同济医院检验科ISO15189体系文件07乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）定性测定

1、同济大学附属同济医院检验科免疫组项目操作指导书TJYYJYKMY/XMZ207第2版标题：乙型肝炎表面抗体测定（定性）第2章 第07号第 PAGE 4 页 共 NUMPAGES 4 页1. 目的：检测血清标本中的乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）。2. 适用范围：同济医院检验科免疫室。3. 项目名称：乙型肝炎表面抗体（HbsAB）（定性）测定。4. 检测方法：酶免疫分析法。5. 检测原理：采用纯化HbsAg包被反应板，加入待测标本，同时加入HbsAg-HRP，当标本中存在抗-HBs时，该抗-HBs与包被HbsAg结合并与酶结合物结合形成HbsAg-抗-HBs-HbsAg-HRP复合物，加入TMB底

2、物产生显色反应，反之则无显色反应。6. 试剂：6.1 品牌：上海实业科华生物技术有限公司。6.2 包装规格：96人份。6.3 内含物：每盒试剂含以下成分：6.3.1 微孔反应条：8孔X126.3.2 酶结合物：6.2mlXl瓶；6.3.3 阳性对照：1.0ml Xl瓶；6.3.4 阴性对照：1.0mlXl瓶；6.3.5 洗涤液(使用前以蒸馏水作25倍稀释)：40mlXl瓶；6.3.6 显色剂A：8.0mlXl瓶；6.3.7 显色剂B：8.0mlXl瓶；6.3.8 终止液：7.0mlXl瓶；6.3.9 封片：2片；6.3.10说明书：一份。7. 仪器品牌、型号：意大利Alisei全自动酶免分析仪

3、。8 操作步骤：8.1 打印工作单：8.1.1 打开LIS电脑及打印机电源，8.1.2 双击齐效检验系统，登陆工号与密码。双击报告处理，单击标本申请信息打开标本申请明细信息查询，打开左上角的所有信息，选择未生成报告信息。8.1.3 在检验项目处选择HBSAB执行查询，点击打印申请单，打印出工作单。8.2 排列待测标本:根据工作单上的库位号从标本架中找出相应标本，并按工作单上的顺序排列在Alisei全自动酶免分析仪的样本架上。8.3 装载试剂：开启Alisei仪，根据待测标本数量，点击控制电脑编辑工作列表，出现试剂及酶标板界面。按照屏幕所示放好洗板液，洗针液，标本试管，预稀释管和试剂。8.4 装

4、载酶标板：点击Alisei全自动酶免分析仪界面的装卸反应板按钮进行装载反应板，按项目顺序进行装载。等所有项目酶标板装载完成后，点击开始按钮机器开始检测。8.5 Alisei分析仪检测参数：试剂空 白阳性对照阴性对照标 本质控品单 孔双 孔双 孔单 孔单 孔50ul/孔酶结合物50ul/孔混匀，37，30分钟洗涤，洗涤液350ul/孔 5次A液50ul/孔B液50ul/孔混匀，37，15分钟终止液50ul/孔450/630nm读取OD值8.6 仪器自动记录OD值并可打印测定结果，同时传入LIS中，发送报告详见免疫报告发送程序。8.7 结果判断：（样品OD值）（阴性对照平均OD值）2.1判断为阳性

5、，否则阴性。阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05以按实际OD值计算。9. 参考范围：正常人阴性。10. 临床意义：抗-HBs在HBV的中和抗体，有清除HBV，防止再感染的作用。 抗-HBs一般出现于乙肝患者恢复期，提示感染已终止。注射乙肝疫苗的人，抗-HBs也阳性。11 病人准备、标本要求：标本为血清时最好空腹采血，脂血、溶血不可使用。其它体液标本无特殊要求。12 注意事项：12.1 试剂盒应置28中保存，使用前试剂应摇匀。12.2 试剂盒内容物及标本从冷藏环境中取出，在37平衡30分钟后方可使用。12.3 待测标本不可用NaN3防腐。12.4 结果判断须在10分钟内完成。12.5 不同批号的试剂不可混用。12.6 手工操作时，封