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1、酶固定化法生产L-天冬氨酸7/6/20221 结构与性质：酸性氨基酸，呈白色菱形叶片状结晶，等电点为2.77，溶于水及盐酸，不溶于乙醇、乙醚，在25水中溶解度为80g/L(08)，75时为288g/L(288)，在碱性溶液中为左旋性，在酸性溶液中为右旋性。 固定化酶法生L-天冬氨酸原理延胡索酸 L-天冬氨酸：有助于鸟氨酸循环，促进氨和CO2 生成尿素，降低血中氨和CO2 ，增强肝功能，消除疲劳，用于治疗慢性肝炎，肝硬化及高血氨症，同时也是复合氨基酸输液的原料。7/6/20222固定化酶法生L-天冬氨酸工艺路线粗结晶脱色及重结晶延胡索酸铵固定床反应器（40cm200cm）转化率95%真空干燥固定

2、化天冬氨酸转氨酶（ AS1.881菌种发酵制备，明胶固定）转化液成品7/6/20223 菌种培养及E.coli的细胞：接种于摇瓶，37振摇培养24h，逐级扩大培养至1000一2000L规模。培养调pH为5.0，升温至45并保温lh，冷却至室温，转筒式高速离心机离心，收集菌体(含天冬氨酸酶)备用。 40的12%明胶溶液及10L1.0%戊二醛溶液，充分搅拌均匀，放置冷却凝固，于5过夜后，切成3-5毫米的立方小块，蒸馏水充分洗涤，滤干得含天冬氨酸酶的固定化E.coli，备用。 固定化酶法生L-天冬氨酸工艺流程叙述生物反应器 将固定化E. coli装填于填充床式反应器（40cm200cm）中，制成生物

3、反应器。转化、结晶 取保温37的1mol/L延胡索酸铵(含1mmolMgCl2，pH85)底物溶液，按一定空间速度(SV)连续流过生物反应器，收集转化液，过滤，滤液搅拌下用1MHCl调pH 2.8，5过夜，滤取结晶，用少量冷水洗涤，抽干，于105干燥即得L-Asp粗品。 精制 取粗品用稀氨水溶解(pH5.0)成15的溶液，加1活性炭，70搅拌脱色1h，过滤，滤液于5结晶过夜，滤取结晶，85真空干燥，即得药用L-Asp成品。 7/6/20224注解 吴梧桐等，应用固定化酶工程技术生产L-Asp，年产量达1000吨，底物转化率9956。 日本应用固定化E.coli生物反应器连续化生产L-Asp获得成功。进而以K卡拉胶取代聚丙烯酰胺固定化方法，提高了产率。京都川端教授等开发用念珠状的不溶性吡啶树脂固定天冬氨酸酶的大肠杆菌C600活简体，可高效的生产L-Asp。此外，利用大肠杆菌的基因重组技术改良天冬氨酸酶高产菌获得成功，提高了产酶量23倍。 天冬氨酸酶的生物菌种改进。返 回固定化酶法生L-天冬氨酸产品检验及技术评价7/6/20225本章重点和思考题1、叙述发酵法生产L-异亮氨酸的生产工艺（包括工艺路线和过程）以及对工艺过程的评价。

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