天胡荽药材中槲皮素的薄层鉴别与含量测定

1、天胡荽药材中槲皮素的薄层鉴别与含量测定【摘要】目的对天胡荽药材中槲皮素进展薄层鉴别，并建立天胡荽药材中槲皮素的含量测定方法。方法采用薄层色谱法对天胡荽药材中槲皮素进展鉴别。并采用高效液相色谱法进展含量测定，色谱柱为Dika公司Diansil182504.6，5；流动相为乙腈-0.1%磷酸4555；流速0.8l/in。检测波长370n，柱温25。结果薄层色谱可鉴别槲皮素。槲皮素在0.010880.1088g范围内线性关系良好，r=0.9998，平均回收率为97.77%，RSD=1.00%。结论此法简便、准确，可用于天胡荽药材的质量控制。【关键词】天胡荽；槲皮素；薄层色谱法；高效液相色谱法天胡荽为

2、伞形科植物天胡荽HydrtylesibthrpiidesLa.或破铜钱HydrtylesibthrpiidesLa.Var.batrahiuHaneHand.-azz.exShan的枯燥全草，具有清热解毒、利湿之成效，用于黄疸型肝炎、胆结石、目翳1治疗。天胡荽含槲皮素queretin、槲皮素-3-半乳糖苷queretin-3-galatside等黄酮类化合物2，其中槲皮素具有抗炎、抗氧化、抗癌和抗突变等多种功能3，是天胡荽药材的有效成分之一。本实验采用薄层色谱及高效液相色谱对天胡荽药材中槲皮素进展定性与定量研究，为控制天胡荽药材的质量提供简便、有效的方法。1仪器与试药Agilent1100型高

3、效液相色谱仪(自动进样品)，二极管阵列检测器(DAD)；AB104-N型电子天平(德国ettler-TledGrup公司)；薄层色谱硅胶G青岛海洋化工；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为重蒸镏水；槲皮素对照品中国药品生物制品检定所，批号：100081-202206；10批天胡荽药材样品采自贵州各地，经笔者鉴定为伞形科植物天胡荽HydrtylesibthrpiidesLa.和破铜钱HydrtylesibthrpiidesLa.Var.batrahiuHaneHand.-azz.exShan的枯燥全草。2方法与结果2.1定性鉴别2.1.1供试品溶液的制备取枯燥至恒重的天胡荽药材粉末约3g，精细

4、称重，置圆底烧瓶中，精细参加甲醇-25%盐酸溶液(41)提取液75l，置水浴中加热回流1h，滤过，将滤液水浴蒸干，用适量蒸馏水溶解，移至分液漏斗中，加醋酸乙酯30l10，10，10l萃取，合并醋酸乙酯萃取液，减压回收醋酸乙酯至干，残渣加甲醇3l使溶解，取上清液作为供试品溶液。2.1.2对照品溶液的制备精细称取槲皮素对照品13.6g，置50l的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。2.1.3薄层色谱法4照薄层色谱法试验，汲取供试品溶液及槲皮素对照品溶液各10l分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸541为展开剂，置盐酸蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾

5、干。供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显一样颜色的斑点。2.2HPL测定2.2.1色谱条件色谱柱为Dika公司Diansil182504.6，5；流动相为乙腈-0.1%磷酸4555；流速0.8l/in。检测波长370n，柱温25。进样量10l。理论塔板数按槲皮素计算，应不低于5000。在此色谱条件下，槲皮素对照品、天胡荽药材的HPL图谱见图12。2.2.2对照品溶液的制备精细吸劝2.1.2项下的槲皮素对照品溶液1l，置25l的容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。转贴于论文联盟.ll.2.2.3供试品溶液的制备取枯燥至恒重的天胡荽药材粉末约0.5g，精细称重，置50l具塞锥形瓶中，

6、精细参加甲醇-25%盐酸溶液(41)提取液25l，称定重量，置水浴中加热回流1h，放冷，称重，用提取液补足减失的重量，摇匀，滤过，精细汲取续滤液5l至25l量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45)滤过，取续滤液,即得供试品溶液。2.2.4线性关系考察精细汲取槲皮素对照品溶液1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0l，进样，测定峰面积，以色谱峰面积为纵坐标，槲皮素进样量为横坐标，进展线性回归分析，线性回归方程:Y=6442.9X-1.4915，r=0.9998，结果说明槲皮素在0.010880.1088g进样量与峰面积的线性关系良好。2.2.5精细度实验汲取对照品溶液10l，连

7、续进样5次，记录色谱图，结果槲皮素峰面积的RSD为0.19%。2.2.6稳定性实验取同一供试品溶液，分别在0，2，4，6，8，10h进样，记录色谱图，结果槲皮素峰面积的RSD为1.15%。说明供试品溶液在10h内稳定。2.2.7重复性实验取同批药材5份，精细称定，按“2.2.3项下供试品溶液制备方法制备并测定，槲皮素平均含量为0.11%，RSD为0.96%。2.2.8加样回收率实验取含量天胡荽粉末5份，每份约0.25g，精细称定，分别精细参加一定量的槲皮素对照品溶液，按“2.2.3项下方法制备并测定，结果回收率平均值为97.77%，RSD为1.00%。2.2.9样品含量测定精细汲取对照品溶液与

8、10批天胡荽药材供试品溶液各10l，按上述色谱条件测定，测定峰面积积分值,按外标法计算槲皮素的含量。结果见表1。表1样品中槲皮素的含量略3讨论通过实验发现，在槽内先参加展开剂，再在展开缸内用小烧杯盛上盐酸，然后进展薄层板预饱和30in，再展开，其色谱斑点圆而集中，别离度较好。天胡荽药材除了含有槲皮素外，还有多种黄酮苷，本文以盐酸和硫酸作为水解酸进展了比拟，还对水解酸的浓度、溶剂和提取时间进展了考察。结果本文所用的条件较好。曾对甲醇-水5050、甲醇-0.1%磷酸5050、乙腈-水4555等流动相进展考察，发现上述条件不够理想。采用乙腈-0.1%磷酸4555作为流动相，槲皮素色谱峰可以到达基线别

9、离，峰形对称、锋利。1990年版?广西中药材标准?收载天胡荽和破铜钱为天胡荽药材的来源品种，而2022年版?贵州省中药材、民族药材质量标准?只收载天胡荽为天胡荽药材的来源品种，同时槲皮素的含量测定结果说明，天胡荽和破铜钱两种植物在成分含量上有明显的差异。因此，天胡荽和破铜钱两种植物的枯燥全草能否同时作为天胡荽药材使用有待商榷。在?广西中药材标准?1990年版与?贵州省中药材、民族药材质量标准?2022年版中1，5，只对药材性状与粉末鉴别作了规定，本实验首次对天胡荽药材中槲皮素进展薄层鉴定与含量测定，可作为天胡荽药材质量控制的有效方法。【参考文献】1广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准1990版S.南宁：广西科学技术出版社，1992，27:152.2张兰，张德志.天胡荽的研究进展J.现代食品与药品杂志，2022，17(1):15.3俞一心，