药物分析学课件：第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析

1、对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析第 八 章22022/8/4概述局麻药-暂时阻断身体某一区域的神经传导而产生的局部麻醉作用表面麻醉 浸润麻醉 传导麻醉 蛛网膜下腔麻醉（腰麻） 硬膜外麻醉32022/8/4掌握 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的结构和性质；代表性药物 的鉴别、检查和含量测定的方法、原理与特点。熟悉 主要对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的杂质结构、危害、检查 方法与含量限度。了解 影响对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物稳定性的主要因素及体内 样品与临床检测方法。42022/8/4局麻药物的化学结构通常包括三个部分： 亲脂性芳香环； 中间连接功能基； 亲水性胺基。 对氨基苯甲酸

2、酯类局麻药物：连接芳环和胺基的中间功能基是酯键 代表药物为普鲁卡因 酰苯胺类局麻药物：代表药物为利多卡因 中间功能基是酰胺键 52022/8/4一、对氨基苯甲酸酯类药物基本结构与典型药物本类药物分子中都具有对氨基苯甲酸酯的母体结构通式如下：1、基本结构第一节 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质62022/8/42、对氨基苯甲酸酯类典型药物苯佐卡因(Benzocaine) 盐酸普鲁卡因(Procaine Hydrochloride) 对氨基苯甲酸-2-（二乙胺基）乙酯 盐酸盐 72022/8/4盐酸丁卡因(Tetracaine Hydrochloride) 盐酸氯普鲁卡因(Chloropr

3、ocaine Hydrochloride) 2、对氨基苯甲酸酯类典型药物丁氨基苯甲酸乙酯二甲氨基盐酸盐4-（丁氨基）-苯甲酸-2-（二甲氨基）乙酯盐酸盐82022/8/4抗心律失常药盐酸普鲁卡因胺 说 明： 其化学结构与盐酸普鲁卡因仅存在羧酸酯与酰胺的差异，化学性质与本类药物很相似，故也在此一并列入讨论 。酰胺羧酸酯92022/8/4二、酰苯胺类药物基本结构与典型药物1、基本结构本类药物均系苯胺的酰基衍生物，其结构共性是具有芳酰氨基 结构通式为：102022/8/42、酰苯胺类典型药物盐酸利多卡因(Lidocaine Hydrochloride) 盐酸布比卡因(Bupivacaine Hydr

4、ochloride) 哌啶环丁基1-丁基-2-N-2,6-二甲基苯胺甲酰基哌啶盐酸盐112022/8/4盐酸罗哌卡因(Ropivacaine Hydrochloride) 长效局麻，镇痛。毒性低S-(-)-N-(2,6-二甲基苯基)1-丙基-2-哌啶甲酰胺盐酸盐（或一水合物） 2、酰苯胺类典型药物122022/8/4三、主要理化性质1 芳伯氨基特性2 水解特性3 弱碱特性4 与重金属离子反应特性5 吸收光谱特性6 其他特性132022/8/4三、主要理化性质对氨基苯甲酸酯类药物盐酸丁卡因盐酸氯普鲁卡因对丁氨基苯甲酸对氨基-2-氯苯甲酸142022/8/4酰苯胺类药物三、主要理化性质152022

5、/8/4三、主要理化性质1、芳伯氨基特性 对氨基苯甲酸酯类药物的结构中具有芳伯氨基(除盐酸丁卡因外)，故显重氮化-偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱反应；易氧化变色等。 酰苯胺类药物结构中具有芳酰氨基，在酸性溶液中也可水解为芳伯氨基化合物，而显芳伯氨基特性反应。 162022/8/42、水解特性 对氨基苯甲酸酯类药物因分子结构中含有酯键，故易水解。 影响药物水解反应的快慢因素：光、热或碱性条件 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因 对氨基苯甲酸(PABA) 盐酸氯普鲁卡因 4-氨基-2-氯苯甲酸 盐酸丁卡因 对丁氨基苯甲酸(BABA) 172022/8/43、弱碱性 脂烃胺侧链为叔胺氮原子(除苯佐卡因外)

6、，具有一定碱性，可以成盐； 能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应； 在水溶液中不能用标准酸直接滴定，只能在非水溶剂体系中滴定。182022/8/44、与重金属离子反应特性 因酰苯胺类药物分子结构中酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂而呈色。5、吸收光谱特性 因该类药物分子结构中均含有苯环及相应的取代基与脂烃胺侧链，具有特征的紫外吸收光谱与红外光谱行为。 192022/8/46、其他特性 其游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂； 其盐酸盐均系白色结晶性粉末，具有一定的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。202022/

7、8/4第二节 鉴 别 试 验一、重氮化-偶合反应芳香第一胺类鉴别反应 分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。 212022/8/4直接与亚硝酸钠进行重氮化反应的药物有: 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺 【示例8-1】盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 222022/8/4重氮化-偶合反应一、重氮化-偶合反应232022/8/4说 明：

8、盐酸丁卡因分子结构中不具有芳伯氨基，无此反应，但其分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物的乳白色沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。 一、重氮化-偶合反应242022/8/4二、与金属离子反应与铜离子或钴离子反应 具有芳酰胺+脂肪胺结构（盐酸利多卡因）羟肟酸铁盐反应 具有芳酰胺结构（盐酸普鲁卡因胺）芳酰胺脂肪胺酰胺252022/8/4二、与金属离子反应1、盐酸利多卡因的鉴别方法 ChP2010 取本品0.2g，加水20ml溶解后，取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳酸钠试液1ml，即显蓝紫色配位化合物；加三氯甲烷2ml，振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。 说明：

9、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等，在同样条件下不发生此反应。262022/8/4 其在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。 盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞试液煮沸，显黄色；对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别。272022/8/42、盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法 ChP2010 取本品0.1g，加水5ml，加三氯化铁试液与浓过氧化氢溶液各1滴，缓缓加热至沸，溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。羟肟酸铁盐反应282022/8/4三、水解产物反应 对氨基苯甲酸酯类药物分子中有些具有酯键结构，在碱性条件下可水解，利用其水解产物的特性或与某些试剂

10、的反应可进行鉴别。盐酸普鲁卡因 二乙氨基乙醇 对氨基苯甲酸钠 对氨基苯甲酸苯佐卡因 乙醇 292022/8/4三、水解产物反应盐酸普鲁卡因302022/8/41、盐酸普鲁卡因 ChP（2010）312022/8/42、苯佐卡因 ChP（2010） 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成，加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。 322022/8/4四、制备衍生物测定熔点盐酸丁卡因 （ChP2010、USP34-NF29、BP2010、JP15） 取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80

11、干燥后，熔点约为131。 332022/8/4五、吸收光谱特征1、紫外吸收光谱 取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01 mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释成每1ml中约含0.40 mg的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在263 nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸光度分别为0.530.58与0.430.48。【示例8-2】盐酸布比卡因（ChP2010）342022/8/4【示例8-2】盐酸普鲁卡因胺片 （ChP2010） 取本品的细粉适量，加水振摇使盐酸普鲁卡因胺溶解，滤过，取滤液加水制成每1mL中含盐酸普鲁卡因胺5g的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在280nm的波长处有最大吸收。

12、 352022/8/42、红外吸收光谱 结构复杂，且结构差别较小的化合物-IR法ChP：对照图谱法362022/8/42、红外吸收光谱 图8-1 盐酸普鲁卡因的红外吸收图谱(氯化钾压片)峰位(cm-1)归属3315, 3200NH2(伯胺)2585N+-H(胺基)1692C=O (酯羰基)1645N-H (胺基)1604, 1520C=C (苯环)1271, 1170, 1115C-O (酯基)372022/8/4图8-2 盐酸普鲁卡因胺的红外吸收图谱(氯化钾压片)峰位(cm-1)归属31003500NH2 (酰胺)2645N+-H (胺基)1640C=O (酰胺带)1600, 1515C=C

13、 (苯环)1550N-H (酰胺带)1280C-N (酰胺带)2、红外吸收光谱 382022/8/4练习1 下列哪个药物不能用亚硝钠法进行测定（ ）A盐酸丁卡因 B盐酸普鲁卡因 C苯佐卡因 D对乙酰氨基酚A392022/8/4练习2 盐酸丁卡因在酸性溶液中与亚硝酸钠 作用生成（ ）A重氮盐 BN-亚硝基化合物 C偶氮染料 D偶氮氨基化合物B402022/8/4练习3 盐酸普鲁卡因分子中有 结构，易发生水解。酯键412022/8/4第三节 特殊杂质与检查一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查杂质来源：水解产生对氨基苯甲酸和二乙氨基乙醇 对氨基苯甲酸的化学变化： 结果导致注射液变黄、疗效下降、毒性增

14、加 原料药及注射用灭菌粉末中杂质限量 ： 0.5% 注射液中杂质限量 ： 1.2% 422022/8/4检查方法：HPLC 杂质对照品法流动相 ：0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.0)-甲醇(6832) 检测波长：279 nm 固定相 ：十八烷基硅烷键合硅胶 系统适用性试验： 理论板数按对氨基苯甲酸峰计算不低于2000 盐酸普鲁卡因峰和对氨基苯甲酸峰的分离度应大于2.0 外标法以峰面积计算第三节 特殊杂质与检查一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查432022/8/4第三节 特殊杂质与检查一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查442022/8/4二、盐酸氯普

15、鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查 盐酸氯普鲁卡因在生产和贮藏过程中同样存在稳定性问题，其注射液在一定的灭菌温度、时间和溶液pH条件下，更易发生水解反应，生成4-氨基-2-氯苯甲酸降解产物。 USP34-NF29： HPLC原料药中杂质限量 ： 0.625% 注射液中杂质限量 ： 3.0% 452022/8/4【示例8-4 】盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质及光降解产物的研究检查方法：HPLC/MS色谱条件： 色谱柱：Zobax SB-C18柱 流动相：0.5乙酸水溶液-0.5乙酸乙腈溶液(8713, v/v) 流速：1mL/min 检测波长：254nm，参比波长：360nm质谱条件： 电喷

16、雾正离子化，干燥气(N2)流速9.5L/min，干燥气压力350kPa，干燥气温度350。喷雾电压4kV，传输/裂解电压70V，质量扫描范围80600。462022/8/4图8-3 盐酸氯普鲁卡因注射液中光照前存在的杂质及其质谱图 图8-4 盐酸氯普鲁卡因注射液经光照后产生的杂质及其质谱图 盐酸羟基普鲁卡因472022/8/4三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的检查杂质来源：水解产生检查方法：HPLC 杂质对照品法盐酸利多卡因(Lidocaine Hydrochloride) 2,6-二甲基苯胺482022/8/4三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的检查2,

17、6-二甲基苯胺492022/8/4四、盐酸罗哌卡因的光学纯度检查 盐酸罗哌卡因是一种新颖的长效酰胺类局麻药，与盐酸布比卡因相比，具有更好的安全性以及更广的高、低浓度之间的临床使用范围，主要用于外科手术麻醉和术后镇痛。 盐酸罗哌卡因分子中有一个手性碳原子，存在二个对映体，由于R-盐酸罗哌卡因心脏毒性较大，目前临床上使用的为S-盐酸罗哌卡因对映体。 盐酸罗哌卡因(Ropivacaine Hydrochloride) 长效局麻，镇痛。毒性低502022/8/4毛细管电泳方法： USP34-NF29 规定：供试品中R-盐酸罗哌卡因的限量不得超过0.5% 背景电解质溶液： H3PO4 （pH2.93.1

18、 ） 运行缓冲液 ：背景缓冲液 +2,6-二-O-甲基-环糊精系统适用性溶液：S-盐酸罗哌卡因及R-盐酸罗哌卡因标准品 1、 分析溶液配制供试品溶液：S-盐酸罗哌卡因样品 供试品稀释溶液 512022/8/42、毛细管冲洗过程 毛细管冲洗过程：先用水冲洗1分钟，然后用0.1mol/L的氢氧化钠溶液冲洗10分钟，最后再用水冲洗3分钟。如果使用的是新的或者是干燥的毛细管，则需要延长氢氧化钠溶液的冲洗时间至30分钟。 两次进样分析之间的毛细管冲洗过程：先用水冲洗1分钟，然后用0.1mol/L的氢氧化钠溶液冲洗4分钟，再用水冲洗1分钟，最后用运行缓冲液冲洗4分钟。 522022/8/43、电泳条件与系

19、统适用性试验 石英毛细管柱 ：50m72cm)电泳条件系统温度：30 施加电压：500V/s的速度最后稳定至375V/cm 电流：4045A 检测波长：206 nm 系统适用性溶液电泳分析 ：R-及S-盐酸罗哌卡因的相对迁移时间分别约为0.96和1.0分离度(R)不少于3.7分析时间约为30分钟 供试品稀释溶液的电泳分析： 信噪比不小于10 532022/8/44、 实验步骤 为了确保电泳分离没有干扰峰，分别将运行缓冲液和水以相同体积进样(50mbar5.0s)，然后再将运行缓冲液以50mbar1.0s进样。 式中：rR和rS分别代表供试品溶液中R-盐酸罗哌卡因和S-盐酸罗哌卡因的峰响应值；M

20、R和MS分别代表R-盐酸罗哌卡因和S-盐酸罗哌卡因的迁移时间。 供试品S-盐酸罗哌卡因中R-盐酸罗哌卡因的比例不得超过0.5%。5、 电泳系统关闭 实验分析结束后，分别用0.1mol/L的氢氧化钠溶液和水依次冲洗毛细管柱10分钟。毛细管柱贮藏前必须干燥。542022/8/4练习 盐酸普鲁卡因注射液中应检查的杂质为（ ）A对氨基酚 B对氨基苯甲酸 C对氯酚 D对氯乙酰苯胺B552022/8/4第四节 含 量 测 定一、亚硝酸钠滴定法1、基本原理 具芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基的药物 芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点

21、。 562022/8/4一、亚硝酸钠滴定法572022/8/42、测定的主要条件 （1）加入适量KBr加速反应KBr为催化剂在盐酸存在下，重氮化反应的机理为： NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O582022/8/4592022/8/4 K1 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度。602022/8/4（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸: 1:2.56 加入过量盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果612022

22、/8/4 酸度加大，反应向左进行，故可防止偶氮氨基化合物的生成。若酸度过大，又可阻碍芳伯氨基的游离，反而影响重氮化反应速度。在太浓的盐酸中还可使亚硝酸分解。 芳胺类药物与酸的摩尔比为1（2.56）。 622022/8/4（3）反应温度： 重氮化反应的速度与温度成正比，但是生成的重氮盐又随温度升高而加速分解。 一般地，温度每升高10，重氮化反应速度加快2.5倍，但同时重氮盐分解的速度亦相应地加速2倍；所以滴定一般在低温下进行。由于低温时反应太慢，经试验，可在室温（1030）下进行，其中15以下结果较准确。632022/8/4（4）滴定速度： 先快后慢 滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部

23、分放下，然后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再缓缓滴定 。尤其是在近终点时，因尚未反应的芳伯氨基药物的浓度极稀，须在最后一滴加入后，搅拌15分钟，再确定终点是否真正到达。 642022/8/43、指示终点的方法 （1）永停滴定法ChP（2010）E和E为两个惰性铂(Pt)电极，G为电流计，R与电流计临界阻尼电阻值近似，R1为2k可调电阻，R2电阻值为6070，B为1.5V干电池 用作重氮化法的终点指示时，先将电极插入供试品的盐酸溶液中，调节R1使加在电极上的电压约为50mV。滴定过程中，观察滴定过程中电流计指针的变化。终点前，溶液中无亚硝酸，线路无电流通过，电流计指针指零；终点时溶液中

24、有微量亚硝酸存在，电极即起氧化还原反应，线路中遂有电流通过，此时电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。652022/8/4（2）电位法USP（3）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）内指示剂法中性红 不可逆指示剂662022/8/44、滴定法 盐酸普鲁卡因 ChP（2010） 取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录A），在1525，用亚硝酸钠滴定液（0.1 mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl。【示例8-5 】672022/8/4

25、二、非水溶液滴定法 本类药物中的盐酸布比卡因分子结构含有弱碱性氮原子，具弱碱性 。溶 剂：冰醋酸与醋酐溶液 滴定剂：高氯酸（0.1mol/L ）指示滴定终点方法：电位法 加入适量醋酐的作用： 在冰醋酸与醋酐溶液中，醋酐解离生成的醋酐合乙酰氧离子比醋酐合质子的酸性还强，有利于布比卡因碱性的增强，使滴定突跃敏锐。 682022/8/4【示例8-6 】盐酸布比卡因的含量测定 取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酐20ml溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于32.49mg的C18H28N2

26、OHCl。盐酸布比卡因非水滴定法反应过程如下：692022/8/4【示例8-7 】盐酸丁卡因的含量测定 ChP2010采用乙醇作为溶剂的非水溶液酸碱滴定法 取本品约0.25g，精密称定，加乙醇50mL振摇使溶解，加0.01 mol/L盐酸溶液5mL，摇匀，照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定，两个突跃点体积的差作为滴定体积。每1mL氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于30.08mg的C15H24N2O2HCl。702022/8/4三、紫外分光光度法【示例8-8 】紫外分光光度法测定注射用盐酸丁卡因的含量 （ChP2010） 取本品10瓶，分别加水溶解，并分别定量转移至25

27、0ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取盐酸丁卡因对照品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液与对照品溶液各3ml，分别置于100ml量瓶中，加盐酸溶液(1200)5ml与磷酸盐缓冲液(pH 6.0)(取磷酸氢二钾20g与磷酸二氢钾80g，加水溶解并稀释至1000ml，用6mol/L磷酸溶液或10mol/L的氢氧化钾溶液调节pH至6.0)10ml，用水稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在310nm的波长处分别测定吸光度，计算每瓶的含量，求出平均含量，即得。712022/8/4四、高效液相色谱法【示例8-9 】

28、盐酸利多卡因注射液的含量测定 （ChP2010）色谱条件：系统适用性试验：固定相：C18流动相：磷酸盐缓冲液（pH8.0）-乙腈(5050) 检测波长：254nm 理论板数按利多卡因峰计算不低于2000 722022/8/4测定法： 精密量取本品适量(约相当于盐酸利多卡因100mg)置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20L注入液相色谱仪，记录色谱图；另取利多卡因对照品约85mg，精密称定，置50mL量瓶中，加1mol/L盐酸溶液0.5mL使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算，并乘以1.156，即得。732022/8/4练习A742022/8/4练习

29、盐酸丁卡因和盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性，均可采用_滴定法测定含量。 非水溶液752022/8/4练习在亚硝酸钠滴定法中，加入适量溴化钾的作用是（ ）A增加亚硝酸钠的稳定性 B防止生成的重氮盐分解 C防止亚硝酸的逸失 D加速重氮化反应的速度D762022/8/4练习C772022/8/4练习 加入过量盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果亚硝酸钠滴定法中为什么要加入过量的盐酸？ 782022/8/4第五节 体内药物分析 盐酸普鲁卡因、盐酸利多卡因、盐酸丁卡因和盐酸布比卡因是目前临床应用最多的局麻药物。由于这些药物均具有一定的毒副

30、作用，加之其在临床应用甚为广泛，因此对其进行治疗监测一直为人们所重视。792022/8/4【示例8-10 】 HPCE测定人血浆中的普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因 实验方法： 毛细管依次用1mol/L NaOH、0.1mol/L NaOH、蒸馏水各冲洗2分钟，再用运行缓冲溶液冲洗4分钟。每次分析后需用运行缓冲溶液冲洗2分钟，再进行下次分析。电泳分离条件： 40mmol/L的H3PO4-Tris缓冲体系(pH 5.0)，石英毛细管59.0cm(有效长度50.8cm)70m(id)，柱温18，压力进样3kPa5秒，工作电压20.0V，检测波长220nm。802022/8/4样品处理与测定： 精密吸取含药血浆0.2mL，置2mL具塞刻度离心管中，加入1mol/L NaOH 0