农药残留检测分析校内实训报告

1、农药残留检测分析校内实训报告姓名：学号：成绩：指导老师实习地点实训时间目的与意义随着生活水平的提高，食品安全已被越来越多的人所重视。现代农业技术的不断进步，农药的适用范围也越来越广，但是随着农药的大量使用，农药残留也成为了人们食用农产品同时最担心的问题之一。对农产品进行残留分析，对于规范农产品市场，监控食品安全有重要的意义。试验通过土壤中毒死蜱农药含量分析来模拟农产品中的农药残留，具有简化试验的作用。实训内容2.1样品预处理2.1.1试样制备含有乐斯本、毒死蜱的水样。2.1.2提取量取5mL水样加入分液漏斗中，并加入20mL乙酸乙酯置分液漏斗，充分震荡，静置分层，收集上层乙酸乙酯相，下层水相再

2、用10mL、10mL乙酸乙酯同上法萃取两次，收集上层乙酸乙酯，加入2-5g无水硫酸钠脱水，加入少量活性炭脱色。重复三次。2.1.3净化2.1.3.1制作层析柱，层析柱自下而上装无水硫酸钠5g,氧化铝4g,活性炭适量，无水硫酸钠5g,稍加震动，使柱子压实；2.1.3.2取20ml乙酸乙酯，预先淋洗层析柱；2.1.3.3将上步骤收集到的试样酯层液分批加入到层析柱中，过柱；2.1.3.4待层析柱中样品液过柱完毕，加入40ml乙酸乙酯液洗脱；2.1.3.5收集得较纯净样品液。2.2添加回收实验操作步骤2.2.1本组用0.048mg/l浓度的毒死蜱农药溶液做添加回收实验（取用样品液2ml）,其操作方法同

3、试样处理方法（另外还有0.096mg/l和0.192mg/1浓度的添加回收实验）。连续萃取时分别用10ml、5ml、5ml的乙酸乙酯溶液萃取，收集酯层液（其操作方法同样品处理液操作方法）。2.3高效液相色谱检测2.3.1高效液相色谱仪工作原理以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。高效液相色谱仪操作流程一开机前准备1根据需要选择合适色谱柱。2在容器中放入已过滤脱气好的流动相，把吸滤过滤头放入容器中。二开机1打开所需仪器的电源开关，打开氦气阀门。2等各仪器

4、自检通过后，双击进入工作站。三检查设备连接选择所需Project,runsample上击右键，选择所需仪器，联机。点击instrumentmethod的edit,设置好各仪器参数。保存所编缉的方法。样品分析与采集点击setup,建立方法。等待色谱柱、系统平衡，基线稳定后，设置好样品信息，点击Start,即开始样分析与数据采集。报告输出在工作站中输出检测结果将文件转化成所需格式的文件，输出报告六关机1冲洗色谱柱，排出流路中可能有的缓冲液，并冲洗泵的柱塞杆。2泵停止，关闭氦气阀门。3退出工作站，关闭仪器电源。在记录本上记录使用情况。2.3.3高效液相色谱仪使用注意事项所有的溶剂均选用HPLC级试剂

5、，水用纯净水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡水相流动相需经常更换，防止长菌变质；如果流动相有缓冲盐，必须用5%甲醇或5%乙腈过渡冲洗。样品均用0.45um的滤膜过滤后才可进样。色谱柱用合适的溶剂保存，若为C18柱推荐用甲醇保存。5柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。6C18柱绝对不能进蛋白样品、血样、生物样品；7气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生泡2.3.4农药标准曲线的制作配制标准溶液的浓度分别为50mg/L100mg/L，200mg/L，250mg/L，500mg/L，在规定的色谱条件下,待仪器稳定后，进样分析。制作农药浓度-峰面积标准曲

6、线。2.3.5色谱条件（1）流动相：乙腈-水（75-25）（2）检测波长：290nm（3）进样量：20pL（4）流速：1.0mL/min2.4结果分析2.4.1农药的液相色谱图图表1水样：-_5-一-2-分析结果编号1T分钟面积mV*s类型宽秒面积4.4000.4.1151.BB1nA匚jvi3.vbJ.in右aa匚fn.6.733355.7829.BBffil：.i=.11.000027.00006.870293.1298图表2添加回收实验-5355.3E2317W=.9-775分析结果编号RT分钟面积mV*s类型宽秒面积14.45004.5633BB11.00000.053226.7500

7、9.3365BB16.00000.108837.86678569.1067BB177.000099.83813.0923-2.0404分析结果编号RT分钟面积mV*s类型宽秒面积18.133328.9131BB34.0000100.00002.4.2农药标准曲线浓度（mg/L）50100200250500峰面积（mV*s）756.55841723.48833611.21394803.47363843.2743浓度（mg/L）毒死脾农药标准曲线y=0.05x+13.838R=0.998从前四组的数据来看，总体趋势是：随着毒死脾浓度的增加，相应浓度对映的峰面积是增加的，而从第四组数据到第五组数据，

8、随着毒死脾浓度的增加，相应浓度对映的峰面积是减少的，显然第五组数据存在问题，所以在做标准曲线时将其舍去。2.4.2添加回收率将10000mg/L的毒死蜱溶液分别稀释成2mg/L、20mg/L、200mg/L，在上述色谱条件下进行检测，结果如下：浓度(mg/L)峰面积(mV*s)123平均248.282458.930022.645043.285820102.238910.7336(舍)28.913165.823420067.134019.204755.782961.4585添加回收率=测得的浓度/实际的浓度对于浓度为2mg/L的添加回收率：测得的浓度=0.05x43.2858+13.838=16

9、.00(mg/L)实际的浓度为20mg/L所以：添加回收率=16.00/2x100%=800%对于浓度为20mg/L的添加回收率：测得的浓度=0.05x65.8234+13.838=17.13(mg/L)实际的浓度为20mg/L所以：添加回收率=17.13/20 x100%=85.65%对于浓度为200mg/L的添加回收率：测得的浓度=0.05x61.4585+13.838=16.91(mg/L)实际的浓度为200mg/L所以：添加回收率=16.91/200 x100%=8.46%(mg/L)(4)分析：由上面得到的数据可以看出，200mg/L的添加回收率在80%120%的合理范围之内，浓度为

10、2mg/L的添加回收率非常高，浓度为20mg/L的添加回收率非常低，不在合理范围80%120%，。可能由于在萃取时没有萃取干净，萃取的时候，在分层的时候水层和有机溶剂层没有完全分开，有机溶剂层的农药流到水层中，本组的实验过程中，有一步未把润洗完的浓缩液收集，或者在蒸发浓缩是出现误差！导致本组的添加回收实验的浓度不在农药标准曲线范围之内。2.4.3样品中农药浓度检测结果样品中含毒死脾浓度为=0.05x93.1298+13.838=18.50(mg/L)实训小结与心得所谓农药残留在农业生产中施用农药后一部分农药直接或间接残存于谷物、蔬菜、果品、畜产品、水产品以及土壤和水体中的现象。如今人们生活水平

11、提高，对物质要求也严格了，绿色食品也越来越高的呼声，农药残留带来一系列难以解决的难题，如伤害人身健康，污染环境等，农药残留检测是一项技术要求高，市场需求强的技术。作为制药工程专业学生的我们，对农药残留检测也要有一定的了解，今天我们的实训内容就是检测水样中的农药残留含量，主要是乐斯本、毒死脾的含量。实验内容包括前处理、添加回收实验、高相液相色谱检测等，前处理包括水样的提取和水样的浓缩，用乙酸乙酯多次进行提取，对于乙酸乙酯，有挥发性，做实验的时候要控制其用量，稍有毒性，提取时，将水样和乙酸乙酯混于分液漏斗中，充分振荡后静置分层，收集酯相，水相再加乙酸乙酯萃取两次。萃取完后，往酯相中加入适量的无水硫

12、酸钠至无水硫酸钠不溶解或无结块产生。对于今天的实验，我们小组在这个步骤没少出错，前处理收集酯相、还有浓缩试验时，都没有进行清洗仪器，这样将影响最终的收率，所以说实验要非常严谨，尤其是对于化学实验，前处理非常重要，任何一步都会影响会面的数据。今天的检测也用到了化学实验很重要的仪器高效液相色谱仪，HPLC主要包括溶剂传输系统（泵）、进样器、色谱柱、检测器和流动相五个组成部分，操作要按部就班，不能随心所欲。通过这次实验，主要熟悉并使用高效液相色谱仪，认识到，越是精密的实验仪器一定要更认真，明白其中的原理和操作过程，即可将它们变成解决人们难题的好帮手。平时的理论学习中我们总是能把一套一套的原理倒背如流，但真正实际操作时却不见得能如鱼得水，步步准确无误，很多时候我们都能看到仪器名字就能想起其一大段的理论知识，但实际操作时你甚至不能注意到很致命的注意事项，例如本次使用高效液相