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文档简介
1、 HP的检查南京医科大学第一附属医院消化内科 程文芳HP概述:幽门螺旋杆菌HP的检查方法1.微生物法2.血清学方法3.尿素酶依赖技术4.形态学方法5.基因诊断1.微生物学方法从胃窦黏膜取组织培养;要求有一定的厌氧要求和技术。通过菌落、形态、生化反应如尿素酶实验等来鉴定微生物学方法用于:1.细菌分型2.致病机制的研究3.构建动物模型,确定致病性4.评价新的诊断方法5.药物疗效6.体外筛选抗菌药物7.药敏实验、耐药的检测2.血清学方法HP菌体、各种细胞毒素(Vac-A,Cag-A)、尿素酶都可作为抗原在感染几周后刺激机体产生抗体,一旦产生可维持6个月以上。故血清抗体阳性不能确定病人有活动感染,阴性
2、不能排除初期的感染。2.血清学方法1)ELISA法:酶联免疫,较常用。2)凝集反应:乳胶或明胶凝集实验、血凝反应等3)免疫反应:放射免疫、荧光免疫等4)Westen-blot2.血清学方法临床应用:1.流行病学调查2.诊断3.检测毒力标志: Vac-A(+),Cag-A(+)2.血清学方法新的方法-粪便抗原检测技术:原理:HP抗原免疫家兔,获得兔抗HP血清-纯化-抗HP多克隆抗体-过氧化物酶标;粪便稀释+抗体-反应;酶标仪上测450和650nm吸光光度值。2000年以后才试行,未广泛推广。3.尿素酶依赖技术原理:HP有尿素酶将尿素-NH3+CO21)快速尿素酶实验2)C13、C14呼吸实验3)
3、15N-尿氨排泄实验1)快速尿素酶实验原理:各种试纸、试剂中有尿素、PH指示剂、缓冲剂、防腐剂。PH6.8(酸)-黄色 PH8.4(碱)-红或紫红色优点:费用低,速度快但假阴性高。用于HP的诊断,临床上最常用。2)C13、C14呼吸实验原理:尿素-NH3+CO2,将C13、C14标记尿素, C13O2、C14O2 -小肠吸收-血液循环-呼吸呼出。同位素质谱仪检测C13O2、C14O2 特点:无创,准确但费用高, C14有放射性。临床应用:诊断和复查。3)15N-尿氨排泄实验原理:尿素-NH3+CO2, N15标记尿素, N15H3从尿排除,同位素质谱仪检测N15H3。我国北京学者发明,价格贵,临床没推广。4.形态学方法组织病理染色的方法:HE染色、米兰染色、Giemsa染色 Genta染色临床上不常用。5.基因诊断原理:聚合酶链反应(PCR):以HP基因序列进行扩增。包括:16S核糖体RNA、尿嘧啶基因、 Cag-A等。临床应用:1)新鲜胃活检标本的快速诊断;2)抗生素敏感试验;3)分型特点:敏感性、特异性高但方法学要求高。五种常用方法一
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