03药物血浆半衰期的测定

1、药物血浆半衰期的测定药理学教研室【实验目的】1.以磺胺钠为例学习测定药物的血浆半衰期（t1/2）2.学习药动学参数的计算方法3.理解常用药动学参数的临床意义9/2/20222【实验原理】磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。可在600nm波长下进行比色测定。根据Beer-Lamber定律，浓度与光密度成正比关系。其化学反应式如下：9/2/202239/2/20224【材料与方法】 一、实验动物：家兔1只。 二、器材与药品：试管24只，移液吸管10ml，1只；1ml，

2、2只；2ml 7只；移液器1支，吸头若干，试管夹，试管架，离心机，722型分光光度计，手术剪，眼科剪，止血钳，动脉夹，眼科镊，缝线，药棉，纱布，捆扎绳，注射器10ml 1支，5ml 1支。5%磺胺嘧啶钠溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，0.5% 麝香草酚溶液（溶于20氢氧化钠内），草酸钾结晶，25%氨基甲酸乙酯溶液，肝素注射液。 9/2/202259/2/202261.准备试管:第一套:A1-A5,少量草酸钾.第二套:B1-B5,加7.5%三氯醋酸2ml.第三套:C1-C5第四套:D1-D5,加0.5亚硝酸钠0.5ml三、方法与步骤ABCD2.取血:1)取家兔，称重，以25%氨

3、基甲酸乙酯溶液1g/kg(4ml/kg)耳缘静脉注射麻醉，颈动脉插管,放血0.5ml.A12) 耳缘静脉注入5%磺胺嘧啶钠75mg/kg（1.5ml/kg），记录注射完毕时间（准确到分钟）。分别于5min; 10min; 20min; 40min从颈总动脉放血0.5ml. A2-A5注意:肝素冲洗/前段放弃.9/2/20228准确移液100l混匀1500转/分离心5min准确移上清液1.5ml加0.5亚硝酸钠0.5ml加0.5%麝香草酚1ml525nm测光密度A颈总动脉放血A1给药前;A2 5min; A3 10min; A4 20min; A5 40min3.血样处理:100l血B管,150

4、0转/分离心5min，上清液C管,取1.5ml上清液 D管:0.5%亚硝酸钠溶液0.5 ml，摇匀，0.5%麝香草酚1ml,橙红色。BCD7.5%三氯醋酸2ml草酸钾4.检测:以给药前血样作空白对照，用722型分光光度计于525nm波长下进行比色，测定各时间点的光密度，在标准曲线上查得磺胺钠浓度。 C=(D-0.0312)/0.3621给药后不同时间点的磺胺浓度9/2/202210管号12345给药时间t光密度值空白对照磺胺钠浓度磺胺钠对数浓度lgC【实验结果】根据一级动力学消除公式 t 将给药时间t与已求得的磺胺血浆浓度对数值lg Ct作直线回归，即可得回归方程的斜率（- K /2.303）

5、和截距（lgCo）9/2/2022119/2/202212应用公式t1/2=0.693/K，Vd=D/Co，CL=KVd，便可求得t1/2、Vd和CL。计算器（Casio fx180或fx3600p）的操作步骤MODE 2 屏幕显示LR，进入线性回归计算状态；INV AC消除储存器内的全部数据；XoDo自变量输入； DATA因变量数据输入；INV A（截距），INV B（斜率） INV r（相关系数）；INV X得期望值。9/2/202213计算机的操作步骤（以Excel2002为例） 将数据输入Excel中，调用其自带的函数，根据对话框要求操作即可完成运算。INTERCEPT（known-y

6、s，known-xs）求线性回归拟合线方程的截距。CORREL（arrayl，array2）返回两组数值的相关系数。SLOPE（Known-ys known- xs）返回经过给定数据点的线性回归拟合线方程的斜率。FORECAST（X，Known-ys known- xs）通过一线性回归拟合线返回一个预测值。9/2/202214【注意事项】麻醉药静脉推注速度不宜过快，颈总动脉分离及插管给药时间及各取血点均要准确记录，加样精确，减少误差。在取血样前，要将残留在动脉套管中的血液放掉，以免影响实验结果。离心所得上清液加入亚硝酸钠充分摇匀后方可加入麝香草酚。9/2/202215例ClgCt401.6020610201.301032010