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文档简介

1、一般植物病理学实习报告姓名:学号:年级专业:指导老师:组别:小构成员:实习日期:1/23目录前言一实习目的与容二实习安排三实习过程与总结四植物病害病原断定报告五病害检查报告六实习实验总结七蜡叶标本展现八出门展现九实习建议十结束语2/23前言植物病理学是主要研究引起农作物病害发生的各种生物与非生物引子与其致病体系、病原物与寄主间互相关系和控制病害发生、减少发病程度、减少病害所致损失的原理与具体措施的一个重要农业学科。学习基本的植物病理学、流行学知识,掌握常有农业病害鉴别和病原物采集、分别等技术,是对作为高等农科院校植保专业学生提出的要求。为稳定和印证所学的植物病理知识,增强学生对当地区主要作物与

2、主要植物病害的直观认识,我校资环学院为植保专业安排了植物病理学课的实习,以增强学生理论结合实质,提升分析问题和解决问题的能力。一实习目的与容(一)实习目的稳定和印证所学植物病理学基础理论知识;纯熟掌握植物病理学实验操作技术;经过室外观察,认识当地区主要作物与主要植物病害的形态特色;增强理论联系实质,提升分析问题和解决问题的能力。(二)实习容与方法线虫病害标本的采集、分别与断定;植物病害症状观察,病害标本的采集和制作与常有病害断定;植物病原真菌玻片标本制作与病原真菌断定方法;植物病原的分别与培育。二实习安排时间:2012年5月28日2012年6月8日地点:华南农业大学5月28日华南农业大学跃进北

3、植保农场采集病害标本;6月30日市白云区采集病害标本;6月4日华南农业大学增城宁西基地采集病害标本与病害检查;指导老师:3/23三实习过程与总结(一)实习行程1、5月28日:上午8:30全班同学在资环院楼实验室227进行实习动员,实习老师部署实习事宜以与注意事项,领取实习工具,到图书室借用工具书,病理学实习正式拉开序幕;下午3点在跃进北植保农场集中采集植物病害标本与土壤。2、5月29日:上午8:30开始在资环院楼实验室228、229,琼光老师和纪春艳老师分别指导我们进行细菌和真菌的分别3、5月30日:上午8:15在东区芷园学生饭堂前汇合,全体实习老师带领出门去市白云区采集病害标本。4、6月1日

4、:下午3点在资环院楼实验室227,文艳华老师指导我们进行土壤中线虫的分别。5、6月2、3日安息两天。6、6月4日:早晨8:15在芷园饭堂前汇合,全体实习老师和我们去华南农业大学增城宁西基地采集病害标本和进行田间病害检查。7、6月5日:上午8:30开始,全天在院楼228进行病害标本断定并观察细菌分别培育结果;下午,在老师的指导下制作玻片标本。8、6月6日:早晨8:30开始全天在资环院楼实验室227进行蜡叶标本的制作与病原断定,并观察真菌分别培育结果;下午进行拨片断定。9、6月7日:在资环院楼229进行病原玻片标本观察。10、6月8日:上午9:00进行普病实验考试;各组实习以ppt形式进行小组实习

5、总结,下午在资环院楼进行实习交流总结。(二)实习过程中主要的容出门采集病害标本和田间病害检查:(1)主要有三个病害标本采集地:华南农业大学跃进北植保农场、市白云区、华南农业大学增城宁西基地。(2)采集标本应准备的工具和资料有:塑料带、标签、笔、记录本、小土铲、小剪刀、相机等。(3)注意取样部位:病害标本上有子实体的应该尽量在老叶上采集;病毒病应4/23尽量采集顶梢与新叶;整个植株萎蔫的植株可连根挖出,可连通根际的土壤一起采集;危害根部的线虫病害标本要采集病根和根围土壤。(4)田间病害检查:选取田间的重要病害作为检核对象,采纳五点取样法进行对此病害进行田间病害检查,每块田依据地形选择五个取样点,

6、每点检查10株,依据不一样作物的不一样病害检查方法和严重度分级标准填写病害检查表和总结病害检查报告。(5)采集病害标本时,应记录采集时间、采集地点、采集者、寄主名称等信息;田间病害检查时,应记录检查时间、检查地点、检查病害、检查面积、检查人、气象资料、检查小组、检查结果等信息。(6)实习拍照:经过拍照将标本病害症状的自然情况和我们的实习过程记录下来。(7)标本的保存:将采集的标本夹在书籍中干燥保存,用以标本病害断定。实验室进行标本的整理与病原断定:(1)将采集到的病害标本带到实验室,在老师的指导下,制作玻片,在显微镜下观察,参照工具书,断定出所采集的标本病害名称和学名,描画病原菌特色,并绘出病

7、原形态图。(2)整理已断定标本,选取此中病症典型的叶片,连续用书籍夹保持干燥以保存。(注:在标本断定过程中,要将在显微镜下观察到的病原形态和所对应的寄主形态用相机拍摄记录下来)植物病原细菌(柑橘溃疡病病原细菌)和真菌(水稻纹枯病菌)的分别与培育;细菌培育基:牛肉膏蛋白胨培育基真菌培育基:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培育基(1)植物病原细菌的分别(划线分别法)与培育步骤:消毒:赶早倒好牛肉膏蛋白胨培育基平板。并取3个小碟,分别加入一点95%的酒精点燃消毒。而后在此中挨次分别加入半碟75%酒精、0.1%升汞、无菌水。选取一小片新鲜的柑橘溃疡病植株维管束病组织,用清水洗净;洗净后放于装有75%酒精的小

8、碟中进行表面消毒30秒1分钟;将病组织加入到0.1%升汞中5/23消毒1分钟;将病组织加入到无菌水的小碟中漂洗3次。捣碎:滴12ml无菌水在一个灭菌小皿中,将消毒好的病组织捣碎在所滴无菌水中,搅拌后静置10分钟,用以制备菌悬液。划线:用接种环沾取一环菌悬液,用划线分别法在准备好的培育基中划线次,每划完一次在酒精灯下灼烧一次。培育:将划线的平板倒置,写好标签(注明和日期),置于2528培育箱中培育,35天后观察结果。要求与注意事项:a先倒平板,每2人一个小三角瓶,共倒4个皿,没人分别两个皿;b无菌操作,保持环境干净,减少人员流动;c分别时保持寂静;d划线时动作要稍微,不要划破培育基。成就展现:2

9、)植物病原真菌的分别与培育步骤:PDA培育基:在酒精灯火焰上方将PDA培育基倒在无菌培育皿中,倒的过程中应预防污染。消毒:并取3个小碟,分别加入少量95%的酒精点燃消毒。而后在此中挨次分别加入半碟75%酒精、0.1%升汞、无菌水。切取十小片新鲜的真菌性病害植株组织(取病健部位),用清水洗净;洗净后放于装有75%酒精的小碟中进行表6/23面消毒少于40秒钟;将病组织用镊子夹到0.1%升汞中消毒不超出40秒钟;将病组织加入到无菌水的小碟中漂洗3次。搁置:选取十小片病组织中较合格的五片,用镊子夹起并轻轻放在培育基上。培育:将划线的平板倒置,写好标签(注明和日期),置于2528培育箱中培育,35天后观

10、察结果。要求与注意事项:a无菌操作,防范培育基受污染b搁置病组织于培育基时,为防范平板倒置时病组织掉落,可轻轻用镊子按下病组织,使之固定,但动作要稍微,不可以弄破培育基。成就展现:(没有分别出相应的真菌)原由分析:培育皿很干净:可能没有找到病原部位也许在制作过程顶用了酒精灯加热;培育皿受污染:在制作过程中让实验室的菌物进入培育皿。植物病原线虫分别与观察(寄生性线虫与腐生性线虫差别观察);(1)植物病原线虫的分别(贝曼漏斗法):分别前用水洗净分别线充所需实验器械,有漏斗、小试管、筛网。7/23分别时在漏斗下边接一个小管后,在漏斗中加入适当的水;漏斗放大小适中的筛网,筛网上铺一纸巾(维达牌)后,加

11、土样于筛网上,土样要淹没在水中(若从前加的水过少,则用蒸馏瓶当心的在漏斗边沿注入水直至淹没土样),静置漏斗24小时。注:每小组采集了三各种植不一样作物的土样,每种土样都要进行植物病原线虫分别,故上述实验共操作三次。植物病原线虫的观察:将小试管中采集到的物质倒入小皿中,在解剖镜下找寻线虫。找到线虫后用胶头滴管将线虫吸到凹玻片中,盖上盖玻片,玻片在酒精灯上来回挪动34次后,用显微镜找寻并观察、判断所分别出线虫。(有口针的线虫为寄生线虫,无口针的线虫为腐生线虫;有交合刺的线虫为雄虫,无交合刺的线虫为雌虫)(3)成就展现8/23这个实验还算成功,腐生型的、寄生型的都被我们找到了,并且,部分线虫可以很清

12、楚地看到其部结构。植物病害蜡叶标本的制作:1)选取断定完成的病害病症典型的叶片,最少两片。2)将选取的叶片置于吸水纸中,用熨斗加压烘干叶片至叶片完整干燥。3)将熨干的病害叶片固定在一A4白纸上(最好展现叶片的正反面),在白纸的右下角写上采集时间、病害名称、拉丁学名、采集时间、采集地点、采集人。植物病原真菌的玻片的制作(主要掌握半永久性玻片的制作):(1)玻片标安分类(按保存时间长短、浮载剂的不一样而分类)暂时玻片保存时间:半天浮载剂:水半永久玻片保存时间:310年浮载剂:棉蓝乳酚油封固剂:中性树胶永久玻片保存时间:永久浮载剂(封固剂):中性树胶、加拿大树胶2)制作方法:挑刮法(实验要求)、撕表

13、皮法、粘贴法、盖玻片培育菌制作法、涂抹法、组织整体透明法、徒手切片法(实验要求)、冰冻切片法、白腊切片法等等。3)玻片制作:媚老师指导我们的实习要学惯用挑刮法制作豇豆煤霉病Pseudocercosporacruenta)和徒手切片法制作竹子黑痣病菌(Phallychora9/23graminis)的半永久玻片。.挑刮法制作豇豆煤霉病(Pseudocercosporacruenta)的半永久玻片:步骤:在载玻片上滴一滴浮载剂,用刀片沾取浮载剂后刮下豇豆叶表面上生长优异的粉状物,并将其点在已滴有浮载剂的载玻片上,盖上盖玻片;在显微镜下观察到煤霉菌的分生孢子梗上着生着串生的椭圆形或卵形分生孢子;完成

14、后写上标签。注意:a不可以两种菌混杂;b浮载剂不可以太大滴;c盖玻片要用手帕擦干净。.徒手切片法制作竹子黑痣病菌(Phallychoragraminis)的半永久玻片:步骤:选取小黑粒许多且明显突出的病组织,将病组织切成长1cm,宽0.5cm的长方形(横切或纵切皆可);在载玻片上连续快速切片;切完后滴上适当清水,在解剖镜下挑取最少3个可以观察到子囊壳中子囊的薄片;再挑到滴有棉蓝乳酚油的玻片上,而后封盖。注意:a切片刻刀片和载玻片保持垂直;b切片要尽量切薄。(三)实习中小组的总结经验缺少,但收获重重在出门采集植物病害标本中,因为缺少经验,也缺少对一些植物的病害形态的认识,因此除了随从指导老师摘取

15、的病害,我们一些采集的植物植株与叶片(特别是茶叶)都没有检查出病原物。在整个采集与断定过程中我们小组的最大诟病就是缺少田间作物知识的累积,没法辨识出田间的植物名称,特别在第一次采集时随从老师采集时没有注明叶片所属植物名称,以致给以后病害断定带来许多的麻烦。尽管这样,我们小组在整个实习过程中向来保持着虚心学习的态度,在实习过程中边采集边学习,分工明确,踊跃主动,出门采集受益匪浅,实验室断定病害也不赖。固然实验室的断定很难很繁琐,但是我们从中都学到了很多知识,让我们对前几个月的理论知识做了全面系统的回顾。病原分别仍需努力植物病原真菌与细菌的分别与培育实验,我们认识了细菌培育基和真菌培育基的不一样构

16、成,也接触与学习到细菌与真菌的重要且基本的培育法。细菌实验得到了单个的目的菌青枯病病菌,但是平板划线其实不是很成功,还是有很多菌落没有分开。真菌实验玉米的真菌分别还算不错,长出了理想菌丝;但是水稻的分别10/23中培育基有污染,培育基长出了杂菌。线虫分别简单断定难在植物病原线虫的分别与观察实验中,我们小组分别取了水稻、玉米、节瓜三种植物的根系土壤,在实验中也同时观察了其他小组的土壤线虫,除了在水稻中没发现线虫,我们小组在土壤中看到了不一样种类的线虫也学会区分寄生性线虫与腐生性线虫、雄虫和雌虫。实验中文艳华老师的踊跃指导让我们可以更加直观的理解线虫,也让我们对线虫理论的认识更加的深入。制作玻片需

17、要耐心植物病原真菌的半永久玻片的制作是实习中我感觉是最有难度与挑战性的一项实习容。九里香白粉病固然好制片,但是要做出有分生孢子梗的并且分生孢子串生在上边的玻片的确有点难度。特别是竹子黑痣病玻片的制作,这就要靠自己的刀工了,开始的时候自己几十刀下去,没有一片符合要求,这项工作也相当考验自己的耐心,最后是自己在小构成员的帮助下和老师的指导下经过一个上午的时间才困难的挑出了三个薄片。腊叶标本靠累积腊叶标本制作也算是实习中比较轻松的容吧,因为我们小组在采集标本的时候也注意采集特色明显好做标本的植物病害,因此给这个环节带来了很大的便捷。但是,腊叶标本需要在平常的时候就要做好采集以与压片的工作。这会直接影

18、响到最后的结果以与标本的雅观。在大家分工合作下,最后我们组共制作了包含大豆细菌性病害、豇豆煤霉病、花生褐斑病、丝瓜白锈病这四种不一样病害的腊叶标本。玻片识别见英豪玻片标本的辨识与识别是对我们实习的一个重要核查,也是对我们记忆力极限的一次冲击,每个人都很认真的观察、识别、绘图、记忆。这将是实习最后大家争论英豪的时刻!尽管此次考验很艰辛,但是对我们很好地回顾真菌知识有了很大的帮助。也正是因为这个核查,使我们的更有原由去学习和认识真菌的实物。11/23四植物病害病原断定报告:琦光学号:2专业:植物保护(农产品安全与检测)班级:植保安检二班组别:第一组项目学名病原菌特色描画病原形态图病害名称1、水稻纹

19、枯病Rhizoctonia病菌不产生孢子。菌丝,具分支,交Solani角处呈直角形,隔膜出有缢缩菌核球形、黑色,直径0.150.25毫米。叶鞘病斑和菌Sclerotiumoryzae核表面还可产生2、水稻杆腐病Catt.与分生孢子(图3)。S.oryzaeCatt.分生孢子新月形,Var.irregulareR34个分开,中间oger两个细胞褐色,两端的细胞无色,有的顶端细胞修长如卷须。3、黄瓜白粉病Sphaerotheca.fuli个子闭囊壳产生1ginea囊;隶属丝菌丝状4、丝瓜白粉病Sphaerotheca.fuli闭囊壳产生1个子ginea囊;隶属丝菌丝状12/235、苦瓜白粉病6、茄

20、子白粉病7、豇豆白粉病8、节瓜白粉病9、空心菜白锈病10、豇豆煤霉病、Oidiumsp.分生孢子梗,单生或3-5个串生的椭圆形分生孢子Sphaerotheca无性态分生孢子fuliginea串生在直立的分生孢子梗上Sphaerotheca分生孢子梗上串astragali生许多椭圆形或卵圆形分生孢子Erysiphe无性生殖体分生cucurbitacearum孢子梗结构简单,分生孢子在其上串生Albugo很多散生的孢子囊,四周很多包囊bliti梗。纵切会发现孢(Biv.)Kuntze囊梗平行摆列在寄主表皮下,孢子囊串生分生孢子梗褐色,丛生,丝状,分生Cercospora孢子针形、倒棒vignae形

21、、鞭形,无色,多隔膜13/2311、黄瓜霜霉病12、苦瓜霜霉病13、莴苣霜霉病荔枝霜疫病15、番茄早疫病Peronospora孢囊梗二叉状锐brassicae角分支,尾端尖锐,孢子囊卵形或椭圆形包囊梗基部稍膨大,上部呈假单轴Pseudoperonospor式二叉状锐角分acubensis支,孢子囊卵形,有乳突,萌发是产生游动孢子孢囊梗自气孔伸出,单生或2-6根束生,无色,Bremia无分开。骨干基lactucaeRegel部稍膨大,叉状对称分枝4-6次游动孢囊梗57微米,长152一Peronophythoral092微米,无色,有隔膜,顶部单分litchi枝3次后在分2枝先端再双叉,末小梗的顶

22、端略尖,其上同时形成1个孢子囊菌丝状有隔膜。分生孢子梗单生或Alternaria簇生,圆筒形,有Solani17个隔膜,暗褐色,顶陌生生孢子。分生孢子棍棒状,顶端有修长的嘴胞,黄褐色,具纵横隔膜。14/2316、辣椒疫病黄瓜疫病柑橘溃疡病芒果炭疽病PhytophthoracapsiciPhytophthoradrechsleriTuckerXanthomonasCampestrispv.citriColletotrichumgloeosporioidesPenz包囊梗简单,菌丝状,无隔,较粗,淡色。孢子囊顶生,长椭圆形,淡色,顶端有乳头状突出。菌丝丝状、无色、宽3571微米,多分枝。幼菌丝无隔

23、,老熟菌丝长出瘤状节结或不规则球状体,部充满原生质实验中细菌病原形态未做断定菌丝初无色,后浅褐色,圆筒形;在病斑表面散生浅褐色扁平或隆起的分生孢子盘,盘密生短小的分生孢子梗,梗上着陌生生孢子。分生孢子单胞、无色、椭圆形或圆筒形、直立或稍弯15/23孢子盘上有很多刚毛,灰褐色,多曲折。分生孢20、番茄炭疽病Colletotrichum子团,着生大批lycopersici的分生孢子。分生孢子圆筒形、单胞、无色分生孢子盘大小不一,盘上具密集的黑色刚毛,21、茄子炭疽病Colletotrichum刚毛具3个隔truncatum0膜,下粗上尖,尖端色稍浅。分生孢子无色,新月形或镰刀状,一端尖利,另一端较

24、钝,单细胞外分生子盘褐色,22、辣椒炭疽病Colletotrichum.gl具刚毛,分生孢子oeosporioides梗褐色,分生孢子新月形生孢子盘黑色,圆形或近圆形。分生Colletotrichum孢子梗短小,单23、豆角炭疽病lindemuthianum胞,无色。分生孢子圆形或卵圆形,单胞,无色,两端较圆,或一端稍狭,孢子含12个近透明的油滴。分生孢子梗圆柱24、荔枝炭疽病Colletotrichum形,在分生孢子盘摆列成一层,顶生Gloeosporioides分生孢子。分生孢子无色,长椭圆形或新月形。16/2325、霸王花炭疽病26、玉米炭疽病27、玉米大斑病28、玉米小斑病基丝生于基质

25、,子实体黑色或淡色,蜡质,无包被,盘形。分生孢子梗从菌丝层或子座生出,常不分枝也不Colletotrichum分开,密集成栅栏opuntiae状,分生孢子常埋于胶质中,群集时使孢子成橙色等。分生孢子盘有刚毛,刚毛一般生于分生孢子分生孢子盘散生或聚生,黑色;刚毛暗褐色,具隔膜Colletotrichumgra37个,顶端浅褐minicola(Ces.)色,稍尖,基部稍Wilson膨大,;分生孢子梗圆柱形,单胞无色;分生孢子新月形,无色,单胞,。无性态分生孢子梭形,有时稍弯曲,中部最粗,两端渐细,基部细胞Exserohilum尖锥形,脐明显,Turcicum突出于基细胞之外,分生孢子驹4-7个隔膜

26、,分生孢子梗丝状,褐色,上部多呈膝状曲折,单生或2-6根丛生分生孢子梗膝状曲折,不分支,褐色,多数有5-11Bipolaris个隔膜,端部稍细Maydis且色淡,基部较粗,色深,分生孢子进梭形,中间较粗,向两端渐细,两端细胞钝圆,脐点平截17/23休眠孢子囊扁球29、玉米褐斑病Physoderma.maydis形,黄褐色,拥有囊盖,萌发时开释多个游动孢子。分生孢子梗黄褐色,无隔或有1-2Cercospora隔膜,直或略弯,30、花生褐斑病Arachidicola上部渐细,有明显节状曲折。分生孢子棍棒形,多具5-7个隔膜梗座生于表皮下,近球形或长条形,褐色至黑色,宽75-197m。分生Clado

27、sporium孢子梗极密切簇31、花生黑斑病personatatum生,青褐色至烟黑色,色彩均匀,宽度较规则,直立或稍曲,具曲膝状折点1-3个,不分枝,光滑,孢痕疤明显,厚而突出32、大豆细菌性斑Pseudomonas实验中细菌病原点病svrineae形态未做断定病菌不产生孢子。Rhizoctonia菌丝呈直角分支,33、玉米纹枯病在分支处有缢缩,solani距分支不远处有隔膜Tomato实验中未做病毒34、菜豆花叶病aspermyvirtus形态断定18/23Watermelonmosaic35、节瓜花叶病virus实验中未做病毒形态断定Cucumbermosaic36、香蕉花叶病virusstrain实验中未做病毒Banana形态断定37、香蕉束顶病38、茄子青枯病39、辣椒青枯病40、丝瓜青枯病41、黄瓜青枯病BananabunchytopvirusBBTVRalstoniasolanacearumRalstoniasolanacearumPericoniaspRalstoniaSolanacearum实验中未做病毒形态断定实验中细菌病原形态未做断定实验中细菌病原形态未做断定分生孢子梗浅褐色,直立,不分枝,具褐色子座实

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