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文档简介
1、第十一章高效毛细管电泳分析法一、离子分析analysis of ion二、药物分析analysis of pharmaceutics三、手性化合物分析analysis of chiral compounds四、氨基酸分析analysis of amino acids五、核酸分析及DNA测序analysis of nucleic acids and sequence of DNA六、新进展及热点问题advances and special topics第五节高效毛细管电泳应用与进展high performance capillary electrophoresis,HPCEapplication
2、 and advances of HPCE2022/9/9一、离子分析 analysis of ion阳离子分析 迁移方向和电渗流方向一致; 4.5min内分离了24种金属离子; 阳极进样,阴极检测; 具有很高的灵敏度;2022/9/9阴离子分析 阴离子电泳方向和电渗流方向相反、速度接近,分析时间长、效率低; 质量小、电荷密度大的离子如:SO4-2、Cl-、F-等,电泳速率大于电渗流,阳极端流出,在阴极端无法检测; 加入电渗流改性剂,十六烷基三甲基溴化胺等,使电泳方向和电渗流方向一致,可在3.1min内分离36种阴离子;阴极进样,阳极检测;离子价态及存在形态分析;2022/9/9二、药物分析
3、analysis of pharmaceutics 检测体液或细胞中某些代谢产物的分析; 尿液中的氨基酸含量作为临床诊断糖尿病的辅助手段; 采用毛细管区带电泳方式,在11min内分离17种药物;2022/9/9采用MEKC模式,鉴定违禁药物;效果优于HPLG法2022/9/9三、手性化合物分析 analysis of chiral compounds 合成获得单一手性化合物相当困难;528种手性合成药物,61中以单一对映体形式销售,其他为外消旋体;检测分析也相当困难;研究热点;R-反应停是安眠药,S-式致胎儿畸形; HPCE分离分析手性化合物的方法:加入手性选择剂;形成配合物的稳定常数有差异,
4、结合HPCE的高效率; 常用手性选择剂:环糊精及其衍生物;手性冠醚;手性表面活性剂(氨基酸衍生物、胆酸钠、牛磺脱氧胆酸及其钠盐、低聚糖等天然手性表面活性剂)2022/9/9四、氨基酸与蛋白质分析 analysis of amino acids采用MEKC模式,在25分钟内分离了23种丹酰化氨基酸;HPCE可取代传统的氨基酸分析仪;问题:吸附和检测;2022/9/9蛋白质分析2022/9/9五、核酸分析及DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA重要分析手段;图,酶解的双螺旋DNA限制性片段的分离;2022/9/9六、新进展advanc
5、es and special topics1.微型化 整体化学分析系统(TAS)及TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作为毛细管,理论塔板数105/m;2.联用仪器 CE-MS;3.阵列毛细管凝胶电泳 应用于人类基因DNA测序; 510万个基因,30亿个碱基对,目前最有效的DNA序列分析仪,10小时/次;可同时电泳24个样品;速度1200碱基对/小时,提高速度!100支毛细管阵列电泳;速度280碱基对/小时/支2022/9/9请选择内容第一节 概述generalization第二节 高效毛细管电泳的理论基础basic theory of HPCE第三节 高效毛细管电泳仪器high performance capillary electrophoresis apparatus第四节 高效毛细
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