血常规基础培训

1、SYSMEX血球销售培训(1) 内部资料，请勿外传 PAGE PAGE 45第一部分分 血液液学基础础一、血液液的功能能和组成成1血液液的功能能机体各组组织器官官营养成成分和代代谢产物物的载体体。人体所需需水分、氧及排排出二氧氧化碳的的载体。参与人体体免疫功功能，防防止疾病病侵袭。2血液液的组成成血血浆血清血小板板白细胞胞血饼红细胞胞 加加入抗凝凝剂，离离心，血液自自然凝固固 静静置300分钟后后的情况况血液由有有形成分分(血细胞胞等)和血浆浆组成。血清：血血液自然然凝固，除除去固体体部分(血饼)后所获获得的液液体部分分。血浆：血血液经抗抗凝处理理，在离离心作用用后获得得的清液液部分。除血清清

2、所含成成分外，还还包括蛋蛋白质、凝固因因子等成成分。血清血浆蛋白质质血液凝固因因子红细胞血饼有形成分分白细胞胞血小板其他有有形成分分3血液液细胞构构成红细胞胞血血液细胞胞白细胞胞血小板板 淋巴细细胞单核细胞胞白白细胞嗜中性性粒细胞胞粒细胞胞嗜酸性性粒细胞胞嗜碱性性粒细胞胞(1). 红细细胞：形态和功功能：788um0.8uum2.22um红细细胞模型型图扁圆状状结构，中中央凹陷陷，细胞胞内无核核、柔软软，可进进入比本本身直径更更小的毛毛细血管管，平均均直径778m。内含含血红蛋蛋白，富富含铁元元素，容容易氧化化。负责责将氧气气输送致致全身，并并将二氧氧化碳收收集至肺肺部排出出。红细胞的的成熟：

3、 红系 原红红细胞 早幼中幼晚幼网织成熟祖细胞 红红细胞 红细胞胞 红细胞胞 红细胞胞 红红细胞正常情情况下，红红细胞起起源于骨骨髓中红红系祖细细胞，后后者在促促红细胞胞生成素素的作用用下，分分化为原原红细胞胞，经数数次有丝丝分裂而而依次发发育为早早幼、中幼、晚幼红红细胞，后后者已丧丧失分裂裂能力通通过脱核核而成为为网织红红细胞进进入外周周血。由由网织红红细胞再再发育成成为完全全成熟的的红细胞胞。从早幼幼红细胞胞开始，已已能利用用铁蛋白白和原卟卟啉合成成血红素素，后者者再与珠珠蛋白肽肽链结合合而成为为血红蛋蛋白，幼幼红细胞胞越趋向向成熟，合合成的血血红蛋白白越多，直直到网织织红细胞胞阶段仍仍能

4、合成成少量血血红蛋白白。一般外外周血中中网织红红细胞的的含量不不超过11%，网网织红细细胞中仍仍残留有有RNAA，由此此可通过过流式细细胞检测测技术进进行检测测。网织织红细胞胞越成熟熟，DNNA含量量越低，由由此可计计算出网网织红细细胞成熟熟程度。(2). 白细细胞：白细胞的的分类：小型白白细胞(淋巴细细胞)二分分类大型白白细胞(其他白白细胞)小型白细细胞(淋巴细细胞)三分类中型白白细胞(单核细细胞、嗜嗜酸性、嗜碱性性粒细胞胞)大型白白细胞(嗜中性性粒细胞胞)淋巴细细胞单核细细胞五分分类嗜中性性粒细胞胞粒细胞胞嗜酸性性粒细胞胞嗜碱性性粒细胞胞形状和功功能：球状结构构，细胞胞内有核核，直径径71

5、15m。产生生人体免免疫机能，直接接攻击外外来细菌菌或产生生抗原抗抗体反应应。单单核细胞胞情报通通信 侦侦察T型淋巴巴细胞(细胞性性免疫)B型淋巴巴细胞(体液性性免疫)直接攻攻击产生病病源体包围抗体* 嗜酸酸性粒细细胞协助助产生抗抗体。(3). 血小小板：血液中中的有形形成分，体体积较小小，参与与凝血和和止血。4血液液检测的的意义和和检验学学科的分分类在生理情情况下，人人体内血血液各种种成分的的质和量量，反映映了机体体正常新新陈代谢谢和内外外环境的的平衡。在病理情情况下，血血液成分分质和量量的变化化，除了了反映造造血系统统的病变变以外，还还能直接接或间接接地提示示全身或或局部组组织器官官的病变

6、变。生物化学学和免疫疫学检验验：主要要检验血血浆中的的成分。血液学检检验：主主要检验验与临床床止血和和凝血相相关的各各种血小小板因子子、凝血血因子、血管因因子等项项目。血液一般般检验：主要检检验血液液中有形形成分的的质和量量。5血液液一般检检验的方方法传统方法法：以手手工操作作、普通通光学显显微镜、计数板板等简单单器材为为主要检检测手段段。现代方法法：以血血液自动动分析仪仪为主要要标志。随着细胞胞化学、组织化化学、位位相显微微镜、荧荧光显微微镜、电电子显微微镜、同同位素示示踪技术术、单克克隆抗体体等现代代技术的的运用，血血液学研研究不断断得到新新的发展展。到20世世纪900年代，综综合光学学、

7、电学学、细胞胞化学原原理的血血液分析析仪代表表了当今今血液一一般检验验技术的的发展趋趋势。血液一般般检验的的目的和和内容1血液液一般检检验的目目的以现代血血液学理理论为基基础，以以常用的的实验方方法为手手段，联联系临床床实际，为为临床疾疾病的初初步诊断断和疗效效观察提提供客观观依据。2血液液一般检检验的内内容对血液液中的有有形成分分和血液液细胞的的数量、质量和和外观形形态进行行检测。3血液液一般检检验的检检测项目目(1). 白细细胞检测测WBC(Whiite Bloood Celll ccounnt)：白细胞胞计数：单位体体积全血血白细胞胞数，(1003/L或109/L)。LYM%(Lyymp

8、hhocyytecconccenttrattionn)：淋巴细细胞占白白细胞百百分率(%)。LYM#(Lyymphhocyyte couunt)：淋巴细细胞计数数：单位位体积全全血淋巴巴细胞数数，(1003/L或109/L)。MONOO%(Moonoccytee coonceentrratiion)：单核细细胞(中间细细胞MIID)占占白细胞胞百分率率(%)。MONOO#(Moonoccytee coountt)：单核细细胞(中间细细胞MIID)计计数：单位体积积全血单单核细胞胞数，(1003/L或109/L)。GRANN%(Grranuuloccytee coonceentrratiion)

9、：粒细胞胞占白细细胞的百百分率(%)。GRANN#(Grranuuloccytee coountt)：粒细胞胞计数：单位体体积全血血粒细胞胞数，(1003/L或109/L)。NEU%(Neeutrrophhil conncenntraatioon)：嗜中性性粒细胞胞占白细细胞百分分率(%)。NEU#(Neeutrrophhil couunt)：嗜中性性粒细胞胞计数：单位体积积全血嗜嗜中粒细细胞数，(1003/L或109/L)。EOS%(Eoosinnophhil conncenntraatioon)：嗜酸性性粒细胞胞占白细细胞的百百分率(%)。EOS#(Eoosinnophhil couunt

10、)：嗜酸性性粒细胞胞计数：单位体积积全血嗜嗜酸粒细细胞数，(1003/L或109/L)。BASOO%(BBasoophiil cconccenttrattionn)：嗜碱性性粒细胞胞占白细细胞的百百分率(%)。BASOO#(Baasopphill coountt)：嗜碱性性粒细胞胞计数：单位体积积全血嗜嗜碱粒细细胞数，(1003/L或109/L)。(2). 红细细胞检测测RBC(Redd Blloodd Ceell couunt)：红细胞胞计数：单位体体积全血血红细胞胞数(1006/L或10122/L)。HGB(Hemmogllobiin cconccenttrattionn)：血红蛋蛋白：单

11、单位体积积全血血血红蛋白白浓度(g/LL)。HCT(Hemmatoocriit)或或PCVV(Paackeed CCelll Voolumme)：红细胞胞比积：全血红细细胞相对对容积比比(%)。MCV(Meaan CCorppuscculaar VVoluume)：红细胞胞平均容容积：全血单个个红细胞胞的平均均比积(fl：110-115升)。MCH(Meaan CCorppuscculaar HHemoogloobinn)：红细胞胞平均血血红蛋白白浓度：单个红细细胞平均均血红蛋蛋白含量量，(pg：110-112克)。MCHCC(Meean Corrpusscullar Hemmogllobii

12、n CConccenttrattionn)：平均红细细胞血红红蛋白浓浓度(gg/L)。RDW(Redd Blloodd Ceell Vollumee Diistrribuutioon WWidtth)：红细胞胞体积分分布宽度度。RDW-CV(RDWW-Cooeffficiientt off Vaariaatioon)：红细胞胞体积分分布宽度度变异系系数(%)。RDW-SD(RDWW-Sttanddardd Deeviaatioon)：红细胞胞体积分分布宽度度标准偏偏差(ffl)。HDW(Hemmogllobiin DDisttribbutiion Widdth)：红细胞胞血红蛋蛋白分布布宽度。

13、(3). 血小小板检测测PLT(Plaatelletccounnt)：血小板板计数：单位体体积全血血血小板板数，(1003/L或109/L)。MPV(Meaan PPlatteleet VVoluume)：平均血血小板体体积：全血血小小板平均均体积，(fl：110-115升)。PCT(Plaatelletoocriit)：血小板板压积：血小板板相对容容积(LL/L)或(%)。PDW(Plaatellet Vollumee Diistrribuutioon WWidtth)：血小板板体积分分布宽度度；PLCRR(Pllateelett Laargee Ceell Rattio)：大血血小板比比率

14、：体体积12ffl的血血小板比比率。(4). 网织织红细胞胞检测RET#(Reeticculoocytte ccounnt)：网织红红细胞计计数：单位体积积血液中中网织红红细胞的的数量，(1004/L或10100/L)；RET%(Reeticculoocytte cconccenttrattionn)：网织红红细胞百百分率：网织红细细胞占成成熟红细细胞的百百分率(%)；MRV或或MCVVR(MMeann Reeticculoocytte VVoluume)：网织红细细胞平均均体积；HFR%(Hiigh Fluuoreesceent Retticuuloccyteeconncenntraatio

15、on)：高荧光率率网织红红细胞占占网织红红细胞的的百分率率(%)；MFR%(Miiddlle FFluooresscennt RRetiicullocyytecconccenttrattionn)：中荧光率率网织红红细胞占占网织红红细胞的的百分率率(%)；LFR%(Loow FFluooresscennt RRetiicullocyyte conncenntraatioon)：低荧光率率网织红红细胞占占网织红红细胞的的百分率率(%)；RMI(Retticuuloccytee Maaturratiion Inddex)：网织红红细胞成成熟度指指数：高荧光率率网织红红细胞与与中荧光光率网织织红细胞

16、胞之和与与低荧光光强度网网织红细细胞的比比值(%)；RMI = (HFFR+MMFR) / LFRR1000%RPI(Retticuuloccytee Prrooffreaadinng IIndeex)：网织红红细胞成成熟校正正指数：RPI=RETT%(HCCT/00.455)1/1+(0.445-HHCT)RDWRR(Reeticculoocytte DDisttribbutiion Widdth)：网织红红细胞分分布宽度度；HCR(Retticuuloccytee Heemogglobbin Conncenntraatioon)：网织红红细胞血血红蛋白白浓度；MCHCCR(RRetiicu

17、llocyyte Meaan CCorppuscculaar HHemoogloobinn Coonceentrratiion)：网织红红细胞平平均血红红蛋白浓浓度；HDWRR(Reeticculoocytte HHemoogloobinn Diistrribuutioon WWidtth)：网织红红细胞血血红蛋白白分布宽宽度；MOXII(Meean Perroxiidasse IIndeex)：平均过过氧化物物酶活性性指数；LI(IIobuularrityy Inndexx)：分页核核指数。4血液液分析项项目参考考值及临临床意义义(1). 白细细胞检测测项目单位参考值值临床意意义WBC109

18、/L4.5111.00增加：生理性性：新生生儿、妊妊娠末期期、分娩娩期、 饭后等等。病理性性：大部部分化脓脓性细菌菌所引起起的炎症、尿毒毒症、严严重烧伤伤、传染染性单核细细胞增多多症、白白血病、急性出血血、组织织损伤等等。LYM% 200400增加：百日咳咳、传染染性单核核细胞增增多症、腮腺LYM#109/L1.554.0炎、结结核、传传染性肝肝炎等。减少：多见于于传染性性疾病的的急性期期、放射射病、细胞免疫疫缺陷等等。MONOO% 410增加：结核、伤寒、亚急性性心内膜膜炎、疟疟疾、MONOO#109/L0.220.8单核细细胞白血血病、急急性感染染恢复期期等。NEU% % 544622增加

19、：急性化化脓性感感染、粒粒细胞性性白血病病、急NEU#109/L 27性出血血、溶血血、手术术后、尿尿毒症、酸中毒、急性性汞和铅铅中毒等等。减少：伤寒、副伤寒寒、疟疾疾、流感感、化学学药物、X射线和和镭照射射、化疗疗、再生生障碍性性贫血、粒细胞胞缺乏症症等。EOS% % 13增加：变态反反应、寄寄生虫病病、某些些皮肤病病、手EOS#109/L000.455术后、烧伤等等。减少：伤寒、副伤寒寒、应用用肾上腺腺皮质激激素后等。BASOO% % 01增加：慢性粒粒细胞性性白血病病、嗜碱碱性粒细细胞白BASOO#109/L000.2血病、何杰金金病、癌癌转移、铅中毒毒等。(2). 红细细胞检测测项目单

20、位参考值值临床意意义RBC110122/L男性：4.335.8增加：生理性性：新生生儿、高高原居住住者。女性：33.85.33病理性性：真性性红细胞胞增多症症等。减少：各种贫贫血、白白血病、各种急急慢性失失血等。HGBg/LL男性：12661774 临临床意义义见红细细胞计数数。一般般情况下下血女性：11771661 红红蛋白浓浓度与红红细胞数数有一定定的比例例关 系，二二者对贫贫血诊断断有帮助助。HCTLL/L男性：0.33700.511增加：大面积积烧伤、体外循循环脱水水等。女性：00.3550.47减少：各类贫贫血时随随红细胞胞的减少少而有不不同程 度的的降低。MCV fl801000M

21、CH pg 277355 临床意意义见贫贫血形态态学分类类MCHCCg/LL31003770RDW-CV %11.6114.00 是是反映红红细胞大大小的客客观指标标，增加加RDW-SD fl39.0446.00 见见于缺铁铁性贫血血、营养养不良性性贫血。贫 血 的 形形 态 学 分分 类1Wiintrrobee分类法法分类依据据：MCCV、MCHH、MCHHC这三三个参数数是否正正常为依依据。类 型MCV(801000)MCH(2735)MCHCC(31003770)常 见见 疾疾 病病大细胞性性贫血1000353103700巨幼细胞胞贫血、非巨幼幼细胞性性大细胞胞贫血正常细胞胞性贫血血80

22、1100273353103700急性失血血性贫血血、溶血血性贫血血、症状状性贫血血、再生生障碍性性贫血单纯小细细胞性贫贫血80273103700亚急性或或慢性炎炎症小细胞低低色素贫贫血802750个个/小时时故障率因仪器自自身因素素发生堵堵孔(2%)，电路路部分，真真空系统统，管路路系统，机机械部分分等故障障率很低低，耐用用性强并并有自身身诊断功功能数据库病人样本本储存1100个个以上，最最好能进进行简单单的统计计处理，报报告打印印方式可可选择质控质控文件件应大于于5个，一一般采用用X-BB质控并并显示LLeveery-Jennninngs图图形检测参数数检测参数数在155个以上上，白细细胞三

23、分分类以上上并至少少能显示示、打印印WBCC、RBCC、PLTT等三种种以上的的直方图图抗干扰能能力抗干扰能能力强，环环境适应应能力强强售后服务务销售商有有较强的的营销、技术服服务、维维修能力力2用户户情况：大型医院院：高档次次、白细细胞五分分类的仪仪器较符符合这类类医院的的情况，(三级以以上)有的用用户甚至至要求仪仪器具有有网织红红细胞、巨幼细细胞等检检测功能。中型医院院：高质量量的白细细胞三分分类仪器器较符合合这类医医院的要要求。小型医院院：普及型型仪器可可以满足足这类医医院的需需要。对医院情情况的了了解还应应包括：医院的的床位数数、门诊诊量、现现有仪器器的情况况以及医医院的经经济能力力等

24、。七、血液液细胞分分析仪的的种类和和规格血液分分析仪种种类繁多多。根据据细胞计计数原理理大致可可分为：电阻抗法法；光散射法法；电阻抗+激光法法；电阻抗+射频法法；电阻抗+激光+射频+组织化化学法。根据白细细胞分类类可分为为：无白细胞胞分类；白细胞两两分类；白细胞三三分类；白细胞五五分类。在我国，有有不少医医院已经经使用了了相当先先进的仪仪器进行行血液一一般检测测。到目目前为止止，有各各种型号号、各种种档次共共二十多多个系列列的血液液分析仪仪正在临临床使用用之中。血液细胞胞分析仪仪的最新新应用一、 概概 述血液分析析仪从面面世至今今已经有有50年年的历史史了。在在我国，各各种型号号的血液液分析仪

25、仪广泛应应用于医医院检验验科之中中。血液液分析仪仪的功能能，主要要包括血血细胞计计数和分分类,网织红红细胞计计数等内内容。随随着现代代物理学学、化学学、生物物学及电电子技术术不断发发展并应应用于细细胞分析析，结合合计算机机技术、自动化化控制技技术，现现代血液液分析仪仪在性能能、准确确性及适适用性方方面均取取得了长长足的进进步。各各大血液液分析仪仪制造商商均投入入大量的的资金和和技术力力量,开发更更先进, 多功功能的血血液分析析仪，而而立足点点主要集集中在正正常标本本的准确确性、异异常标本本检出灵灵敏度以以及准确确定量、分析自自动化及及环保安安全、数数据处理理与联网网输出等等方面。血液分析析仪按

26、照照试剂添添加的方方法可分分为半自自动和全全自动两两种。而而实际工工作中，人人们更多多地是按按照白细细胞分类类将血液液分析仪仪分为不不分类、二分群群（大细细胞、小小细胞群群）、三三分群（大大、中、小细胞胞群）和和五分类类（淋巴巴、单核核、嗜中中性、嗜嗜酸性、嗜碱性性细胞）。一般来来说，不不分类和和二分群群仪器多多为半自自动，而而三分群群和五分分类仪器器则多为为全自动动。半自动二二分群全自动三三分群全自动五五分类幼稚、异异常标本本测定基本原理理物理原理理化学原理理化学原理理电阻抗电阻抗电阻抗激光散射射光射频（高高频波）特异性溶溶血酶/颗粒粒染色核酸染色色检测信号号细胞体积积细胞体积积细胞体积积细

27、胞体积积和内部部结构内部结构构排除干扰扰增强特异异性核酸DNNA/RRNA染染色测量项目目WBC 大小分分群WBC大大中小分分群WBC五五分类Eo/BBasooEo/55-diiff幼稚白细细胞RBCRBCRBCRETNRBCCPLTPLTPLT异常PLLT（PLTT凝集、巨大PPLT、细胞碎碎片）在50年年代初，美美国的WW.H.Couulteer先生生发明了了粒子计计数的专专利技术术，即根根据血细细胞的非非传导性性以对电电解质溶溶液中细细胞颗粒粒通过计计数小孔孔时所测测的电阻阻变化来来反应细细胞的大大小，被被称为电电阻抗原原理或库库尔特原原理。自自此，血血细胞计计数通过过该原理理的应用用而

28、实现现了自动动化，并并在此后后的几十十年间血血液分析析仪的均均以此作作为核心心检测原原理。时时至今天天，市场场上在供供应和使使用的所所有半自自动、全全自动三三分群血血液分析析仪检测测红细胞胞、血小小板、白白细胞分分群均按按照电阻阻抗原理理通过细细胞大小小来区分分并计数数。当然然，不同同仪器在在自动化化程度、参数、定量计计数、检检测速度度等方面面均有不不同以适适应不同同实验室室的实际际需求。除了半半自动和和全自动动之分以以外，不不分类仪仪器可提提供7-8项参参数，而而半自动动二分群群仪器可可提供115项参参数，全全自动三三分群仪仪器更可可提供118-119项参参数及WWBC、RBCC、PLLT三

29、个个直方图图和各种种报警信信息。在在分血定定量技术术上，一一般大型型、快速速的三分分群仪器器均采用用精确耐耐磨、取取中段血血的旋转转阀分血血，如SSYSMMEX K-445000、KXX-211N、AAbboott CD117000等；而而小型仪仪器多采采用小血血量的注注射器或或蠕动泵泵分血，如如Becckmaan CCoullterr AccT ddifff2、SSYSMMEX poccH-1100ii、ABBX MMICRROS660等。检测速速度方面面，适合合小标本本量实验验室的仪仪器，如如SYSSMEXX poocH-1000i、AAbboott CD112000每小时时检测约约25-

30、30个个标本，而而市场上上速度最最快的三三分群仪仪器SYYSMEEX KK-45500每每小时可可达800个标本本，且可可配置自自动进样样装置以以满足大大标本量量实验室室的需求求。此外外，为了了满足实实验室对对操作方方便性的的要求，国国产的迈迈瑞BCC-20000、日本SSYSMMEX的的poccH-1100ii、KXX-211N均可可以实现现全中文文操作，使使得操作作人员更更加方便便地操作作使用仪仪器。由于人体体白细胞胞一共55种，即即淋巴、单核、嗜中性性、嗜酸酸性、嗜嗜碱性，二二分群和和三分群群均是以以细胞大大小作为为区分的的标准。正常人人群情况况下，嗜嗜中性细细胞和淋淋巴细胞胞最多且且相

31、差较较大（其其它三种种相加也也不超过过10%），二二分群即即以此相相分。而而三分群群是通过过溶血素素的脱核核作用使使细胞体体积缩小小，由此此使单核核细胞体体积落在在淋巴和和嗜中性性细胞之之间，即即俗称的的“三分类类”。这种种以细胞胞大小区区分白细细胞的方方法并不不精确，嗜嗜酸性细细胞和嗜嗜碱性细细胞在大大细胞群群中不能能准确区区分。SSYSMMEX公公司的三三分群仪仪器通过过特殊的的溶血素素作用使使其相对对缩小而而分入中中间群细细胞中，比比起其他他仪器在在一定程程度上提提高了嗜嗜酸性、嗜碱性性细胞异异常时的的直方图图图形鉴鉴别灵敏敏程度，但但是还不不能根本本解决。而且，中中间群细细胞中往往往混

32、有有异型淋淋巴和幼幼稚粒细细胞，使使得实验验室必须须对报警警的标本本保持相相当高复复检率，否否则即可可能造成成漏诊。为了精确确定量地地检测白白细胞的的五种成成分，各各种五分分类血液液分析仪仪开始采采用不同同于三分分群仪器器的检测测原理以以探明除除了细胞胞体积大大小以外外的信息息，如形形态、内内容物含含量、密密度等，从从而能够够取得准准确的分分类结果果。这些些新的分分类原理理，主要要包括物物理学原原理、化化学原理理和细胞胞生物学学原理。在物理理学原理理中，除除了电阻阻抗原理理之外，用用的最多多的是光光散射技技术，以以及高频频波技术术（也有有称射频频波）。Becckmaan CCoullterr公

33、司通通过以上上各种物物理方法法的综合合运用来来检测白白细胞五五项分类类，称为为VCSSO技术术（Voolunne，CCondducttiviity，SScattterr, OOpaccityy）。而AAbboott公公司则除除了采用用电阻抗抗原理检检测白细细胞总数数以外，还还通过不不同角度度的散射射光技术术对五项项分类进进行检测测，称为为多角度度偏振光光散射分分类（MMAPSSS）技技术。而而SYSSMEXX公司在在采用电电阻抗原原理、射射频技术术、光散散射技术术以外，为为了提高高在白细细胞中比比例最小小的嗜碱碱性细胞胞的分类类准确性性，在白白细胞分分类检测测通道以以外还单单独设置置了嗜碱碱性

34、细胞胞检测通通道，通通过特异异性的化化学溶解解方法只只保留嗜嗜碱性细细胞，再再通过不不同角度度的光散散射法检检测。对对于另外外一种比比例很小小的嗜酸酸性细胞胞，还在在分类通通道中加加入细胞胞颗粒染染色以提提高光散散射信号号的辨识识能力。Bayyer公公司在五五分类仪仪器中，除除了光散散射法以以外，也也加入了了过氧化化物酶染染色技术术进行细细胞分类类，对于于嗜碱性性细胞也也设置了了单独的的检测通通道和特特殊溶解解技术。对于正常常五项分分类结果果准确性性，各大大血液分分析仪厂厂家关注注的焦点点主要是是数目最最少的嗜嗜酸性和和嗜碱性性细胞。此外，对对于外周周血中的的幼稚成成份，过过去还依依赖于显显微

35、镜镜镜检。然然而，一一般血液液分析仪仪对异常常标本报报警的灵灵敏度有有限，常常常造成成漏报。或者为为了减少少这种情情况而提提高阳性性报警率率（通过过降低仪仪器报警警的阈值值），提提高了复复片的比比例从而而造成假假阳性率率偏高，失失去了过过筛的意意义。甚甚至在实实际工作作中，由由于人手手不足或或责任心心不强，对对于一些些阳性报报警的标标本没有有认真复复片，或或限于经经验的不不足无法法准确进进行细胞胞形态学学的观察察造成漏漏诊。鉴鉴于以上上这些问问题，近近年来有有制造商商开始致致力于通通过化学学染色方方法对幼幼稚成份份的标本本进行自自动化检检测，这这相对于于一般的的阳性报报警（即即提供一一种可能能

36、性）要要进步了了很多。对于红红细胞系系统，各各大厂家家都有仪仪器进行行网织红红细胞检检测，提提供定量量的参数数甚而可可以对其其成熟度度作进一一步的分分类。但但是，网网织红检检测功能能也有半半自动和和全自动动之分，即即标本需需要手工工添加染染色试剂剂处理后后上机或或是直接接通过仪仪器染色色检测。对于更更幼稚的的红细胞胞系统，有有核红细细胞，目目前也有有仪器通通过核酸酸染色进进行检测测。如SSYSMMEX XE-21000,AAbboott CD440000。在白白细胞中中，幼稚稚成份根根据形态态学的不不同包括括原始细细胞、核核左移细细胞、幼幼稚粒细细胞、异异常/异异型淋巴巴等。SSYSMMEX

37、XE-21000通过过单独的的幼稚细细胞检测测通道并并采用特特异性的的化学溶溶解法保保留幼稚稚细胞，破破坏其他他细胞，再再通过射射频技术术、电阻阻抗原理理进行检检测，各各种幼稚稚白细胞胞的检测测灵敏度度大大提提高。而而在分类类通道中中，核酸酸荧光染染色的应应用使幼幼稚粒细细胞的定定量测定定成为现现实。BBayeer AADVIIA1220则通通过过氧氧化物酶酶染色技技术可以以区分出出大的未未染色细细胞（主主要为原原始、异异淋细胞胞）。尽管技术术的进步步使血液液分析仪仪检测的的参数越越来越多多，对异异常标本本的检测测、报警警能力也也越来越越强，但但是所有有制造商商仍然宣宣称仪器器在实验验室内起起

38、的是过过筛作用用，仪器器提供各各种报警警信息（FFlagg）供操操作人员员镜检复复核。能能否有效效检测包包括幼稚稚细胞在在内的所所有细胞胞，是今今后血液液分析仪仪的一个个发展方方向。血血液分析析仪发展展的另一一个趋势势是：面面对大型型实验室室和小型型实验室室的不同同需求来来发展。针对大大型医院院，仪器器的处理理速度可可超过1100个个标本/小时，配配备自动动进样装装置，且且可以实实现不同同检测模模式的标标本（如如CBCC、CBBC+DDIFFF、REET等）之之间仍选选进样，如如SYSSMEXX XEE-21100每每小时可可以处理理1500个标本本，Baayerr ADDVIAA1200每小

39、时时处理1120个个标本，BBeckkmann Cooultter LH7750每每小时处处理1005个标标本。这这些大型型的血液液分析仪仪，都可可以配置置自动推推片染色色装置以以实现玻玻片制备备和标本本染色的的全过程程自动化化。而试试验室网网络化管管理的发发展，也也要求这这些血液液分析仪仪具备数数据输出出联网的的功能，他他们的数数据操作作系统一一般均为为Winndoww NTT或20000平平台。反反之，针针对小型型医院血血液分析析自动化化的需求求，也有有小型化化的仪器器面世。ABXX PEENTRRA600是每小小时处理理60个个标本的的五分类类仪器，适适合于我我国县级级基层医医院的需需求

40、。SSYSMMEX新新推出的的poccH-1100ii三分类类仪器速速度约228个/小时，但但是具备备鞘流技技术、中中文显示示、数据据联网等等功能，可可以为基基层医院院或临床床科室床床边诊断断所有。综上所所述，随随着血液液分析仪仪的不断断发展，新新仪器不不断叠现现，实验验室工作作人员有有必要了了解掌握握血液分分析仪的的基本分分析技术术和原理理，提高高血液分分析仪在在临床试试验室诊诊断中的的应用水水平，更更好地为为临床第第一线服服务。二、仪器器的分析析技术血液分析析仪所能能检测到到的血液液学参数数，主要要为红细细胞、血血小板、白细胞胞、血红红蛋白，以以及通过过对红细细胞脉冲冲经计算算机计算算累计

41、而而得来的的红细胞胞压积，以以及由此此计算得得到的MMCV、MCHH、MCCHC。以上88个参数数，统称称全血细细胞计数数（Coomplletee Blloodd Coountt），或或简称CCBC。对于二二分群、三分群群仪器测测得的白白细胞参参数，再再有小细细胞、大大细胞的的数目和和百分比比，或小小、中、大细胞胞。而五五分类仪仪器则准准确定量量地提供供了白细细胞的五五项分类类参数，包包括数目目和百分分比，也也称DIIFF。此外，高高档血液液分析仪仪还可提提供一些些幼稚细细胞的参参数，如如网织红红细胞数数目、百百分比及及成熟度度分类；有核红红细胞数数目、百百分比；幼稚白白细胞的的一些定定量参数

42、数等。为为了去繁繁就简地地归纳出出各种血血液分析析仪采用用的分析析技术，本本章节为为红细胞胞/血小小板系、白细胞胞系、血血红蛋白白三部分分来阐述述。红细胞、血小板板系分析析技术电阻抗原原理电阻抗原原理是目目前血液液分析仪仪采用最最广泛的的一项分分析技术术，所有有的二分分群、三三分群仪仪器检测测RBCC、PLLT、WWBC都都是以此此为基础础，而大大部分五五分类仪仪器检测测RBCC、PLLT也是是如此。1、电阻阻抗原理理解释该方法将将细胞视视为一种种绝缘体体，将其其悬浮于于电解质质溶液中中，当其其通过检检测小孔孔时测得得其电阻阻的变化化。一般般电阻大大小与体体积大小小是呈正正比的，由由此便识识别

43、出血血小板和和红细胞胞。2、以电电阻抗原原理为基基础的改改良技术术电阻法作作为最为为普遍接接受的分分析方法法，应用用于血液液分析仪仪中。但但是，要要得到更更加精密密、准确确的红细细胞、血血小板信信息，仍仍有一个个问题需需要解决决，即细细胞重合合、回流流、偏心心通过带带来的误误差问题题。当稀释的的血细胞胞通过检检测小孔孔时，理理想的情情况是要要求各个个细胞能能够一个个一个地地经过小小孔正中中以测得得准确的的细胞个个数。但但实际上上往往有有两个以以上的细细胞同时时通过小小孔，这这种现象象即称为为重合。细胞浓浓度越大大，重合合的几率率越大，由由此带来来的计数数误差也也越大。为了修修正重合合误差，大大

44、多数血血液分析析仪对不不同浓度度的标本本进行检检测后绘绘出仪器器本身所所固有的的重合误误差曲线线并计算算出重合合校正公公式（或或称重叠叠校正），仪仪器的电电脑会对对检测结结果进行行校正。此外，血血细胞经经过检测测小孔后后，有时时也会产产生回流流，尤其其是当体体积较大大的红细细胞发生生回流时时，很容容易造成成对其后后通过小小孔的细细胞脉冲冲造成干干扰，这这种情况况尤其对对血小板板影响较较大。一一些制造造商的仪仪器中，在在红细胞胞计数小小孔内侧侧安装一一块带孔孔的挡板板，其孔孔径略大大于检测测孔径，位位于检测测孔后方方感应区区之外，检检测时细细胞通过过检测孔孔后穿过过挡板小小孔，回回流的影影响即被

45、被挡在挡挡板之外外。这种种装置成成为Voon BBeheens装装置。该该方法效效果较好好，但是是增加了了检测结结构的复复杂程度度并使排排堵和维维护保养养难度增增加。另另外一种种技术称称为扫流流技术（SSweeep FFloww），应应用于BBeckkmann Cooultter的的血液分分析仪上上。扫流流技术是是在红细细胞计数数小孔后后面加载载一股稳稳定的液液流，使使得红细细胞在通通过小孔孔后迅速速被冲走走，从而而防止其其回流到到感应区区产生干干扰脉冲冲。对于上述述重合、回流、偏心产产生的误误差，一一种比较较全面的的解决方方法是鞘鞘流技术术（也有有称液路路聚焦、水动力力聚焦）。该原理理是将细

46、细胞流用用鞘状的的不含细细胞的鞘鞘流液包包裹起来来，使其其在这种种状态下下通过检检测孔，从从根本上上防止了了重合误误差和回回流、偏偏心通过过的发生生。早在在19668年，柏柏林自由由大学的的Thoom等人人利用此此物理原原理发明明了鞘流流法。但但由于这这种方法法要求复复杂精密密的流体体回路设设计，直直到19980年年才由SSYSMMEX公公司（当当时的名名称为TTOA）实实现鞘流流方法的的自动化化并应用用到血液液分析仪仪。鞘流流方法除除了能够够避免上上述误差差发生以以外，鞘鞘流结构构本身也也使检测测部件的的保养变变得方便便，而且且大幅度度提高了了直方图图的分辨辨率，不不论是红红细胞和和血小板板

47、之间的的鉴别，还还是红细细胞本身身大小的的变化，都都显示得得更加清清晰。二维光散散射原理理随着激光光技术的的出现，有有仪器开开始采用用新的检检测技术术分析红红细胞和和血小板板。通常常在光学学测定前前，首先先用低渗渗透溶液液对红细细胞、血血小板进进行球状状化的处处理。由由于细胞胞内渗透透压高于于试剂的的渗透压压，液体体透过细细胞膜进进入其内内部，从从而使红红细胞由由原来的的双凹圆圆盘状充充盈为球球状，然然后通过过戊二醛醛固定。通过球球形化的的处理，细细胞经过过检测区区时不论论何方向向其光散散射的信信号都是是相同的的。光学系统统的光源源过去一一般采用用气体激激光。如如Tecchniiconn H3

48、3采用波波长6332.88nm的的红色氦氦氖激光光,Abbbottt CCD37700采采用氩离离子激光光。900年代，半半导体激激光作为为一种固固体光源源开始应应用于血血液分析析中，其其在工作作寿命、适应范范围、环环保节能能等方面面均较气气体光源源有较大大进步，如如SYSSMEXX XEE/XTT系列、Bayyer ADVVIA1120等等。以Bayyer的的五分类类仪器为为例，当当血细胞胞经过检检测区时时，光学学信号感感应器接接受低角角度（22-3度度）和高高角度（55-155度）的的前向散散射光信信号。根根据前向向角转换换能量大大小，可可以测量量出细胞胞体积和和总数，并并由此绘绘制红细细

49、胞和血血小板的的直方图图；而根根据激光光束散射射角，得得到单个个红细胞胞血红蛋蛋白浓度度并反映映血红蛋蛋白浓度度的变化化情况,得出MMCV、MCHH、MCCHC值值。核酸染色色技术通过光学学技术，可可以在一一定程度度上改善善电阻抗抗原理仅仅仅判断断细胞体体积所带带来的局局限性，提提高了红红细胞和和血小板板的准确确性。而而现代生生物染色色技术的的发展，使使更加特特异性的的核酸染染色法与与光学技技术结合合成为可可能。SSYSMMEX R-335000网织红红细胞分分析仪采采用氩离离子激光光和Auuramminee O（碱性槐槐黄O）核核酸染料料，氩离离子激光光束照射射在经过过染色的的细胞上上，激发

50、发出荧光光信号和和前向散散射光，分分别反映映细胞内内部核酸酸多少和和外部体体积大小小。由此此绘制的的散射图图上，可可以清晰晰的分辨辨出光学学红细胞胞、网织织红细胞胞、血小小板的区区域。在SYSSMEXX XEE-21100血血液分析析仪上，检检测血小小板的方方法增添添到两种种。仪器器的红细细胞和血血小板检检测通道道采用鞘鞘流电阻阻原理，常常规标本本即以此此为检测测手段。当一些些特殊标标本混有有大型血血小板或或小球性性红细胞胞时，二二者之中中会有一一部分具具有相同同的体积积使电阻阻法无法法准确区区分，仪仪器还可可以使用用光学染染色法检检测。此此时采用用的光源源为6333nmm波长的的半导体体激光

51、束束，染料料为Pllymeethiine和和Oxaazinne。血血小板由由于体积积较小，但但颗粒中中存在有有少量RRNA，被被染料轻轻微着色色而激发发出荧光光，此时时得到的的血小板板结果更更加可信信。网织红细细胞、有有核红细细胞分析析网织红细细胞是晚晚幼红细细胞脱核核后与成成熟红细细胞之间间的过渡渡细胞，是是反映骨骨髓造血血功能的的重要指指标。目目前用自自动分析析仪进行行网织红红细胞分分析的技技术已经经取得很很大进展展。（1）半半自动网网织红分分析由于五分分类血液液分析仪仪的发展展，有制制造商开开始尝试试采用其其白细胞胞五分类类技术来来分析网网织红细细胞。如如Becckmaan CCoull

52、terr STTKS、HmXX，Abbbottt CCD37700、35000R等等。以库库尔特方方法为例例，首先先使用一一种漂洗洗液使红红细胞中中的血红红蛋白溢溢出成为为“影细胞胞”减少对对检测的的干扰，然然后再加加入新亚亚甲兰染染料对网网织红内内的RNNA进行行染色。经过预预处理后后的标本本通过仪仪器VCCS（后后文详述述）原理理进行检检测。由由此法得得到的网网织红参参数准确确性较目目视法有有了很大大的进步步，但仍仍然存在在着手工工误差因因素，且且费时较较长。（2）全全自动网网织红分分析在20世世纪800年代初初，SYYSMEEX公司司便开发发出了专专用的激激光流式式原理检检测网织织红的仪

53、仪器，自自第一代代R-110000至近已已经发展展到大型型R-335000、小型型R-5500等等系列化化的仪器器。90年代代，随着着五分类类仪器技技术日臻臻发展，出出现了内内置式的的全自动动网织红红检测功功能。一一般均采采用激光光流式原原理和细细胞化学学染色，如如SYSSMEXX XEE-21100、XT-20000、BBeckkmann Cooultter Genns、BBayeer AADVIIA1220、AAbboott CD440000等，并并可以实实现不同同标本检检测CBBC、DDIFFF、REET检测测模式。另外一一个突破破是，除除了进行行自动的的RETT数目和和百分比比计数外外

54、，还可可以通过过核酸染染色得到到的荧光光信号强强度区分分低、中中、高荧荧光强度度的网织织红（LLFR、MFRR、HFFR）。由于幼幼稚的网网织红荧荧光信号号较强，MMFR和和HFRR之和即即反映未未成熟网网织红的的一个有有用参数数。此外外，还有有仪器可可以提供供网织红红平均体体积（MMCVrr）、网网织体积积分布宽宽度（RRDWrr）、网网织血红红蛋白分分布宽度度（HDDWr）等等参数给给临床治治疗监测测提供参参考。（3）全全自动有有核红细细胞分析析有核红细细胞作为为幼稚的的红细胞胞在治疗疗监测和和鉴别诊诊断时有有重要临临床意义义。而且且，有核核红细胞胞体积与与淋巴细细胞相仿仿或略小小，大多多

55、数仪器器对这样样的标本本往往会会误计，这这样不但但漏报了了病理标标本，而而且造成成白细胞胞（淋巴巴细胞）结结果假性性升高。随着五五分类仪仪器的出出现，仪仪器报警警系统开开始可以以提示其其存在的的可能性性，供操操作人员员镜检复复核。真正采用用染色手手段来自自动化地地定量检检测有核核红细胞胞的功能能，出现现在SYYSMEEX XXE-221000和Abbbottt CCD40000上上。以SSYSMMEX XE-21000为例例，仪器器单独设设置检测测有核红红细胞的的通道，特特殊的溶溶血素将将红细胞胞完全破破坏，有有核红细细胞被裸裸核并收收缩，而而白细胞胞被保留留。核酸酸荧光染染色Poolymme

56、thhinee对标本本染色后后，白细细胞细胞胞核和胞胞质内核核酸的染染色总量量远大于于同样被被染色但但被收缩缩的有核核红细胞胞，通过过半导体体激光照照射后荧荧光信号号和前向向散射光光信号均均有区别别。由此此准确计计得有核核红细胞胞数目及及占白细细胞的比比例。白细胞系系分析技技术白细胞二二分群、三分群群分析在白细胞胞二分群群、三分分群仪器器中，电电阻抗原原理作为为基本技技术将白白细胞按按照体积积大小分分群。电电阻抗原原理与检检测红细细胞血小小板时基基本相同同，只是是在检测测白细胞胞时，需需要加入入特殊的的溶血素素破坏红红细胞，以以消除其其对白细细胞的干干扰。仪器在提提供白细细胞分群群的结果果外，

57、还还自动绘绘制成白白细胞体体积分布布的图形形，称为为直方图图。直方方图通过过感应区区检测到到的每个个细胞的的脉冲累累计得到到，并根根据其脉脉冲大小小所对应应的体积积大小被被分类储储存到相相应的体体积通道道上。白细胞五五分类分分析由于电阻阻抗原理理的局限限性，二二分群、三分群群仪器都都无法准准确地检检测出淋淋巴、单单核、嗜嗜酸性、嗜碱性性、嗜中中性细胞胞。为了了能够从从细胞体体积大小小到内部部结构全全面分析析细胞并并得到准准确的白白细胞分分类结果果，各大大厂家自自80年年代开始始采用各各项技术术联合应应用于血血液细胞胞的分析析，各种种型号的的五分类类仪器相相继问世世。总的的来说，白白细胞五五分类

58、技技术可以以归纳为为物理原原理（电电阻抗、散射光光、高频频波/射射频等）、化学原原理（特特异性溶溶血、普普通颗粒粒染色、酶染色色、核酸酸染色）。各制造造商一般般均采用用上述所所列的数数种技术术综合应应用于五五分类分分析。(1)容容量、电电导、光光散射（VVCS）技术Beckkmann Cooultter公公司（当当时的CCoullterr公司）于于19887年开开始将VVCS技技术应用用于五分分类仪器器，并在在此后一一直以此此为核心心技术沿沿用至今今，如目目前在实实验室被被使用有有STKKS、MMAXMM、HmmX等。V（VVoluume）代代表体积积，即电电阻抗原原理检测测细胞体体积大小小。

59、C（CCondducttiviity）代代表电导导率，即即高频波波穿透过过细胞时时的传导导性，检检测细胞胞内部结结构如细细胞核与与细胞浆浆的比例例。S（SScattterr）代表表散射光光，即气气体激光光（氦氖氖）的光光束在感感应区扫扫描每一一个细胞胞由此得得到的细细胞光散散射特性性，检测测细胞内内部结构构如核分分叶情况况、核的的形态等等。此类类仪器在在一个白白细胞检检测通道道上采用用三种物物理方法法分析细细胞，得得到的三三方面信信号综合合成三维维图像分分析。由由于两种种细胞之之间极少少会在三三方面信信号均完完全相同同，VCCS技术术便做到到了对白白细胞的的准确分分类。在Becckmaan C

60、Coullterr最新型型号的GGens上，VVCS技技术又在在原有的的基础上上增加了了一个信信号，即即经过校校正的传传导性OOpaccityy（不透透明性），反反映细胞胞内部核核的大小小、核和和浆的密密度及核核/浆比比。该信信号不易易被细胞胞体积所所干扰，可可以更加加准确地地区分出出异型淋淋巴和正正常淋巴巴。(2)多多角度偏偏振光散散射白细细胞分类类技术（MMAPSSS）Abboott公公司在检检测五分分类时，也也多采用用物理学学的原理理。与CCoullterr公司不不同的是是，在AAbboott CD337000和CDD32000五分分类仪器器上，气气体激光光（氩离离子）激激发出的的光束照