生物化学实验

1、.：.；课程实验教学大纲课程编号：31590021 学时 45 学分 2.5课程的性质和义务 本课程经过学习生物化学的根本实验技术，使学生具有初步的科学实验才干及严厉的科学作风，同时验证生物化学的某些根本实际知识，加深感性认识。教学内容和方法 经过本门课程的学习，要求学生在掌握生物化学课程的根本实际和根本知识的同时学习生物化学的根本实验技艺，掌握比色、纸层析、电泳、分子筛柱层析、生化制备等根本实验技术。经过学生本人动手亲身参与来实现上述教学要求。教学目的要求 教学目的是使学生学会生化常用的仪器设备，培育学生的动手才干和处理实践问题的才干。考试方式及方法 平常成果和调查相结合。五， 配套的实验教

2、材或指点书 生化教研组2000年自编 生物化学实验 适用专业 食品学院海洋药物专业七, 实验工程根据学时选取实验序号实验内容学时实验类型实验类别实验要求每组人数1氨基氮测定甲醛滴定法3综合型技术根底实验必修22蛋白质浓度测定Folin-酚法，紫外吸收法及其比较6综合型技术根底实验必修23血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳3综合型技术根底实验必修24总糖和复原糖测定3.5-二硝基水杨酸法4综合型技术根底实验必修25酶的专注性3验证型技术根底实验必修26蛋白酶的活力测定4综合型技术根底实验必修27酵母核糖核酸RNA的提取制备4综合型技术根底实验必修28葡聚糖凝胶层析3综合型技术根底实验必修29氨基移换反响

3、6综合型技术根底实验必修210底物浓度对酶活性的影响蔗糖酶米式常数的测定6综合型技术根底实验必修211聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦10综合型技术根底实验必修212药物毒性的生化分析血清尿素氮的测定3综合型技术根底实验必修213氨基酸的分别鉴定纸层析法3综合型技术根底实验必修2实验一 氨基氮测定甲醛滴定法一 实验学时：3二 实验工程内容： 1样品测定 2计算样品氨基氮含量 主要仪器设备及配套数1.仪器：吸量管5ml，10ml；量杯10ml；三角瓶；酸度计2.试剂：甲醛溶液；0.01N氢氧化钠 实验室称号： 生化实验室实验二 蛋白质浓度测定Folin一酚法，紫外吸收法及其比较一 实验学时：3二 实验工程

4、内容： 1. Folin酚法中规范曲线的绘制2. Folin酚法中样品液的测定 3 . 紫外吸收法中规范曲线的绘制 4 . 紫外吸收法中样品液的测定三 主要仪器设备及配套数：1. 仪器：吸量管0.5、1.05ml与吸量管架；试管与试管架；分光光度计；紫外分光光度计2. 试剂：Folin一酚试剂A；Folin一酚试剂B；各蛋白规范溶液400g/ml；蛋白质样品液四 实验室称号：生化实验室实验三血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳一 实验学时：3二实验工程内容： 1浸泡2点样3电泳4染色5漂洗三主要仪器设备及配套数：主要仪器：毛细管1.5内径，电泳仪，电泳槽 实验室称号： 生物化学实验室实验四总糖和复原糖测

5、定3.5二硝基水杨酸法一 实验学时：3 二实验工程内容1. 葡萄糖规范曲线的制造2. 样品中还氧糖和总糖的测定三主要仪器设备及配套数： 主要仪器：容量瓶，玻璃漏斗,吸管, 量筒,721型分光光度计，电热恒温水浴锅，水浴锅 配套数：10套 四实验室称号： 生物化学实验室实验五酶的专注性，温度、PH、 激活剂、抑制剂对酶活性的影响一 实验学时：3二实验内容： 1温度对酶活力的影响 2pH对酶活力的影响 3活化剂和抑制剂对唾液淀粉酶的影响 4酶对底物的专注性三主要仪器设备及其配套数 主要仪器：水浴锅，吸量管， 白瓷瓶，小漏斗，烧杯，量筒，滴管，玻璃漏斗配套数：10套四实验室称号： 生物化学实验室实验

6、六蛋白酶的活力测定一 实验学时：3二 实验工程内容：1. 酪氨酸规范曲线制造2. 蛋白酶活力测定三 主要仪器设备及配套数：主要仪器：试管，吸管，721型分光光度计，电热恒温水浴锅配套数：10套四实验室称号： 生物化学实验室实验七：酵母核糖核酸RNA的提取制备 一 实验学时：3二实验内容：破碎细胞提取分别沉淀RNA洗涤及抽滤枯燥 主要仪器设备及其配套数主要仪器：量筒, 三角烧瓶, 吸滤瓶, 布氏漏斗，外表皿, 温度计, 枯燥器，离心机，水浴锅，烘箱，药物台秤配套数：10套实验室称号： 生物化学实验室实验八 葡聚糖凝胶层析一 实验学时：3二 实验工程内容： 1凝胶容胀 2装柱 3加样 4洗脱与搜集

7、 5绘制洗脱曲线三主要仪器设备及配套数主要仪器：吸管1m，层析柱, 刻度离心筒配套数：10套四实验室称号： 生物化学实验室实验九氨基转换反响一实验学时：3二实验工程内容： 1 . 肌肉糜制备 2 . 氨基酸样品的制备 3 . 纸层析三主要仪器设备及配套数 1 . 仪器：吸管1ml；试管5*15cm；培育皿15cm；毛细管； 2 . 试剂：0.01M磷酸缓冲液；0.1M丙氨酸；0.1Ma酮戊二酸；0.1M谷氨酸；0.1%茚三酮丙酮溶液；层析展开剂四实验室称号： 生化实验室实验十 底物浓度对酶活性的影响蔗糖米式常数的测定一 实验一 实验学时：3二 实验工程内容： 1. 规范曲线的绘制 2. 根据活

8、力选择酶浓度 3. 底物浓度对酶促反响速度的影响米式常数的测定三主要仪器设备及配套数100ml三角烧瓶；研钵；50ml及100ml容量瓶；离心机；糖管；恒温水浴；吸量管；停表；分光光度计( 四 ) 实验室称号： 生化实验室实验十一 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦一 实验学时：3二 实验工程内容：1. 制胶柱 2. 聚焦3. 显示 4. 测pH三 主要仪器设备及配套数：小玻璃管；小玻璃架；注射器；圆盘电泳槽及直流稳压电流；pH计；平皿及竹夹；吸量管四 实验室称号： 生化实验室实验十二 药物毒性的生化分析血清尿素氮的测定一 实验学时：3二 实验工程内容：1. 参与反响试剂 2. 反响 3. 比色三 主要仪器设备及配套数： 分光光度计四 实验室称号： 生化实验室实验十三氨基酸的分别鉴定纸层析法一实验目的：1学习分配层析的原理2掌握氨基酸纸上层析法的操作技术包括点样、平衡、展层、显色、鉴定。3