医学资料4.消毒灭菌与噬菌体(人卫8版)

1、内容第五节 抑制或杀死微生物的理化因素精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 利用理化因素对微生物的影响进行消毒灭菌，是防止其污染或传播的重要措施精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日本节重点与难点 1. 掌握消毒、灭菌、无菌、防腐、无菌操作的概念2. 掌握热力灭菌的种类、原理及应用范围;湿热与干热灭菌法的比较；巴氏消毒法3. 掌握紫外线杀菌的原理及特点；滤过除菌的应用4. 熟悉影响消毒剂作用的因素精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日杀死物体上病原微生物,不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物 消毒disinfection灭菌sterilization无菌ase

2、psis防腐antisepsis防止或抑制体外细菌生长繁殖不含活菌杀死物体上的所有微生物无菌操作一、消毒灭菌的常用术语精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日二、物理消毒灭菌法 热力灭菌法 辐射灭菌法 滤过除菌法 干燥低温抑菌法精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日一）热力灭菌法1. 杀菌机制 有干热和湿热两大类灭菌法 损伤机制复杂菌体蛋白凝固变性精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日同一温度下湿热比干热灭菌效果好 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热2. 灭菌效果精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日3.干热灭菌法 焚烧：直

3、接点燃物品或将其置于焚烧炉内，最彻 底的灭菌法，适用于废弃物品或动物尸体灭菌 烧灼：直接用火焰灭菌，适用于接种环或试管口灭菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 干烤：利用干烤箱，加热160-180 2小时，适用 于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 红外线：利用电磁波的热效应灭菌，其热效应只 在照射表面产生。多用于医疗器械灭菌 微波：利用高频电磁波的热效应灭菌，其热效应 有一定穿透性。用于食品、药品、非金属 器械及其他物品灭菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的特定微生 物,用于牛奶、

4、啤酒等消毒4. 湿热灭菌法 煮沸消毒法：100水煮5min-2hr,用于餐具和小手 术刀剪的消毒61.1-62.8 30分71.7 30秒精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 高压蒸汽灭菌法 医学上最常用、最有效的灭菌方法，灭菌温度取决于蒸汽压力。 利用高压蒸锅，在103.4kPa蒸汽下，温度达121.3维持15-20min，杀死包括芽胞在内的所有微生物。用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 流通蒸汽消毒法： 利用100 水蒸汽，经15-30min 杀死繁殖体，不能将芽胞全杀死 间歇蒸汽灭菌法： 反复多次流通蒸汽间歇加热以达 到灭菌目的。适用

5、于不耐高温的 含糖、牛奶等培养基的灭菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 波长200-300nm的紫外线能干扰细菌DNA的复制与转录而杀菌二）辐射杀菌法1. 紫外线 穿透力较弱，常用于空气及物品表面消毒 损伤人体皮肤黏膜，注意自我防护 DNA损伤的修复精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日2. 电离辐射包括高速电子、X射线和 射线 有较高的能量和穿透力 干扰DNA合成，破坏细胞膜 大量一次性医用塑料制品 食品、药品、生物制品 精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 利用滤菌器的机械性阻挡，除去液体或空气中的细菌 主要用于血清、毒素、抗生素、酶制剂等不耐热的液体

6、及空气等的灭菌 三）滤过除菌法精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日1. 滤菌器硝基纤维素膜制成，孔径0.1-0.45m 滤膜滤器 玻璃滤器 Seitz滤器玻璃细砂压成滤板，镶嵌在玻璃漏斗中金属制成，中间嵌石棉滤板精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日2 . 影响过滤的因素 介质类型 细菌种类 细菌数量 使用压力、过滤时间、室温等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日3 . 生物洁净技术（HEPA） 初、中、高三级高效分子空气过滤器，除去0.5-5m的尘埃，并采用合理气流方式以洁净空气 生物洁净室装有高效或亚高效过滤系统，如无菌护理室，无菌手术间等精品医学资料 欢

7、迎下载2021/7/18 星期日 低温状态下真空抽去水分 主要用于菌种保藏 可存数年到数十年四）干燥与低温抑菌法冷冻真空干燥法精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日一）杀菌机制 使菌体蛋白凝固变性 改变细胞膜通透性，使胞内含物逸出 干扰细菌的酶系统及代谢如酚类、醇类、酸碱类等如表面活性剂、脂溶剂等如重金属类、某些氧化剂等三、化学消毒灭菌法精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日二）常用消毒剂种类1.醇类 除去细胞膜中脂质，使菌体蛋白变性 乙醇、异丙醇2.酚类 低浓度破坏细胞膜，高浓度凝固菌体蛋白 石碳酸、来苏、氯已定等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日3.重金属

8、类 使菌体蛋白变性或沉淀；灭活细菌酶蛋白 红汞、硫柳汞、硝酸银等4.氧化剂 依靠氧化作用灭活细菌酶蛋白 过氧化氢、过氧乙酸、高锰酸钾、卤素等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日5.表面活性剂 降低液体表面张力，乳化油脂，发挥清洁作用 改变胞壁通透性，使胞内容物溢出，呈现灭菌作用 苯扎溴安、度米芬等6.烷化剂 灭活细菌酶蛋白 甲烷、戊二醛、环氧乙烷等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日三）按杀菌能力分类 高效消毒剂 中效消毒剂 低效消毒剂用于进体内的物品，包括氧化剂、醛类、环氧乙烷等用于进入腔道的器材，包括含碘消毒剂、醇类等用于体表及外环境，包括表面活性剂、高锰酸钾等精品

9、医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日四）消毒剂的应用消毒剂常用浓度 适用范围含氯消毒剂有效氯量2-5mg/L饮水过氧乙酸0.2%-0.5%皮肤、物体表面、空气戊二醛2%医疗器械碘酒2.5%皮肤、黏膜、物体表面碘伏2%皮肤、黏膜、物体表面乙醇75%医疗器械、皮肤新洁尔灭0.4%-1.6%皮肤、黏膜、物体表面高锰酸钾0.1%皮肤、黏膜、食具、蔬菜等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日1. 医疗器械物品的消毒灭菌物品类型消毒灭菌方法高危器械物品针头、注射器、手术器械、注射液体、静脉导管等高压蒸汽灭菌；环氧乙烷、戊二醛等高效消毒剂中危器械物品呼吸机、麻醉机、胃镜、支气管镜、体温计、

10、口腔器械等流通蒸汽、煮沸消毒；过氧乙酸、醇类、戊二醛浸泡低危器械物品治疗盘、治疗车、食品器皿等清洗后一般消毒即可快速周转物品纤维内镜、牙钻、牙科手术器械等瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂快速处理等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日2. 室内空气消毒灭菌 紫外线照射，滤过除菌 过氧乙酸、过氧化氢、二氧化氯喷雾或熏蒸 中草药（艾叶）烟熏3. 手和皮肤消毒 肥皂和流动水正确洗手 75%乙醇，0.05%氯已定、过氧乙酸水溶液等精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日4. 粘膜消毒 口腔黏膜可用3%过氧化氢 尿道、阴道冲洗可用0.05%氯已定，1g/L高锰酸钾5. 排泄物及分泌物消毒

11、 50g/L有效氯的次氯酸钠、漂白粉等作用1h 等量200g/L漂白粉搅拌混匀作用2h精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日五）影响消毒剂作用的因素消毒剂细菌 环境种类浓度作用时间数量种类有机物温度酸硷度精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日第三章 噬菌体精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 感染细菌等微生物的病毒，具有严格的宿主特异性，也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。 据其感染微生物的后果分为：毒性噬菌体和温和噬菌体精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日本章重点与难点1.掌握噬菌体、毒性/温和噬菌体的概念2.掌握温和噬菌体与宿主菌的关系及其在细菌

12、遗传物质转移中的意义 3.掌握毒性噬菌体的生活周期4.熟悉噬菌体的生物学特性及噬菌体的应用精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日第一节 噬菌体的生物学性状 形态结构 化学组成 抗原性 抵抗力精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日1、形态与结构个体微小，nm为测量单位，EM下可见有蝌蚪形、微球形和细杆形精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日头部六棱柱体尾部管状器官精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日2、化学组成位于头部中央DNA或RNA噬菌体的遗传物质 核酸 蛋白质构成头部外壳及尾部保护核酸决定噬菌体的表型特征精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星

13、期日3、抗原性 具有抗原性，能刺激机体产生抗体 抗体能阻止相应噬菌体侵袭敏感菌 主要表现在阻断吸附4、抵抗力 比一般细菌繁殖体强精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日第二节 毒性噬菌体一、毒性噬菌体（Virulent phage）能在敏感宿主菌内大量增殖并使之裂解的噬菌体二、溶菌周期吸附 穿入生物合成成熟与释放基因的复制 蛋白质的合成精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Adsorption吸附精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Penetration穿入 精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Biological Synthesis 生物合成 精品医

14、学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Maturation and Release 成熟和释放 精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Lytic cycle精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日三、噬菌现象液体培养基浑浊变澄清固 体 培养基噬 菌 斑噬斑荧光假单胞菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 噬菌体基因整合于宿主菌基因组中，并随其染色体复制而复制，随菌分裂而分裂。 具有溶原周期及溶菌周期。一、溶原性噬菌体（Lysogenic phage）第三节 温和噬菌体精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Adsorption吸附精品医学资料 欢迎下载

15、2021/7/18 星期日Penetration穿入 精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Integration整合 精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Lysogenic cycle精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日二、前噬菌体（prophage）整和在细菌基因组中的噬菌体基因组三、溶原性细菌（lysogenic bacterium）带有前噬菌体基因组的细菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日溶原性转换示意图-棒状杆菌噬菌体无毒白喉棒状杆菌有毒白喉棒状杆菌精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Induction精品医学资料 欢迎下载

16、2021/7/18 星期日Replication精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日Maturation and Release精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 具有感染性的噬菌体颗粒 宿主细胞内类似质粒形式的噬菌体核酸 前噬菌体四、溶原性噬菌体的存在状态精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日 细菌的鉴定与分型 检测标本中的未知菌 基因工程的工具 用于细菌性感染的治疗第四节 噬菌体的应用精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日小 结 消毒灭菌的常用术语；常用物理消毒灭菌法的作用机制及适用范围；化学消毒

17、灭菌法；影响化学消毒剂作用效果的因素；消毒灭菌的运用；噬菌体的生物学性状；毒性噬菌体与温和噬菌体；噬菌体的应用精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日思考题1、试述常用物理灭菌法的作用机制及适用范围2、试分析影响化学消毒剂作用效果的因素3、什么是噬菌体？简述噬菌体的生物学特性4、试述噬菌体与宿主菌的关系5、思考噬菌体在细菌遗传变异中的意义精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日中英文关键词 灭菌 sterilization 消毒 disinfection防腐 antisepsis 无菌 asepsis消毒剂 disinfectant高压蒸汽灭菌器 autoclave高压蒸汽灭菌

18、法 sterilization by pressured steam 噬菌体 Bacteriophage毒性噬菌体 virulent phage 溶原性噬菌体 lysogenic phage前噬菌体 prophage 溶原性转换 lysogenic conversion 溶原性细菌 lysogenic bacterium 噬 斑 plaque精品医学资料 欢迎下载2021/7/18 星期日参 考 文 献1 Brooks GF，Brutel JS，Morse SA. Jawetz，Melnick & Adelbergs Medical Microbiology. 24nd ed. New York：Lange Medical Books/McGraw-Hill，20072 Murray PA，Rosenthal KS，Kobayashi