OATP基因多态性教学内容

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。OATP基因多态性-OATP转运及其对肠道吸收和药物的肝处置影响的遗传多态性。摘要：有令人信服的证据表明，许多有机阴离子转运多肽转运影响药代动力学和它们的底物药物的药理功效。每个OATP家族成员都有一个组织分布，底物特异性和基因表达机制的独特组合。在它们之中OATP1B1,OATP1B3和OATP2B1被认为是多种临床上重要药物的药代动力学的关键分子的决定性因素。OATP1B1和OATP1B3的肝特异性表达有助于来自门静脉的药物的肝摄取，而且OATP2B1可能会改变他们的肠道吸收和肝脏提取。从而，这三个

2、OATP的功能和表达的变化可能由于基因多态性导致药理作用改变，包括降低药物的疗效和增加不良反应的风险。OATP基因的基因多态性和底物药物药代动力学性质的变化的关联已经被报道；然而，在不同临床环境中所报道的结果之间还存在一定程度的偏差。为了更好的理解OATP1B1，OATP1B3和OATP2B1基因多态性的临床意义，这次研究的重点是这些OATP基因型和体外活性变化的关系以及底物药物在体内的临床结果。介绍众所周知药物的理化性质，如分子量，亲脂性，电荷和PKA，以及氢键的能力，影响细胞膜的通透性，不论穿过细胞膜药物转运的机制，在物理化学特性，因为这两个简单扩散和载体介导的运输可能会同样受到这些因素的

3、影响。过去二十年积累的证据表明，转运蛋白参与了许多临床使用药物的吸收、处置和消除，参与药物转运穿过肠、肾和肺上皮细胞、肝细胞、脑毛细血管内皮细胞和癌细胞的细胞膜(1-4)。最近Kell等人的一篇文章假定所有药物在体内的膜渗透主要是占了运输的贡献，非特异性被动扩散的贡献微乎其微(5)。因此，重要的是要懂得在体外细胞培养中测得的转运蛋白介导的转运特性的药物，如何与药代动力学性质关联，如肠道吸收，组织分布和排泄，即使药物运输是不太可能的唯一决定因素的体内药代动力学性质。此外，也有在转运曲线和特征的显著物种差异，所以实验数据外推到人类是困难的。然而，药物基因组学方法的遗传变异转运蛋白基因与功能改变和体

4、内药代动力学相关性可至少可以暴露出特定的转运蛋白分子的临床相关性。进一步来说，这样的信心对于评估药物和候选药物的药代动力学个体间的差异是有用的，也能由于药物-药物的相互作用、疾病和老化，从体外研究的结果预测药物动力学的变化。因此，更好的了解OATP1B1/SLCO1B1,OATP1B3/SLCO1B3,和OATP2B1/SLCO2B1基因的基因多态性对底物药物的药代动力学特征的影响可能使我们不仅能够改善药物输送来获得有较少不良反应的更好的药理作用，也可能为药物发现和开发提供线索。本次审查中描述表达在肝脏和小肠的OATP1B1,OATP1B3和OATP2B1转运蛋白的药物基因组学研究的现状并讨论

5、了进一步发展的前景。OATP转运大鼠OATP基因在1994首次被确定为是编码钠无关的有机阴离子转运系统的基因，在基底外侧（正弦）膜的肝细胞通过肝脏进入血液和分泌到胆汁对某些有机阴离子，如胆汁酸，胆红素和磺溴酞钠有摄取功能(6)。随后，许多人类和啮齿动物OATP/Oatp转运分子已经被隔离和OATP/Oatp家族目前包括人类，大鼠和小鼠40多个成员（7）。OATP也参与药物肠道吸收。我们已经证明，某些表现出pH依赖性转运活性的阴离子参与一元羧酸的渗透，例如苯甲酸和普伐他汀，跨肠细胞的顶膜渗透（8-12）。我们最初建议单羧酸转运的MCT有助于这种吸收运输。的确，MCT1可占乳酸和烟酸的吸收运输的一

6、部分，但并未参与各种其它底物的吸收，如普伐他汀（13）。在这些研究中，我们也发现某些表现出对阴离子性药物的广泛的底物选择性的OATPs，被表达在上皮细胞在人小肠的顶膜（14、15）。但是，与药物的肝运输相反，阴离子药物从小肠吸收已普遍在基于pH分配学说的简单扩散的传输机制来解释，而且不容易在人体内建立OATP的体内贡献转运药物吸收。然而，对转运蛋白基因的遗传多态性和相关功能的改变在药物运输的影响进行的研究有望为体内相关性提供有力证据。在人体中，12SLCO转运蛋白基因已被确定具有不同的组织表达模式，如表1所列。最近OATP的系统分类和命名的形式（OATP，SLCO）+（数字）+（字母）+（数字

7、）如OATP1A2（SLCO1A2）已经被广泛接受。人类OATP组织表达谱从在特定组织选择性表达到组织中普遍表达的表达范围（14）。在OATP中，OATP1B1，OATP1B3和OATP2B1在肝细胞基底膜表达（16-18）。OATP1B1和OATP1B3只在肝脏表达，而OATP2B1在很多组织内表达包括肝脏，小肠，胎盘和肌肉。另一方面，第一个在人肝脏进行分子鉴定的OATP分子OATP1A2在脑部表达更丰富（19、20）。OATP2B1和OATP1A2蛋白质定位于人类肠的顶膜15,21，但OATP1A2的表达谱是有争议的，据报道它在小肠组织中的表达可以忽略不计22。在功能上，这些OATPs接受

8、许多药物作为底物在临床上的使用，以及内源性物质，它们的药代动力学与人体肝药物处置的相关性是确认的。因此，OATP1B1和OATP1B3有可能对肝基底吸收是最重要的，而OATP2B1很可能是对小肠药物吸收重要。OATP1B1OATP1B1最初被隔离在人体肝脏14、17、23，并因为在肝脏的独有表达被指定为是肝特异性转运蛋白123。它也被称为OATP-C或OATP2（表1）。它已被表征为一个流入转运的内源性物质，特别是多个类的阴离子化合物，包括共轭类固醇如雌二醇-17-葡糖苷酸（E17G），雌酮-3-硫酸酯（E3S）14，和脱氢表雄酮硫酸酯（DHRAS）24，二十烷酸和甲状腺激素23，以及外源性化

9、学物质和许多化疗药物25。主要底物在表2中列出。我们第一次发现OATP1B1负责伊立替康的主要活性代谢产物SN-38的肝处置，因为OATP1B1基因多态性促进了伊立替康的配置已知的可变性2627。OATP1B1是目前公认的其他临床上重要的化疗药物，包括夫拉平度28，甲氨蝶呤29和阿曲生坦30的转运体。OATP1B1因此是一个有助于肝提取多样化和门静脉药物的关键肝窦的吸收转运。因此，SLCO1B1基因的多态性导致明显的功能改变可能影响药物在临床上使用的体内药代动力学曲线。基因多态性对OATP1B1体外转运活性的影响：由于我们实验室首先报道的单核苷酸多态性c.388AG和SLCO1B1的c.521

10、TC14，无数个SNP被发现，总结在表3和图1。Tirona等人报道在42个欧洲裔美国人和22个非裔美国人的SLCO1B1编码区有14个单核苷酸多态性：c.463CA(P155T),c.455GA(R152K),c.721GA(D241N),c.1463GC(G488A),c.217TC(F73L),c.245TC(V82A),c.4671G(E156G),c.1058TC(1353T),c.1294AT(N432Y),c.1385AG(D462G),c.1964AG(D655G),和c.2000AG(E667G)(表3)，虽然后来c.455GA和c.721GA被证明是不保守的单核苷酸多态性3

11、1。这些研究者还发现17SLCO1B1等位基因基于单体型分析和通过*14指定它们作为SLCO1B1*1（a，b，c）;SLCO1B1*1a被记为野生型等位基因;GenBank登录号为AJ132573。他们通过测量变种表达的HeLa细胞的E3S和E17G的摄取进一步研究了由这17个不同的等位基因编码的变异体OATP1B1的转运活动。两个基板的吸收显著低于野生型OATP1B1*在细胞中表达OATP1B1*2（F73L）1A，*3（V82A和E156G），*5（V174A），*6（1353T），*9（G488A），*12（F73L和D655G）和*13（V82A，E156G，和E667G）。有趣的是

12、，减少的OATP1B1*2，*3，*5，*6和*9的细胞膜表达水平与减少的Vmax/Km值很好地对应，这表明这些单SNP可以OATP1B1底物的药物在体内的药代动力学的因素。类似地，由OATP1B1变异型进行的利福平运输在表达OATP1B1*2，*3，*5，*6，*7（N432Y）*9（G488A），*11（E667G），*12，*13和*14（N130D和P155T）的细胞中减少32。我们研究了E3S转运活性和在HEK293细胞中表达的c.388AG（*1b）和c.521TC（*5）的膜定位。c.388AG（*1b）和c.521TC（*5）与*1a相比往往分别表现出增加及减少的活性，但这些变

13、化在统计学上没有显著意义2633。免疫细胞化学研究中，OATP1B1*1b和*5表达主要在细胞膜检测到而且基因突变没有影响这一点33。这个结论是由Iwai等人的证实的，他们发现与HEK293细胞OATP1B1*1A相比，OATP1B1*1B（N130D）和OATP1B1*5（V174A）的E17G运输活性无变化34。然而，有两个氨基酸取代（N130D和V174A）的OATP1B1*15的活性减少了70以上，但其质膜表达与OATP1B1*1a相差无几。Kameyama等人的报道称，通过HEK293和HeLa细胞表达OATP1B1*5，*15和*15+c.1007CG介导的E3S和E17G运输有了

14、显著下降35。与OATP*15变体摄取量减少一致，我们观察到通过OATP1B1*15在非洲爪蟾卵母细胞的表达，普伐他汀，抗癌药物的SN-38，E3S和E17G摄取量的一个显著下降26。OATP1B1*15的蛋白表达是局部的不仅在质膜，也可在细胞内的空间，转运活性的这种降低可能是由于OATP1B1变体蛋白质的分拣到质膜的缺陷35。另一项研究表明，BSP和E3S由野生型OATP1B1转CO1细胞摄取比OATP1B1*5转染的细胞高出4036。因此，研究的细胞系的功能活性和N130D和V174AOATP1B1变异蛋白的细胞内定位的不一致性已经被报道。SLCO1B1基因多态性对OATP1B1底物药物的

15、体内药代动力学的影响：多项研究表明肝特异性OATP1B1是肝摄取各种药物及其药代动力学一个关键因素。因此，改变的功能和/或OATP1B1的细胞内定位，由于遗传多态性可能显著影响OATP1B1底物的药物的药代动力学。其中OATP1B1变体，2个SNPs，N130D和V174A被观察到在不同人群具有相对较高的频率，并且已经报道改变OATP1B1底物的肝摄取。OATP1B1*15，同时含有N130D和B174A突变，显示当它被表达在非洲爪蟾卵母细胞中，SN-38和普伐他汀，以及一个探针底物，E3S输送活性的显著下降，来确认OATP1B1的基因多态性对药物处置间变异的实质性影响。26OATP1B1基因

16、型对普伐他汀的药代动力学的的显著影响最初是由Nishizato等人描述的，他们分析具有不同OATP1B1基因型日本受试者口服10mg单剂量普伐他汀后的药物动力学参数37。普伐他汀总的和肾外清除率在SLCO1B1*15的杂合等位基因(*1b/*15b)生物体与*1b的纯合的等位基因比较显著减少；药代动力学参数如表4。在受试者与*15/*15的基因型，普伐他汀的AUC与受试者纯合的*1a中（野生型OATP1B1）相比增加了近2倍。因为OATP1B1的减少运输活动，这可能与总的和肾外清除率的减少相关联37。随后，这种观察报告通过Niemi等人的对41个健康白人志愿者的的研究被证实，Niemi等人发现

17、SLCO1B1*15和*17的杂合子携带者的AUC与非携带者比较分别增加了1.9和2.3倍。因为可能c.521TC突变与c.388AG有关联37，这种基因型可能是OATP1B1基板药物的药代动力学更为重要的决定因素，特别是在等位基因频率相对于其他人口比较高的日本。3940此外，c.388AG多态性已显示能影响的临床上重要的药物的药代动力学。与野生型*1a相比SLCO1B1*1b的载体倾向于具有较低的口服生物利用度3741。重要的是，没有普伐他汀的充分表征的转运体MRP2的多态性与普伐他汀血浆浓度的改变相关联，这清楚地表明OATP1B1在普伐他汀的肝摄取的主导作用并是普伐他汀血浆浓度的决定性因素

18、38。因此，这些单基因突变可能可以信息预测普伐他汀改变血药浓度。据报道，口服缬沙坦，替莫普利和匹伐他汀的血浆浓度和平均AUC与普伐他汀一样，在纯合体SLCO1B1*1b/*1b中比在那些野生型*1a/*1a低4243。这些药物血浆浓度的降低可能是由于肝脏因为c.388AG突变通过N130DOATP1B1变种对这些药物的摄取增加，这与之前报道的E3S通过OATP1B1*1b增加摄取清除率一致31。另一方面，c.521TC的单一多态性可能增加底物药物的血药浓度。相对于那些与野生型*1a/*1a，有SLCO1B1*5倍单体型的受试者对口服普伐他汀41和非索非那定44显示出更显著更高的AUC。此外，在

19、用了洛匹那韦/利托那韦的400个人中，据报道该c.521TC多态性与口服洛匹那韦较高的血药浓度相关。另一项研究表明，OATP1B1c.521CC或c.521TC基因型的受试者与那些c.521TT比较，托拉塞米的总清除率显著降低46。考虑到由本OATP1B1变体介导的底物转运已经一致被报道，以减少在体外表达模型，观察到SLCO1B1*5倍型受试者可能由于普伐他汀滞后肝清除使普伐他汀的生物利用度增加。因此，c.388AG和c.521T多态性对药物的药代动力学有相反的影响。OATP变体也已经显示影响的其他临床上重要的药物的药代动力学。依泽替米贝葡糖苷酸被鉴定为OATP1B1和OATP2B1的底物，而

20、且表达OATP1B1*1b和*5变体的细胞对依泽替米贝葡糖苷酸的摄取显著降低。因为体内的研究表明SLCO1B1*1a/1b基因型参与者与SLCO*1a/*1a相比依泽替米贝AUC降低，这个SNP可能是依泽替米贝的药代动力学个体间差异的原因。类似地，OATP1B1c.521多态性可能与降低2型糖尿病药物的全面暴露相关联，如瑞格列奈和那格列奈。与521TC或521TT基因型（PA和c.521T载体多态性与普伐他汀系统性暴露降低有关，尽管这种明显矛盾的作用机制还需要进一步调查50。除了普伐他汀，OATP1B1*15变种对匹伐他汀但不是氟伐他汀的转运活性，在体外转运研究降低51。因此，与那些具有野生型

21、基因型进行比较，SLCO1B1*15受试者改变运输活性可能与匹伐他汀清除率的减少有关。辛伐他汀酸的药代动力学的改变和OATP1B1基因型之间的关系进行了研究52。辛伐他汀酸的血浆浓度在携带SLCO1B1等位基因和c.521TC多态性的受试者体内显著增加，这可能增加的不良影响的危险，并减少辛伐他汀酸的药理学活性。然而，不存在这种改变的母体化合物，辛伐他汀。因此，目前的证据表明，OATP1B1在他汀类药物的肝处置中起着作用，并且可能参与了其不良影响。他汀类药物引起肌病或横纹肌溶解症是他汀类药物不耐受及停药的重要临床原因。已经报道一个变异等位基因经常在普伐他汀或阿托伐他汀治疗后肌病患者被发现53。较

22、新的全基因组关联研究显示，一个非同义多态性c.521TC的与他汀类药物引起肌病的风险增加的明显的强关联5455。他汀类药物的这种副作用可以在有c.388AG多态性的载体上，由于其转运活性的增强导致生物利用度降低得到缓解。的确，N130D与他汀类药物不耐受性降低被报道在一个4196例2型糖尿病患者接受他汀类药物的临床研究中。此外，在SLCO1B1，c.1628TG外显子12的另一个非同义多态性被发现与用普伐他汀引起的肌病有关联，尽管在日本人群中等位基因频率低于157。该OATP1B1变种后来证明由于转换率的降低显示出活性的减少58。在大鼠中，骨骼肌肌纤维Oatp1a4和Oatp2b1，两者均作为

23、底物接受普伐他汀，促进普伐他汀诱导的空泡化和细胞死亡59。因此，由于遗传多态性引起OATP1B1的功能受损造成较高的系统性风险可能会导致他汀类药物引起肌病的发生率较高。单核苷酸多态性和单倍型和种族差异的等位基因频率：在SLCO1B1基因的不同变异体已经确定，并在不同种族人群的等位基因频率已经确定60。主要的遗传多态性及其等位基因频率列于表3。在非裔美国人中最常见的多态性是c.388AG（74），c.2000AG（34），和c.1463GC（9），而c.388AG（30），c.463CA（16），并c.521TC（14）为欧洲裔美国人普遍31。我们报道日本267名健康受试者的SLCO1B1*1b

24、（53.7）和SLCO1B1*15（10.3）相对较高的等位基因频率：28和3的人口分别为纯合子*1B（1B*/*1B）和*15（*15/*15）等位基因33。12到18个不同的单倍型分别报告了中国、马来和印度族群61。c.388AG的等位基因频率三个群体中最高的，分别为：79.5，87和57。含c.521T的等位基因在中国人（13）中是最常见的，其次为马来人（11）和印度（6.5）。对中国人SLCO1B1多态性的另一项研究中取得的c.388AG和c.521TC变异等位基因的频率相似，分别为：73.4和14.062。在SLCO1B1*1b和*15单倍型的频率分别为59.9和14.062，这与日

25、本的频率是一致的3337。Pasanen等人观察到SLCO1B1的序列变异经常发生在人口众多的白种人60。在这项研究中，单倍型分析显示最常见的单倍型包含c.571TC的同义多态性。虽然OATP1B1变体并不功能改变，c.521TC已被报道功能显著。这个SNP检测到4种单倍型，被指定为SLCO1B1*5，*15，*16和*17，这是由SNP-11187GA，-10499AC，c.388AG和c.521T分化;*16和*17单倍型频率分别为7.9和6.9。德国，土耳其和非洲人群中SLCO1B1高度的序列变异进行了报道63。在所有三个种群最经常发现的SNP是c.388AG，这个SNP在德国人，土耳其

26、人和非洲人等位基因频率分别为36.5，46.3和77.8。德国人的含c.388AG等位基因的频率与欧洲的美国人31是相似的，但比白种人60，或土耳其63人略低。有趣的是，亚洲人群SNP的等位基因频率高于欧洲人群约2倍。频率甚至高于非洲人口：77.863和75.031。此外，这些研究人员发现新的等位基因变异体，从而提出了新型的OATP1B1的单倍型组织。遗传变异和单体型频率需要进一步的研究，以达到更好地了解一系列药物的基因型-表型相关的重要转运蛋白的药代动力学。OATP1B3OATP1B3是作为肝特异性转运体2从人肝分离1664，并且其特征为胆汁酸和激素结合物的内流转运蛋白，包括E17G，E3S

27、和DHEAS6566。OATP1B3的底物列于表2。目前的证据表明，OATP1B3是各种临床上重要药物包括替米沙坦67，紫杉烷类68，和伊马替尼69的肝摄取决定因素之一。基因多态性对OATP1B3体外转运活性的影响：SLCO1B3基因多态性被初步认定为是使用OATP1B3cDNA序列为模板的公共数据库搜索的结果。SLCO1B3基因的主要SNP概括在表5和图2中。Letschert等人最初发现SLCO1B3基因在欧洲的白人受试者的3序列变异;这些都是c.334TG(等位基因频率为74%)，c.699GA（71%）和c.1564GT（1.9%），分别编码OATP1B3S112A，M2331，和G5

28、22C66。Tsujimoto等人的对79日本志愿者的研究揭示了在位置-28至-11和-7至-4，以及两种常见的SNP的5-调控区的两个缺失多态性70。在芬兰的白种人，三非同义SNP位点c.334TG，c.699GA和c.767GC，报告等位基因频率分别为77.0，76.9和12.871。近日，Schwarz等人确定了14个SNP，其中包括7在不同种族人群中的SLCO1B3基因的编码区的非同义多态性，并研究了6变异等位基因，c.1559TG（S112A），c.699GA（M233I），c.439AG（G256A），c.1559AC（H520P）和c.1679TC（V560A），以及含有S112

29、A和M233I一个单倍型等位基因编码的OATP1B3变体的转运活性72。Letschert等人报告S112A和M233I变体的不变转运活性，相比于野生型OATP1B3，在HEK293细胞中用6种不同的底物，BSP，E17G，牛黄胆酸，缩胆囊素-8，DHEAS和E3S66。然而，所有6个底物在表达c.1564GT（G522C）变种的HEK293细胞中的转运显著下降66。另一项研究表明，相比于野生型，在表达OATP1B3变体M233I，H520P，和V560A的HeLa细胞中，胆囊收缩素-8和瑞舒伐他汀的摄取显著降低；在那些细胞系中阿托伐他汀的摄取不变72。H520P和V560A变异体总蛋白表达明

30、显低于在HeLa细胞中表达的其他变种。这些结果似乎与M233I变异体的转运活性不一致。因为G522C变体的不同蛋白质的表达在HEK293和MDCKII细胞66之间被报告，观察到的OATP1B3M233I变异体的不同转运活性，可能是由于蛋白质表达，而不是变体的功能。OATP1B3的SNP对OATP1B3底物药物的药代动力学，频率和单核苷酸多态性的种族差异在体内的作用：OATP1B3底物的药物与SLCO1B3基因的基因多态性的药代动力学的关系已经对几组不同种族人群进行研究。Smith等人报道称，无论非同义单核苷酸多态性c.334TG和c.699GA，或任何由SLCO1B3的两个SNP差异化的套型中

31、，与6个民族总的或未结合的紫杉醇的清除率有关，虽然这些多态性对紫杉醇在其他种族人群药代动力学的临床影响有待进一步解决73。Tsujimoto等人发现在日本健康受试者70的SLCO1B3的5-调控地区的两个缺失多态性，并报告说，地高辛的血药浓度-剂量率显著高于携带含有两个c.334TG和C.699GA变体的单倍型等位基因血液透析患者，但与其它单倍型相比没有删除的调控元件74。这些SNPs是否影响地高辛运输OATP1B3还有待澄清。自OATP1B3被确定为主要化学治疗剂多西他赛68的有效转运体，已经研究OATP1B3的遗传多态性与多西他赛药代动力学的关系。到今天为止，没有已知的OATP1B3编码区

32、多态性明确与多西他赛的药代动力学改变相关7576。在对鼻咽癌患者的研究中，对于699GA纯合子表现出多西他赛略高的Cmax和AUC和减少的清除率，但无显著统计学差异75。有趣的是，有纯合变异等位基因的IVS12-5676AG患者与那些纯合子基因型患者相比，多西他赛的AUC显著增加了1.6倍，而清除率相应下降1.6倍。而另一项研究发现这种变化也影响了多西他赛引起接受化疗77的病人白细胞/中性粒细胞减少，OATP1B3介导的多西他赛的转运很可能是由序列变异引起受损。然而，该机制还有待研究。血管紧张素II受体拮抗剂替米沙坦，也是OATP1B3的底物。一份报告表明，IVS12-5676AG杂合子，替米

33、沙坦的AUC与在野生型等位基因的纯合子相比有所降低78。但是在另一份报告中，观察到在任何替米沙坦的药代动力学参数方面没有关于SLCO1B3基因多态性的基因型之间的差异。SLCO1B3c.334TG和c.699GA主要的等位基因是G和A的几个种族人群，包括欧洲/高加索人717375，墨西哥人73，日本人7079，中国人7375和印度人75。然而，这两个SNP位点的等位基因频率在非洲裔和加纳的人群73具有可比性。IVS12-5676AG的变异等位基因频率被发现在中国和马来人为18，但这等位基因未在白种人75中找到，而c.767GC变体的等位基因频率在白种人中为19，但等位基因没有在亚洲人群中找到。

34、其他变异等位基因只在白种人7576被发现。OATP2B1我们已经报道，OATP2B1表达在小肠以及其它组织，如肝，肺和卵巢，其底物选择性是类似的，但是广泛小于OATP1B11480。它被证明是存在于肝细胞中的正弦膜和肠上皮的顶膜2,15,18。有趣的是，它显示出pH依赖的转运体在酸性pH下活性增加，由于管腔小气候pH为弱酸性，这将导致在肠腔更高的转运活性81。OATP2B1的主要底物列于表2。基因多态性及其对功能的影响在2002年首次被作者33报道，随后这些遗传多态性对药物的药代动力学在体内的相关性已被证明。遗传多态性对OATP2B1体外转运活性和变种的频率的的影响：很少有对SLCO2B1基因

35、多态性的体外评价的报道。表6和图3显示SLCO2B1基因变异中的非同义突变。这些遗传变异体中，具有能导致氨基酸改变S486F的突变c.1457CT的SLCO2B1*3，在表达的变体的HEK细胞中表现出转运活性的降低82。当SLCO2B1基因在培养的细胞中表达，E3S由OATP2B1*3的摄取活性降低到校正后的野生型基因型表达OATP2B1的蛋白质的42。这种变化被解释为亲和力的变化可以忽略不计的Vmax的下降，也就是说，Km为2.97uM（*1）和2.31uM（*3）。另一方面，OATP2B1*3显示罗苏伐他汀的转运活性比在HeLa细胞中表达的野生型OATP2B1更高83。因为在有SLCO2B

36、1*3的基因型的个体84观察到非索非那定的肠吸收减少，OATP2B1*3的转运活性的降低相对于野生型可能临床意义重大。但是，也有可能是OATP2B1对不同的底物的蛋白可以具有多个结合位点，如在OATP1B1的情况下观察到的80，在这种情况下，遗传多态性对转运活性的影响可能在底物之间是可变的。另一个变体，导致氨基酸改变T392I（SLCO2B1*2）的c.1175CT，在HEK293细胞中与野生型相比较显示出E3S的摄取略有下降33。OATP2B1的其他变种，如c.43CT（P15S），c.601GA（V201M）和三个氨基酸缺失（26-28，QNT），有可能对瑞舒伐他汀摄取活性减少，但完整细节

37、不详83。会导致OATP2B1（R312Q）的非同义突变的c.935GA也存在，但其对体外转运活性的影响还没有被研究。SLCO2B1变体的基因频率被总结在表6.在日本没有观察到SLCO2B1*2等位基因而且没有关于它的频率的报告。在日本。研究最多的变体SLCO2B1*3的等位基因频率为30.9，有10.1，纯合子（SLCO2B1*3/SLCO2B1*3）和41.6的杂合子（SLCO2B1*1/SLCO2B1*3）。相比于芬兰人的SLCO2B1*3的频率（2.8），日本人的频率相对高，所以有一个种族差异。c.935GA（R312Q）在芬兰人中观察到，高加索和非洲裔人群中频率分别为13.6，8和1

38、385。在日本，该等位基因频率为32.8。c.601GA（V201M）被发现在2.1的芬兰人口中71。3-氨基酸删除突变在有6.8的等位基因频率的日本人中观察到。在OATP2B1的SNP对OATP2B1底物药物的药代动力学的体内影响：在日本人体内研究，引起氨基酸改变OATP2B1的S486F的c.1457CT的基因型SLCO2B1*3，对非索非那定口服后的药代动力学的影响84。有基因型CC，CT和TT的受试者在60毫克的剂量下AUC分别为1962，1088和1136毫微克*小时/mL。血浆Cmax值分别为343，224和179ng/mL，而达到Cmax的时间Tmax（分别为1.5,1.5和1.8小时）和清除率（分别为0.6,1.0和0.8升/小时/千克体重）在三种基因型间进行比较。相应地，在两个基因型之间的非索非那定的药代动力学性质的差异可通过遗传多态性归因于肠道吸收的改变。口服给药后的-肾上腺素受体阻滞剂塞利洛尔的血浆浓度，同样受基因型SLCO2B1*3的影响86。在100毫克的治疗剂量下，CC的野生型纯合子显示出最高的血浆浓度，随后的CT杂合子和TT突变体纯合子。有趣的是，这样的塞利洛尔血浆浓度的基因型效应没有在微剂量水平（37