节神经和血液系统增强免疫和内