抗生素类药物分析(8)讲稿

1、关于抗生素类药物的分析 (8)第一张，PPT共六十三页，创作于2022年6月主要内容氨基糖苷类抗生素四环素类抗生素概述-内酯胺类抗生素第二张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 1928年 弗莱明发現青霉菌抑制金黃葡萄球菌 1939年 佛罗瑞和芡恩从青霉菌分离青霉素 1945年 佛來明、佛罗瑞、芡恩获得诺贝尔医学奖一、概述第三张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 如今： 抗生素7000种 用于医疗300种 我国100种一、概述第四张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 抗生素（antibiotics): 指在低微浓度下即可对 某些生物的生命活动有 特异抑制作用的化学物质的总称一、

2、概述第五张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 抗生素类药物的特点: 化学纯度较低：同系物、异构体、降解物 活性组分易变异：菌株、发酵条件变化 稳定性差：活性基团往往是活性中心一、概述第六张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 抗生素的测定： 1、微生物检定法 抗生素对微生物的效应衡量效价 优点：1)与临床应用一致，医疗价值 2)灵敏度高、检品用量少 3)纯的、纯度差的 4)已知的、新发现的 5)测定总效价一、概述第七张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 缺点： 1）操作步骤繁多 2）测定时间长（1624h） 3）误差大（10%）一、概述第八张，PPT共六十三页，创作于2022年

3、6月 2、理化方法 特有的物理化学性质及其反应进行 优点：1）操作简单 2）省时 3）方法准确 4）一定的专属性一、概述第九张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 缺点：1）提纯的、化学结构明确的 2）测定结果是含量一、概述第十张，PPT共六十三页，创作于2022年6月二、-内酯胺类抗生素 6-氨基青霉烷酸 7-氨基头孢菌烷酸6-Aminopenicillanic Acid 7-Aminocephalosporanie acid6-APA 7-ACA甲环：-内酰胺环乙环：饱和的噻唑环 氢化噻嗪环第十一张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（一）性质 1、旋光性 2、溶解度 碱金属盐易溶

4、水 有机碱盐难溶于水，易溶于有机溶剂二、-内酯胺类抗生素第十二张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 3、吸收光谱特性 青霉素：母核无紫外吸收，侧链有 头孢菌素：母核260nm、侧链有 4、-内酰胺环不稳定性 干燥纯净的青霉素稳定，对热也稳定 水溶液不稳定，最不稳定-内酰胺环二、-内酯胺类抗生素第十三张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（1）酸性或碱性水解：pH58水溶液稳定，在酸性或碱性下，产生一系列降解产物。二、-内酯胺类抗生素第十四张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（2）与羟胺作用：生成羟肟酸衍生物，与Fe3+生成红色络合物。二、-内酯胺类抗生素第十五张，PPT共六十三

5、页，创作于2022年6月（二)鉴别 1、-内酰胺胺 （1）羟肟酸铁反应 （2）多伦或斐林试剂反应 （3）双缩脲和茚三酮反应 具有-CONH-结构和-氨基酸结构二、-内酯胺类抗生素第十六张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2、各种盐的鉴别 （1）钾、钠盐：火焰反应 （2）普鲁卡因青霉素：重氮化-偶合反应二、-内酯胺类抗生素第十七张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（三）含量测定 碘量法 酸碱滴定法 汞量法 吸收光谱法 HPLC法：除磺苄西林钠微生物法 其余均为本法二、-内酯胺类抗生素第十八张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 HPLC法 .头孢克洛 ODS柱 磷酸二氢钾溶液-

6、乙腈（92:8） 检测波长:254nm 按头孢克洛峰计理论塔板数1500 头孢克洛与头孢克洛-3异构体峰 分离度符合要求 外标法定量二、-内酯胺类抗生素第十九张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2.阿莫西林克拉维酸钾片 ODS柱 磷酸盐缓冲液-甲醇（95:5） 检测波长:220nm 阿莫西林与克拉维酸钾分离度3.5 外标法定量二、-内酯胺类抗生素第二十张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（一）结构与性质： 1、结构：链霉素（链霉素A) 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L-葡萄糖胺三、氨基糖苷类抗生素第二十一张，PPT共六十三页，创作于2022年6月巴龙霉素:三、氨基糖苷类抗生素立体异构

7、体：巴龙霉素I（R1=CH2NH2,R2=H） II(R1=H,R2=CH2NH2)药用为混合物，以I为主第二十二张，PPT共六十三页，创作于2022年6月庆大霉素三、氨基糖苷类抗生素绛红塘胺 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 第二十三张，PPT共六十三页，创作于2022年6月三、氨基糖苷类抗生素组分R1R2R3分子式C1CH3CH3HC21H43N5O7C2CH3HHC20H41N5O7C1aHHHC19H39N5O7C2aHHCH3C20H41N5O7第二十四张，PPT共六十三页，创作于2022年6月奈替米星： （庆大霉素C1a,绛红糖胺4，5位双键） 三、氨基糖苷类抗生素第二十五张，PPT共六十

8、三页，创作于2022年6月 2、性质 （1）碱性 链霉素：胍基（pka11.5） 甲氨基（pka7.7） 巴龙霉素：4个碱性中心 庆大霉素、奈替米星：5个碱性中心 （2）水溶性 矿酸或有机酸盐三、氨基糖苷类抗生素第二十六张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（3）稳定性 链霉素：最稳定pH57.5 pH8易水解 巴龙霉素：水解生成巴龙（霉）胺 （新霉素D)、巴龙二糖胺 庆大霉素、奈替米星：稳定 pH212煮沸30min不分解 庆大霉素：2mol/L NaOH回流2h 效价不变三、氨基糖苷类抗生素第二十七张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 （4）紫外吸收 链霉素：230nm 无紫外吸

9、收： 巴龙霉素 庆大霉素 奈替米星三、氨基糖苷类抗生素第二十八张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 （5）旋光性 硫酸链霉素：+83.20 硫酸巴龙霉素：+50+550 硫酸奈替米星：+88+960 硫酸庆大霉素：+107+1210三、氨基糖苷类抗生素第二十九张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（二）鉴别 1、麦芽酚反应（Maltol Reaction） 链霉素/OH-，H2O链霉糖 经分子重排成麦芽酚三、氨基糖苷类抗生素max 550nm 第三十张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2、坂口反应（Sakaguchi）三、氨基糖苷类抗生素加入尿素，稳定，max520nm第三十

10、一张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 3、茚三酮反应三、氨基糖苷类抗生素第三十二张，PPT共六十三页，创作于2022年6月4、N-甲基葡萄糖胺反应（Elson-Morgan反应）三、氨基糖苷类抗生素第三十三张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 5、Molisch试验 水解、脱水糠醛 -萘酚或蒽酮呈色 与-萘酚：三、氨基糖苷类抗生素第三十四张，PPT共六十三页，创作于2022年6月与蒽酮： 三、氨基糖苷类抗生素第三十五张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 5、硫酸盐的鉴别 6、TLC 中国药典、BP硫酸庆大霉素采用三、氨基糖苷类抗生素第三十六张，PPT共六十三页，创作于202

11、2年6月（三）检查 庆大霉素：C1、C2、C1a的混合物 毒性：C2C1C1a 有效血浓：410g/ml 12g/ml耳中毒，肾损害三、氨基糖苷类抗生素第三十七张，PPT共六十三页，创作于2022年6月Ch.P2005采用HPLC法 (1).色谱条件及系统适用性试验 柱填料：ODS 流动相：0.2mol/L 三氟醋酸-甲醇（92:8） 流速：0.6ml/min三、氨基糖苷类抗生素第三十八张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 出峰顺序：C1a、C2、小诺霉素、C2a、C1 分离度：小诺霉素和C2a峰分离度符合要求 小诺霉素连续进样RSD%0.99 本品用流动相配成2.5mg/ml，进样 用

12、回归方程计算各组分含量三、氨基糖苷类抗生素第四十张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 Cx为各组分的含量 C1 2550%；C1a 1540%；C2+C2a 2050% 检测器：蒸发光散射检测器三、氨基糖苷类抗生素第四十一张，PPT共六十三页，创作于2022年6月(一）化学结构与性质 四、四环素类抗生素第四十二张，PPT共六十三页，创作于2022年6月四、四环素类抗生素名称RRRR盐酸四环素HOHCH3H盐酸金霉素ClOHCH3H盐酸土霉素HOHCH3OH盐酸多西环素HHCH3OH盐酸美他环素H=CH2OH盐酸米诺环素(Ch.P新增)N(CH3)2HHH盐酸地美环素(BP)ClOHHH磺

13、基水杨酸甲氯环素(USP)Cl=CH2OH第四十三张，PPT共六十三页，创作于2022年6月1、母核上的官能团：（1）A环C4：二甲胺基（-N（CH3）2）（2）A环C2：酰氨基（-CONH2）（3）D环：酚羟基（C10）（4）两个酮基和烯醇基的共轭双键系统四、四环素类抗生素第四十四张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2、两性化合物 酸性：酚羟基、烯醇型羟基 碱性：二甲胺基 酸或碱性下均能成盐 采用盐酸盐四、四环素类抗生素第四十五张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 3、结晶水 四环素：6个结晶水 土霉素：2个结晶水 加热时，可失去，失去后有吸湿性四、四环素类抗生素第四十六张，P

14、PT共六十三页，创作于2022年6月 4、溶解度 pH4.57.2：难溶于水 pH8：易溶于水四、四环素类抗生素第四十七张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 5、不稳定性 对各种氧化剂都不稳定 碱性性更易氧化 干燥品较稳定，遇光可使颜色变深四、四环素类抗生素第四十八张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 6、旋光性 盐酸土霉素 -1880-2000 盐酸四环素 -2400-2580 盐酸多西环素 -1050-1200四、四环素类抗生素第四十九张，PPT共六十三页，创作于2022年6月（二）化学反应 1、差向异构化（差向四环素） pH2.06.0，A环C4构型改变四、四环素类抗生素第五

15、十张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 易差向化：四环素、金霉素 不易差向化：土霉素、多西霉素、美他环素 影响因素（1）pH2、pH9，不易差向 （2）高价酸根存在，易差向 （3）阴离子浓度增加，易差向四、四环素类抗生素第五十一张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2、酸性下降解（脱水四环素类） pH2，C环C6羟基与C5a上氢脱水四、四环素类抗生素 可脱水：四环素、金霉素、土霉素不可脱水：多西霉素、美他环素（C6无OH）第五十二张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 3、碱性下降解（异四环素） 碱性下，C环打开，生成内酯结构四、四环素类抗生素多西环素、美他环素：不反应，R不是

16、OH第五十三张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 4、与金属离子络合 锆、钍、铀、锌、铜、铝、镁、铈、钴 形成有色络合物四、四环素类抗生素第五十四张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 （三）鉴别 1与浓H2SO4反应 四环素深紫色 金霉素兰色、变为橄榄绿，加水成金黄 土霉素朱红色 多西霉素黄色 美他环素橙红色四、四环素类抗生素第五十五张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2FeCl3反应 四环素红棕色 金霉素深褐色 土霉素橙褐色 多西霉素褐色四、四环素类抗生素第五十六张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 3.TLC法 Ch.P(2005)、BP(2005)采用 4.HP

17、LC法 Ch.P(2005)、USP(30)采用四、四环素类抗生素第五十七张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 (四)杂质检查 1、有关物质 异构杂质、降解杂质 引起恶心、呕吐、糖尿 蛋白尿及酸中毒 Ch.P、USP、BP均采用HPLC法检查四、四环素类抗生素第五十八张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 2、杂质吸收度 脱水物、差向脱水物含量越高 吸收度越大 盐酸四环素：10mg/ml（0.8%NaOH溶液） 530nm于4cm比色池 自加0.8%NaOH起5min不得过0.12四、四环素类抗生素第五十九张，PPT共六十三页，创作于2022年6月 (五）含量测定 盐酸四环素 1、色谱条件 ODS柱 流动相：0.1mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2mol/L磷酸氢二铵溶液（68：27：5）用氨试液调pH8.3四、四环素类抗生素第六十张，PPT共六十三页，创作于2