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1、同济大学附属同济医院检验科临检组血项操作指导书TJYYJYKLJ/XYZ113第2版标题: 红斑狼疮细胞检查操作指导书第1章 第13节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的:保证红斑狼疮细胞检查结果准确、可靠。2. 适用范围:查找红斑狼疮细胞3. 项目名称:红斑狼疮细胞检查4. 检验方法:改良血块法5. 检测原理:红斑狼疮患者血液内的红斑狼疮因子为一种抗核蛋白的Ig G抗体,它作用细胞核抗原决定蔟,并使细胞核胀大,失去原有的染色质致密结构,形成一种均匀无结构的圆形烟雾状物质,称均匀体。这种均匀体蛋白在补体作用下,被成熟中性多核细胞吞噬后即为红斑狼疮细胞。6. 试剂:6.1
2、 品牌:瑞氏染液(自配),原料为上海生化试剂厂生产的。 6.2 货号:瑞氏粉:Q/GHSC1463-2000;甲醇:GB/T683-19936.3 包装规格:瑞氏粉:25g/瓶;甲醇:500ml/瓶6.4 内含物:6.4.1 瑞氏染液:瑞氏粉;甘油;甲醇6.4.2 缓冲液:去离子水7. 仪器:OLYMPUS显微镜8. 操作步骤:8.1 抽取患者血液2-3ml,注于小试管,于室温待凝。8.2 于刚凝固形成时,用竹签将凝块搅碎,并将残余血块除去。8.3 将血置离心机内2000r/min离心10min,使白细胞聚集在同一层面,以利于狼疮细胞形成。8.4 置37温箱温育2小时。8.5 取出白细胞层及上
3、下各少许,置红细胞比积管,以2000r/min离心,沉淀10min。8.6 吸去上层液,吸白细胞层,制成薄血片3-4张。8.7 以瑞氏染液染色,镜检。9. 参考范围:阴性10. 临床意义:10.1 多出现于系统性红斑狼疮.其活动期较缓解期阳性率高。10.2 胶原性疾病如风湿病,类风湿性关节炎,结节性动脉炎,硬皮病及皮肌炎等有时也可查到此种细胞。10.3 未找到狼疮细胞并不能否定红斑狼疮的诊断,应进一步作其它有关免疫学检查。11. 病人准备、标本要求:抽取患者血液2-3ml,注于干净试管内。12. 注意事项:12.1 操作时间不能超过3小时,时间过短,狼疮细胞形成不佳。时间过长,细胞溶解过多,影响检出。12.2 注意与果馅细胞鉴别,果馅细胞多为单核细胞吞嗤淋巴细胞核所形成,核仍保持染色质结构和染色特性(着紫红色)。13. 参考资料
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