分子学-版跟另一份仅供参考

1、一、：1：也称为遗传因子。是指携带有遗传信息的 DNA 序列，是控制性状的基本遗位。2：表达：细胞在生命过程中，把在 DNA 顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。3：表达调控：从 DNA 到蛋白质的过程叫表达，对这个过程的调节即为表达调控4：顺式作用元件：参与 RNA 识别结合，转录的启动和速率调节的繁多，这些调节转录的 DN段统称为顺式作用元件5：反式作用因子：凡直接或间接与顺式元件相互作用并影响表达的蛋白质统称为反式作用因子6、启动子：位于编码区上游并为 RNA 聚合酶（RNAP）识别、结合和启动子转录的 DNA 序列。7、终止子：编码区下游能促使 RNAP 识别

2、并终止 RNA的 DNA 序列8：子：指启动、和一系列紧密连锁的结构的总称。9、增强子：能加强其上游或下游转录的 DNA 序列10、子：真核组内能限定独立转录活性结构域的 DNA 元件11、沉默子：与增强子作用相反，能抑制上游或下游转录的 DNA 序列12、细胞信号转导：细胞对环境信号的应答，启动胞内信号转导通路，最终调节表达和代谢生理反应13、第一信使：细胞间通讯的信号分子主要有激素、神经递质、生长因子和细胞因子等，这些都是细胞的化学信号分子14、第二信使：主要分布于胞浆内的信号分子有环腺苷酸（C ）、换鸟甘酸（CGMP）、钙离子（CA+）、肌醇三磷酸（IP3）和二酰甘油（DG）等，这些胞内

3、信号分子相对应其第一信使而言。15、受体：受体是细胞膜或细胞内的一些天然分子，能够识别和结合有生物活性的化学信号物质，从而启动一系列信号转导，最后产生相应的生物学效应16、组：指细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质的总和，包括所有的和间区域。17：组学：指对所有进行作图（包括遗传图谱，物理图谱，转录图谱），核苷酸序列分析，定位和功能分析的一门科学18：人类组计划：是描述人类组合其他模式生物体组特征，在整体上破译遗传信息，发展组新技术，并阐明与此相关的，法律和社会影响的一个国家性研项目。20：cDNA 文库：以 mRNAwie 模板，利用逆转录酶互补的 DNA，在成双链 cDN段，与适当载体连

4、接后转入受菌体，既获得 cDNA 文库21：组文库：指含有一个机体组 DNA 的整套重组 DNA 分子，是由组 DN段克隆载体获得的分子克隆之总和22：必需：一些在突变时会引起致死表型，这些被称为必需。23：断裂：真核细白质编码大多数为断裂，其原始转录体需剪接才能成为连续编码的成熟 mRNA24：重复序列:指相同或近似的多拷贝 DN段26：后组学：应包括功能学，转录组学，蛋白质组学，比较组学，糖组学，代谢组学等你科学领域27：转录组学：指一种生物 生命体的细胞或组织所表达的组表达的全部转录产物（mRNA）的总称，包括某一环境条件，某一生命阶段，某一生理或病理（功能）状态下，种类和水平28：蛋白

5、质组学：是在组学的基础上，从整体水平研究细胞内蛋白质的组成，功能及其活动规律的科学，是建立在 cDNA 阵列 mRNA 表达谱的功能分析，础上的科学组范围的酵母双（三）交杂，蛋白质与蛋白质相互作用分析到蛋白质表达，和结构分析等诸多不同试验方法相互融合基29：代谢组学：是一门对某一生物或细胞所有低相对分子质量代谢产物进行定性和定量分析，以监测活细胞中化学变化的科学30：糖组学：是对糖链 组成及其研究的一门新学科，是的联系和相互作用组学的后续和延伸。具体内容包括研究糖与糖之间，糖与蛋白质之间，糖与合算之间31：免疫组学：研究免疫相关的分子，它们的作用靶分子及其功能产生和去除酶切位点）和 一段 DN

6、A 的重新组织（如和缺失造成酶切位点间的长度发生变化）等均可导致 RFLP 的产生。25：限制性片段长度多态性：检测 DNA 在限制性内切酶酶切后形成的特定 DN段的大小。因此凡是可以引起酶切位点变异的突变如点突变（新19：人类组多态性：人类组是一个十分稳定的体系，不同的民族、群体和都有 46 条，有相同数目的和分布，也有基本相同的核苷酸序列。正是组结构的这种稳定性保证了人类作为一个物种的共同性和稳定性，也决定了目前组测定是有意义的，即有代表性的。32：PCR：是利用 DNA 变性和复性原理在体行特定 DN段高效扩增的化学反应。33：RT-PCR：是一种将 RNA 逆转录cDNA 与 PCR

7、技术结合起来分析表达的一种快速灵敏的方法34：巢式 PCR：由于引物设计围绕待扩增片段由远及近，进行多次扩增。35：多重 PCR：一般 PCR 仅应用一对引物，通过 PCR 扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重 PCR，又称多重引物 PCR 或复合 PCR36：原位 PCR：是保持细胞或组织的完整性，使 PCR 反应体系渗透到组织和细胞中，在细胞的靶 DNA 所在的位置上进行检测靶 DNA，而且还可以进行靶序列的细胞定位或组织定位，更有利于探讨靶 DNA 与细胞之间的关系。扩增，不但可以特异性37：定量 PCR：引入荧光标记分子，通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光

8、信号的实时检测，计算 PCR 产物量，从而实现对起始模板的定量分析。38：分子杂交：利用不同来源但互补配对的核酸单链之间（包括 DNA/RNA,DNA-RNA 和 RNA-RNA）能够特异性的结合形成杂合双链的特性，从而对目的核酸分子进行定性和定量分析的技术39：印迹技术：是将核酸或蛋白质等生物大分子通过一定方式转移并固定到支持膜上以便于进一步分析的方法。40：原位杂交：在细胞水平直接进行杂交，直接将探针与细胞或者组织切片或样品进行杂交。41：生物：是以微电子系统技术和生物技术为依托，在固相基质表面构建微型生物化学分析系统，将生命科学研究中的许多不连续过程在一块普通邮票大小的上集成化，连续化，

9、微型化，以实现对细白质，核酸及其他生物大分子的准确，快速，高通量检测42、：固定有寡核苷酸快速定性或定量分析组 DNA 或 cDNA 等生物，利用这类与标记的生物样品进行杂交，可对样品的表达谱生物信息进行43、蛋白质：包埋在固相载体上的高密度蛋白质微阵列，在一定条件下进行生化反应，将反应结果用化学荧光法、酶标法、电化学法显示，然后用生物扫描仪或电子信号检测仪数据，最后通过专门的计算机进行数据分析44：蛋白质免疫共沉淀：用抗体将相应特定分子沉淀的同时，与该分子特异性结合的其他分子也会被带着一起沉淀出来的技术。这种技术常用于验证蛋白质之间相互特异性结合。45：酵母双杂交技术：酵母双杂交系统由 Fi

10、elds 和 Song 等首先在研究真核转录调控中建立 i 。典型的真核生长转录因子， 如 GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA 结合结构域(DNA-binding)和转录激活结构域(transcription-activating)。前者可识别DNA 上的特异序列， 并使转录激活结构域定位于所调节的的转录。的上游， 转录激活结构域可同转录复合体的其他成分作用， 启动它所调节的46：反义寡核甘酸技术：人工的，与靶或 mRNA 某一区段互补的核酸片断，可以通过碱基互补原则结合于靶/mRNA 上,从而封闭的表达。47：RNA 干扰：生物体内一些小的 dsRNA 分子能够高效的，特

11、异性地诱导同源的 mRNA 降解，从而关闭扰表达或使其沉默，这个过程称为 RNA 干48：干扰小 RNA：在 Dicer 酶的作用下，双链 RNA 被裂解成 21-23 个核苷酸的小分子片断。49：转技术：转技术是指利用分子生物学技术，将某些生物的转移到其它物种中，改造生物的遗传物质，使遗传物质得到改造的生物在性状、营养和消费品质等方面向人类需要的目标转变。转技术在农业生产、动物饲养和研究等诸多领域有着广泛的应用前景。50：靶向技术：是一种利用同源重组方法改变生物体某一内源的遗传学技术。51：分子克隆：狭义的改变生物的遗传特性工程仅指用体外重组 DNA 技术去获得新的重组；广义的工程则指按人们

12、意愿设计，通过改造或组而52：工程：狭义的工程仅指用体外重组 DNA 技术去获得新的重组；广义的工程则指按人们意愿设计，通过改造或组而改变生物的遗传特性53：DNA 重组技术：重组 DNA 技术又称遗传工程，在体外重新组合脱氧核糖核酸（DNA）分子，并使它们在适当的细胞中增殖的遗传操作。54、限制性核酸内切酶：一类能够识别双链 DNA 分子的特异序列，并在识别位点或其周围产生切割作用的核酸水解酶55：粘性末端：当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断 DNA 时，就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段，即 5突出。这些片断可以通过的 5末端形成的氢键相连，或者通过分子内反应环化。因此称这

13、些片段具有粘性，叫做粘性末端56：平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的 DNA 两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。57：克隆：克隆通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的的无性生殖方式58：克隆载体：通常采用从、质粒或高等生物细胞中获取的 DNA 作为克隆载体，在载体上合适大小的外源 DN段，并注意不能破坏载体的自我性质。59：表达载体：就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RBS、终止子等），是目的能够表达的载体。60：多克隆位点：DNA 载体序列上人工的一段序列，含有多个限制内切酶识别位点。能为外源 DNA 提供多种可的位置或方案。61：质粒：

14、质粒是一类存在于细菌细胞中独立与DNA 而的双链环状结构 DNA 分子，小的为 2-3kb，大的可达数百 kb。62：转导：是由噬菌体将一个细胞的传递给另一细胞的过程。63：转化：是某一型的细胞从周围介质中吸收来自另一型的细胞的 DNA 而使它的型和表型发生相应变化的现象。64：感受态细胞：在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的 mob,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源 DNA。65：治疗：是以转移为基础，将某种遗传物质导入患者细胞

15、内，使其在体内表达并发挥作用，从而达到治疗疾病目的的法。66、：利用分子生物学和分子遗传学的技术，从 DNA/RNA 水平检测分析的存在和结构、变异和表达状态，从而对疾病做出的方法67 载体：指在工程重组 DNA 技术中将 DN段（目的）转移至受体细胞的一种能自我的 DNA 分子。二：简答题：1、 PCR 的原理及体系的答：原理：PCR 由变形退火延伸 单个步骤：板 DNA 的变性：模板 DNA 经加热至 95左右一定时间后，使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成双链 DNA 解离，使之成为单链，以便它与引物结合为下轮反应作准备模板 DNA 与引物退火：模板 DNA 经加热变性成单链后，温

16、度降至 55左右引物与模板 DNA 单链的互补序列配对结合引物的延伸:DNA 模板引物结合物在 TaqDNA 聚合酶的作用下，以 dNTP 为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，一条新的与模板 DNA 链互补的半保留重复循环变性退火延伸三个过程，就可获得的”半保留链”而且这一种新链又可成为下次循环的模板PCR 体系：DNA 模板，引物，TaqDNA 聚合酶，相应的缓冲体系2、生物的主要分类及其应用答： 分类：和 蛋白质应用：不仅可以对大量的生物样品进行平行、快速、敏感、高效的分析，如大规模筛查由突变所引起的疾病，及性疾病，而且在 DNA 序列分析、等方面得广泛应用表达分析，组分

17、析和后组研究，以及高通量药物筛选，新药发现蛋白质：作为一种新的高通量、平行、自动化、微型化的蛋白质表达，结构和功能分析技术，是蛋白质组学研究的重要之一。广泛应用于蛋白质表达谱蛋白质功能，蛋白质间相互作用的研究，尤其寻找疾病生物标志物，用于发现新药靶点上有很大的应用前景。，治疗及3：细胞间和细胞内通讯的信号分子有哪些？细胞化学信号的作用方式有哪些?答：细胞间通讯的信号分子主要有激素、神经递质、生长因子和细胞因子等；细胞内的通讯信号的信号分子有环腺苷酸（c ）、环鸟苷酸（cGMP）、钙离子（CA2 ）、肌醇三磷酸（IP3）和二酰甘油（DG）等。细胞化学信号的作用方式有四种：一，内，细胞激素到血液中

18、，通过血液循环到体内各部位，作用于靶细胞；二，旁，细胞化学信号分子到细胞外液中，作用于邻近靶细胞；三，自，细胞对自泌的化学信号分子产生反应；四，突触传递，突触前神经元号。神经递质到突触间隙，作用于突触后神经元，这是化学突触传递神经信4：简述 G 蛋白偶联型受体介导的信号通路答：受体分子为单一肽链，含有 7 个疏水结构域，7 次横跨细胞膜，分子的的大部分在双层脂膜中，N 端位于包外侧，C 端位于包内测；在细胞膜内侧有 1 个为 G 蛋白（鸟苷三磷酸结合蛋白）识别的序列；配体与受体结合，受体变构、通过 G 蛋白的介导，激活或抑制效应蛋白质或酶的活 性，如肾上腺素受体。G 蛋白偶联型受体介导许多胞外

19、信号分子的细胞应答，包括蛋白质和多肽类激素、神经递质、氨基酸和脂肪酸的衍生物。5：简述细胞内 CA2+信号调控的机制答：质膜上配体门控 CA2+通道主要是离子型谷氨酸受体离子通道，内质网膜上配体门控 CA2+通道是 IP3 门控 CA2+通道，NA+-CA2+交换体不直接消耗 ATP，利用包内外 NA+的浓度梯度，向胞外排出 1 个 CA2+换进 3 个 NA+。6：简述核受体的结构与功能答：核受体的分子由 A/B，C，D，E 四大具有不同功能的结构域组成：A/B 域的 N 端能够接受配体非依赖的顺式激活，A/B 域的 C 端则调节了该核受体与其他成员的结合从而影响核受体与 DNA 的结合，此

20、外还与核受体对目标 DNA 的选择有关；保守的 C 域决定了其 DNA 结合活性，是核受体的特征性区域，同时影响核受体对其伴侣核受体的选择；D 域为一可弯曲的铰链区，带有核定位的信息，并连接 C 与 E 两区域；E 域能够与配体结合，二聚体化并被激活，发挥转录因子的作用调控下游靶转录。7：请简述人类组的基本概貌答：指对所有进行作图（包括遗传图谱，物理图谱，转录图谱），核苷酸序列分析，定位和功能分析的一门科学8：简述人类组计划的研究内容和任务答：人类组作图及序列分析，的鉴定；组相关的组研究技术的建立、创新与改进；模式生物组的作图和，信息系统的建立，信息的、处理及相应的的外延等。简言之，人类DNA

21、 序列的测定。开发；与人类学、法学和社会影响与结果的研究；研究的培训；技术转让及产业开发，研究计划组计划的主要内容就是制作高分辨率的人类的遗传图和物理图，最终完成人类和其他重要模式生物全部组9：请描述人类组计划的意义答：一、鉴定人类的全部进学科交叉与重组。，推动生物技术的进一步发展；二、将把人类带人医学的新时代；三、推动了模式生物组的研究；四、促10：简述组学的研究内容答：组学研究的内容包括的结构、组成、存在方式、表达调控模式、的功能及相互作用等，是研究与解读生物组所蕴藏的生物全部性状的所有遗传信息的一门新的前沿科学。11：何谓蛋白质组学？其研究内容包括哪些？答：蛋白质组学是在组学的基础上，从

22、整体水平研究细胞内蛋白质的组成、功能及其活动规律的科学，是建立在 cDNA 陈列 mRNA 表达谱的基因功能分析，组范围的酵母双杂交，蛋白质与蛋白质相互作用分析道蛋白质表达、和结构分析等诸多不同试验方法相互融合基础上的科学。研究内容包括，一是对蛋白质表达模式的研究，即对蛋白质组成的研究，可利向凝胶电泳、质谱、高性能的 X-射线晶体衍射及核磁等技术，研究蛋白质的结构、定位、移位以及对蛋白质足足分进行分析鉴定。二是对蛋白质功能模式的研究，可通过系统地利用中和抗体、小分子化合物等方法敢于蛋白质的活性或使其失活，观察对其一生命现象的影响，从而直接描述该蛋白质的功能，或利用酵母双杂交、噬菌体展示技术等研

23、究蛋白质相互作用。12：简述描述 PCR 技术的基本原理答：基本原理主要涉及几个方面，一，两条 DNA 互补链都需要引物，二，DNA 复性与变性的原理，三，人工的引物对于 DNA 双链的高度选择性和高效性，四，耐高温的 TaqDNA 聚合酶的发现和运用。13：PCR 反应的体系有哪些必需成分组成?答：参与 PCR 的反应体系包括 DNA 模板、引物、TaqDNA 聚合酶及相应的缓冲体系和反应底物 dNTP。14:请描述实时定量 PCR 技术的基本原理答：实时定量 PCR 是引入荧光标记分子，通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，计算 PCR 产物量，从而实现对起始模板的定

24、量分析。以 TaqMan 探针法为例，在 PCR 系统中新增加了一个荧光探针，其 5端标记有基团，3端标记有荧光淬灭基团，探针完整，R 所发射的荧光能量被 Q 吸收，无荧光信号，随着 PCR 进行，TaqDNA 聚合酶有 5-3核酸外切酶活性，可在链延伸中水解探针，R 与 Q 一旦分开便产生荧光信号。15：简述印迹技术的基本原理答：是将核酸或蛋白质等生物大分子通过一定方式转移并固定到支持膜上以便于进一步分析的方法。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DN段在ningji9ao 中进行变性使其成为单链，然后利用毛细管作用原理使凝胶中的 DN段转移到硝酸素膜上，使之成为固相化分子，载有 DNA 单链分子的

25、NC 膜在杂交液中与带有同位素标记的 DNA 分子进行杂交，DNA 探针结合到 NC 膜上具有互补序列的 DNA 分子上，经放射自显影就可以显现出杂交分子的区带。16：分子杂交与印迹技术有何应用？答：生物大分子印迹技术发展极为迅速，已广泛用于 DNA，RNA、蛋白质的检测。Southern Blotting 是将电泳分离的 DN段转移到一定的固相支持物上进行杂交检测的过程。在组作图、测定的拷贝数方面发挥重要作用；Northern Blotting 则是 RNA 经甲醇或乙二醛-二甲基亚砜等变性完全解开成线性单链，经电泳分离后从凝胶上转移到 NC 膜上，然后与标记的核酸探针进行固液杂交，可用来对

26、特异性 mRNA 定量及确定其相对分子质量。Western Blotiting 是利用抗原抗体免疫反应，以抗体作探针来检测已转移到固相支持物上的靶蛋白，可用于特异蛋白质的定性分析及检测蛋白量的相对变化。17：请描述技术的应用前景答：蛋白质作为一种新的高通量、平行、自动化、微型化的蛋白质表达、结构和功能分析技术，是蛋白质组学研究的重要之一，已广泛应用于蛋白质表达谱、蛋白质功能、蛋白质间互相作用的研究，尤其在寻找疾病生物标志物，用于用前景。，治疗机发现新药靶点上有很大的应18：技术在医学领域有哪些应用？答：技术不仅可以对大量的生物样品进行平行、快速、敏感、高效的分析，如大规模筛查由突变引起的疾病及

27、性疾病，而且在 DNA 序列分析和后组研究以及高通量药物筛选、新药发现等方面也得到广泛应用。19：请描述 RNA 干扰的机制答：生物体内的 dsRNA 可来自于 RNA别清除，转座子的表达被阻断，外源导入，转座子的转录产物，外源导入的，这些来源的 dsRNA 秀发了细胞内的 RNAi 机制，结果是表达被阻断，同时，与其同源的细胞组中的表达也被阻断。20：请描述 RNA 干扰技术的作用答：一，应用于功能组学研究，二，用于抗治疗，三，用于治疗，四，有望作为研究信号传导通路的新途径。21：工程？有哪些应用？答：狭义的遗传特性。工程仅指用体外重组 DNA 技术去获得新的重组；广义的工程则指按人们意愿设

28、计，通过改造或组而改变生物的工程已渗透到生命科学研究的各个学科，其已在工程药物，、抗体、转动物等方面取得了令人瞩目的成就，为人类疾病的和治疗做出了的贡献。22：简述分子克隆中常用的工具酶及其作用答：常用的主要有限制性核酸内切酶、DNA 连接酶、DNA 聚合酶、末端转移酶、逆转录酶等，限制性内切酶识别序列为 4-6 个碱基对，具有回文结构的 DN段，水解 DNA 分子的磷酸二酯键均产生含 5磷酸基团和 3羟团的末端，有两种切割方式，错位切割和垂直切割，分别产生粘性末端和平末端。DNA 连接酶在 DNA、修复和重组中起着重要作用，DNA 聚合酶用于 DNA 的，末端转移酶是将脱氧核苷酸加到双链 D

29、NA 分子的 3-OH 上，标记探针或者构建人工粘性末端。23：限制性核酸内切酶？请描述二类酶的作用模式答：限制性核酸内切酶是一类能够识别双链 DNA 分子的特异序列，并在识别位点或其周围产生切割作用的核酸水解酶，大部分二类限制性内切酶识别序列为 4-6 个碱基对，具有回文结构的 DN段，水解 DNA 分子的磷酸二酯键均产生含 5磷酸基团和 3羟方式，错位切割和垂直切割，分别产生粘性末端和平末端。团的末端，有两种切割24：何谓质粒？描述其结构、功能特点答：质粒是一类存在于细菌细胞中独立与DNA 而的双链环状结构 DNA 分子，小的为 2-3kb，大的可达数百 kb。DNA 重组技术发展初期常用

30、的大肠杆菌质粒 Pbr322,全场为 4.3kb，其 DNA 分子中含有氨苄西林和四环素的抗性以及限制性核酸内切酶位点，易于外源的与筛选，除此之外质粒还含有一个起始点以及与 DNA调节有关的序列。按质粒的调控及拷贝数可分两类，控制型质粒的常与宿主的繁殖偶联，拷贝数较少，每个细胞中只有 1 个到十几个拷贝，另一类是松弛控制型质粒，其百个拷贝。与宿主不偶联，每个细胞中有几十到几25：作为克隆载体的质粒应具备哪些特点？答：一，能够稳定，具有较高的拷贝数，二，具有多个限制性内切酶的单一位点，易于外源的，三，具有某些易检测的遗传标记，用与阳性克隆的筛选，四，分子量小，允许外源的容量较大。26：质粒载体应

31、具备什么特征？其主要用途有哪些？答：一，能够稳定，具有较高的拷贝数，二，具有多个限制性内切酶的单一位点，易于外源的，三，具有某些易检测的遗传标记，用与阳性克隆的筛选，四，分子量小，允许外源的容量较大。按其功能可分为，克隆载体用于外源 DN段的克隆与扩增，表达载体用于外源的表达。27：分子克隆技术包括哪些基本步骤？答：(1)DN段的，(2)载体 DNA 的选择，3)DN段与载体连接，4)引入寄主细胞，5)克隆的选择28：分子克隆是目的的有哪些主要方法？答：从生物组织细胞提取出全部 DNA，用物理方法（超声波、搅拌剪力等）或酶法（限制性核酸内切酶的不完全酶解）将 DNA 降解成预期大小的片段，然后

32、将这些片段与适当的载体（常用噬菌体、粘粒或 YAC 载体）连接，转入受体细菌或细胞，这样每一个细胞接受了含有一个组 DN段与载体连接的重组 DNA 分子，而且可以繁殖扩增，许多细胞一起组成一个含有组各 DN段克隆的集合体，就称为组 DNA 文库（genomic DNA library）。如果这个文库足够大，能包含该生物组 DNA 全部的序列，就是该生物完整的组文库，能从这文库中钓取该生物的全部或 DNA 序列。从组含有生物生存、活动和繁殖的全部遗传信息的概念出发，组文库是具有生物种属特异性的。构建组文库，再用分子杂交等技术去钓取克隆的方法，称为鸟枪法或散弹射击法，意味着从含有众多的序列克隆群中

33、去获取目的或序列29：请问目的与载体构建成重组体的方法有哪些？答：一，遗传学方法，二，免疫学方法，三，分子生物学方法30：目的和载体连接的主要方法有哪些？答：一，粘性末端 DN段间的连接，二，平端 DN段间的连接，三，末端 DN段间的连接。31：如何进行重组体的筛选和鉴定？答：将外源导入宿主细胞以后需要筛选出含有目的的阳性克隆并加以扩增。主要步骤包括；一，筛选出带有载体的克隆，二，接着筛选出带有重组体的克隆，三，最后筛选出待遇特异目的的克隆。32：简述重组体有哪些筛选和鉴定的方法？答：重组体的筛选与鉴定方法分别为，遗传学方法、免疫学方法、分子生物学方法等；筛选分为，抗生素抗性筛选、遗传标志补救筛选、噬菌斑筛选、限制性内切酶酶切图谱分析、核酸探针杂交检测法、聚合酶链反应、核苷酸序列测定。33：请说明蓝白班筛选的原理答：PUC 质粒、PGEM 质粒及 M13 噬菌体系列等载体携带了 lacZ为 lacZ 的 N 端 146 个氨基酸残基编码，其编码产物即为 B-半乳糖甘酶的段。突变型 lac-E.coli 可表达该酶的 w 片段，单独存在的 a 及 w 片段均无 B-半乳糖