第七章 酸度的测定

1、第七章第七章 酸度的测定酸度的测定主要内容主要内容概述概述酸度的概念、测定意义、有机酸的种类及分类酸度的概念、测定意义、有机酸的种类及分类酸度的测定酸度的测定总酸度的测定、总酸度的测定、pH的测定、挥发性酸的测定的测定、挥发性酸的测定食品中有机酸的分离及测定食品中有机酸的分离及测定第一节第一节 概述概述一、一、 酸度的概念酸度的概念总酸度总酸度食品中所有酸性成分的总量。食品中所有酸性成分的总量。包括已离包括已离解的酸的浓度解的酸的浓度( (游离态游离态) )和未离解的酸的浓度和未离解的酸的浓度( (结合态、结合态、酸式盐酸式盐) )。其大小可借助标准碱液滴定来确定，故又。其大小可借助标准碱液滴

2、定来确定，故又称可滴定酸度。通常用所含主要酸的质量分数来表示称可滴定酸度。通常用所含主要酸的质量分数来表示有效酸度有效酸度指被测溶液中指被测溶液中H+的浓度，的浓度，准确地说应准确地说应是溶液中是溶液中H+的的活度活度。反映的是已离解的酸的浓度，常反映的是已离解的酸的浓度，常用用pH值表示。其大小由值表示。其大小由pH计测定。计测定。 pH的大小与总酸的大小与总酸中酸的性质与数量有关，还与食品中缓冲物的质量与中酸的性质与数量有关，还与食品中缓冲物的质量与缓冲能力有关缓冲能力有关挥发酸挥发酸指食品中易挥发的有机酸指食品中易挥发的有机酸，如甲酸、乙，如甲酸、乙酸酸( (醋酸醋酸) )、丁酸等低碳链

3、的直链脂肪酸，其大小可以、丁酸等低碳链的直链脂肪酸，其大小可以通过蒸馏法分离，再用标准碱液来滴定通过蒸馏法分离，再用标准碱液来滴定挥发酸挥发酸包含游离的和结合的两部分包含游离的和结合的两部分牛乳酸度牛乳酸度外表酸度外表酸度( (固有酸度固有酸度)是指刚挤出来的新鲜牛乳是指刚挤出来的新鲜牛乳本身所具有的酸度，主要来源于鲜牛乳中酪蛋白、白本身所具有的酸度，主要来源于鲜牛乳中酪蛋白、白蛋白、拧檬酸盐及磷酸盐等酸性成分。外表酸度在新蛋白、拧檬酸盐及磷酸盐等酸性成分。外表酸度在新鲜牛乳中约占鲜牛乳中约占0.150.18%(以乳酸计以乳酸计) )真实酸度真实酸度( (发酵酸度发酵酸度)指牛乳在放置过程中，

4、在指牛乳在放置过程中，在乳酸菌作用下使乳糖发酵产生了乳酸而升高的那部分乳酸菌作用下使乳糖发酵产生了乳酸而升高的那部分酸度酸度牛乳酸度表示法牛乳酸度表示法以乳酸的百分数以乳酸的百分数滴定酸度简称滴定酸度简称“酸度酸度” ，用，用oT表示表示牛乳牛乳oT指滴定指滴定 100 ml 牛乳样品，消耗牛乳样品，消耗0.1 mol/L NaOH 溶液的毫升数，或滴定溶液的毫升数，或滴定10 ml 样品所用去的样品所用去的NaOH毫升数乘毫升数乘10。新鲜牛乳的酸度常为。新鲜牛乳的酸度常为16 18oT牛乳的总酸度为牛乳的总酸度为外表酸度和真实酸度之和外表酸度和真实酸度之和, 大小可大小可通过标准碱滴定来测

5、定通过标准碱滴定来测定酸牛奶总酸度为外表酸度酸牛奶总酸度为外表酸度二、酸度测定的意义二、酸度测定的意义有机酸影响食品的色、香、味及稳定性有机酸影响食品的色、香、味及稳定性食品中有机酸的种类和含量是判断其质量好坏的食品中有机酸的种类和含量是判断其质量好坏的一个重要指标一个重要指标利用食品中有机酸的含量和糖含量之比，可判断利用食品中有机酸的含量和糖含量之比，可判断某些果蔬的成熟度某些果蔬的成熟度三、食品中有机酸的种类与分布三、食品中有机酸的种类与分布食品中酸的种类食品中酸的种类有机酸有机酸(主要主要)通常呈游离状态，部分呈酸式盐状通常呈游离状态，部分呈酸式盐状态存在于食品中态存在于食品中无机酸无机

6、酸(含量很少含量很少) 呈中性盐化合态存在于食品中呈中性盐化合态存在于食品中食品中常见的有机酸食品中常见的有机酸柠檬酸柠檬酸，苹果酸，酒石酸，草酸，苹果酸，酒石酸，草酸，琥珀酸，乳酸，及，琥珀酸，乳酸，及醋酸等醋酸等有机酸在食品中的分布极不均衡，果蔬中所含有机酸有机酸在食品中的分布极不均衡，果蔬中所含有机酸种类较多，但不同果蔬中所含的有机酸种类也不同种类较多，但不同果蔬中所含的有机酸种类也不同食品中常见有机酸含量影响因素食品中常见有机酸含量影响因素果蔬中有机酸含量取决于其品种，成熟度以及产果蔬中有机酸含量取决于其品种，成熟度以及产地气候条件等因素地气候条件等因素其它食品中有机酸的含量取决于其原

7、料种类，产其它食品中有机酸的含量取决于其原料种类，产品配方以及工艺过程等品配方以及工艺过程等食品中酸的来源食品中酸的来源原料带入原料带入加工过程中人为加入加工过程中人为加入生产中有意让原料产酸生产中有意让原料产酸各种添加剂带入各种添加剂带入生产加工不当，贮藏、运输中污染生产加工不当，贮藏、运输中污染第二节第二节 酸度的测定酸度的测定一、总酸度的测定一、总酸度的测定(滴定法滴定法)(一一)原理原理食品中的食品中的有机弱酸有机弱酸在用标准在用标准NaOH溶液滴定时，溶液滴定时，被中和生成盐类。用酚酞作指示剂，被中和生成盐类。用酚酞作指示剂，当滴定终点当滴定终点 (pH=8.2，指示剂显红色，指示剂

8、显红色)时，根据耗用的标准碱时，根据耗用的标准碱液的体积，计算出总酸的含量液的体积，计算出总酸的含量反应式：反应式：RCOOH+NaOHRCOONa+H2O为何以为何以pH8.2为终点而不是为终点而不是pH7?滴定后放置一段时间溶液褪色，是否需要再滴定？滴定后放置一段时间溶液褪色，是否需要再滴定？(二二)试剂和仪器试剂和仪器试剂试剂0.1 mol/L NaOH标准溶液，标准溶液，注意：正确配制、准确标定、妥善保存注意：正确配制、准确标定、妥善保存1%酚酞指示剂酚酞指示剂称取酚酞称取酚酞1g溶解于溶解于100 ml 95%乙醇中乙醇中变色范围变色范围pH(8.210.0)仪器仪器碱式滴定管碱式滴

9、定管(三三) 操作方法操作方法1.样液的制备样液的制备固体样品、干鲜果蔬、蜜饯及罐头样品用粉碎机或固体样品、干鲜果蔬、蜜饯及罐头样品用粉碎机或高速组织捣碎机粉碎，混合均匀后取适量，加入无高速组织捣碎机粉碎，混合均匀后取适量，加入无CO2蒸馏水、加热冷却后过滤蒸馏水、加热冷却后过滤含含CO2 的饮料、酒类，要先除的饮料、酒类，要先除CO2调味品及不含调味品及不含CO2 的饮料、酒类，直接取样的饮料、酒类，直接取样咖啡样品，粉碎，加乙醇，放置过夜，过滤咖啡样品，粉碎，加乙醇，放置过夜，过滤固体饮料，加水研磨，定容，过滤固体饮料，加水研磨，定容，过滤2.测定测定滴定用移液管吸取滤液滴定用移液管吸取滤

10、液 50ml，注入三角瓶中，加入酚，注入三角瓶中，加入酚酞指示剂酞指示剂35滴。用滴。用 0.1 mol/L 的的NaOH溶液滴定至浅溶液滴定至浅(微微)红色且红色且 30s不褪色。记录消耗的不褪色。记录消耗的NaOH量量(四四)计算计算10010VVmVKc总酸度总酸度c-标准标准NaOH溶液的浓度，溶液的浓度，mol/LV-滴定消耗标准滴定消耗标准NaOH溶液的体积，溶液的体积，mLm-样品质量或体积，样品质量或体积，g或或mlV0 -样品稀释液总体积，样品稀释液总体积，mLV1 -滴定时吸取的样液体积，滴定时吸取的样液体积，mLK-换算为主要酸的系数，即换算为主要酸的系数，即1mmolN

11、aOH相当于主要酸的相当于主要酸的克数克数在同一各样品中，往往几种有机酸同时存在，但总在同一各样品中，往往几种有机酸同时存在，但总酸度测定结果通常以样品中主要酸为计算标准酸度测定结果通常以样品中主要酸为计算标准分析葡萄及其制品时，用酒石酸表示，分析葡萄及其制品时，用酒石酸表示，K=0.075分析柑桔类果实及其制品时，用柠檬酸表示，分析柑桔类果实及其制品时，用柠檬酸表示，K=0.06或或0.070(带分子结晶水带分子结晶水)分析苹果、核桃类果实及其制品时，用苹果酸表分析苹果、核桃类果实及其制品时，用苹果酸表示，示，K=0.067分析乳品、肉类、水产品及其制品时，用乳酸表分析乳品、肉类、水产品及其

12、制品时，用乳酸表示，示，K=0.090分析酒类、调味品时，用乙酸表示，分析酒类、调味品时，用乙酸表示，K=0.060样品浸渍、稀释用蒸馏水不能含有样品浸渍、稀释用蒸馏水不能含有CO2 ,因为因为CO2溶于水溶于水会生成酸性的会生成酸性的H2CO3形式，影响滴定终点时酚酞颜色变化。形式，影响滴定终点时酚酞颜色变化。样品中样品中CO2对测定也有干扰，故对含有对测定也有干扰，故对含有CO2饮料、酒类等饮料、酒类等样品在测定之前须除去样品在测定之前须除去CO2样品浸渍、稀释其用水量应根据样品中总酸含量来慎重样品浸渍、稀释其用水量应根据样品中总酸含量来慎重选择，为使误差不超过允许范围，一般要求滴定时消耗

13、选择，为使误差不超过允许范围，一般要求滴定时消耗0.1mol/LNaOH溶液不得少于溶液不得少于5ml，最好在，最好在1015ml由于食品中有机酸均为弱酸，在用强碱由于食品中有机酸均为弱酸，在用强碱(NaOH)滴定时滴定时,其滴定终点偏碱，一般在其滴定终点偏碱，一般在pH8.2左右，故可选用酚酞做终左右，故可选用酚酞做终点指示剂点指示剂若样液有颜色若样液有颜色(如带色果汁等如带色果汁等)，应加水稀释，用活性碳，应加水稀释，用活性碳脱色等方法处理后再滴定。若样液颜色过深或浑浊，则脱色等方法处理后再滴定。若样液颜色过深或浑浊，则宜用电位滴定法宜用电位滴定法( (五五) )注意注意二、有效酸度二、有

14、效酸度(pH)值的测定值的测定原料的品种和成熟度、食品的加工方法、肉的品原料的品种和成熟度、食品的加工方法、肉的品质质(新鲜度新鲜度)和动物屠宰前的健康状况，都与有效酸和动物屠宰前的健康状况，都与有效酸度度(pH)有关有关食品的食品的pH值和总酸度之间没有严格的比例关系值和总酸度之间没有严格的比例关系在食品酸度测定中，有效酸度在食品酸度测定中，有效酸度(pH值值)的测定，往的测定，往往比测定总酸度更有实际意义，更能说明问题往比测定总酸度更有实际意义，更能说明问题pH值的测定方法值的测定方法电位法电位法 (pH计法计法)比色法比色法(一一) pH计法计法(电位法电位法)1.原理原理利用电极在不同

15、溶液中所产生的电位变化来测定溶液的利用电极在不同溶液中所产生的电位变化来测定溶液的pH玻璃电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极，插入待玻璃电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极，插入待测样液中，组成原电池，该电池电动势的大小，与溶液测样液中，组成原电池，该电池电动势的大小，与溶液pH值呈直线关系值呈直线关系E = Eo - 0.0591 pH (25)2.适用范围适用范围适用于各种饮料、果蔬及其制品，以及肉、蛋类等食品中适用于各种饮料、果蔬及其制品，以及肉、蛋类等食品中pH值的测定。测定值可准确到值的测定。测定值可准确到0.01pH单位单位3.仪器仪器pHS-3C型酸度计型酸度计231型或型

16、或221型玻璃电极型玻璃电极; 232型型 或或 222型甘汞电极型甘汞电极电磁搅拌器电磁搅拌器高速组织搅拌机高速组织搅拌机4. 操作方法操作方法(1) 样品制备：样品制备：一般液体样品摇匀后可直接取样测定一般液体样品摇匀后可直接取样测定含含CO2的液体样品，除的液体样品，除CO2后再测，方法同总酸后再测，方法同总酸果蔬样品：榨汁后，取汁液直接测果蔬样品：榨汁后，取汁液直接测pH。果蔬干制品。果蔬干制品可取适量样品加数倍的无可取适量样品加数倍的无 CO2蒸馏水，于水浴上加热蒸馏水，于水浴上加热30min，捣碎，过滤，取滤液测定，捣碎，过滤，取滤液测定肉类制品：称取肉类制品：称取 10g已除去油

17、脂并捣碎的样品，加已除去油脂并捣碎的样品，加入入 100ml 无无CO2蒸馏水，浸泡蒸馏水，浸泡 15min，不断摇动，取，不断摇动，取滤液测定滤液测定制备好的样品应及时测定制备好的样品应及时测定样品处理样品处理 酸度计的校正酸度计的校正 样液样液pH值的测定值的测定活化电极活化电极 取出酸度计，检查仪器取出酸度计，检查仪器安装仪器和电极安装仪器和电极用标准缓冲溶液校准仪器用标准缓冲溶液校准仪器2.酸度计的使用酸度计的使用清洗电极清洗电极 擦干电极擦干电极 把电极插入被测溶液中把电极插入被测溶液中样液样液pH的测定的测定测定测定 清洗并擦干电极清洗并擦干电极(二二)比色法比色法原理：利用各种酸

18、碱指示剂在不同的原理：利用各种酸碱指示剂在不同的pH值范围内值范围内显示不同的颜色来指示样液的显示不同的颜色来指示样液的pH值值根据操作方法分类根据操作方法分类1.试纸法试纸法(适用于固体半固体样品适用于固体半固体样品)用用pH试纸进行测定试纸进行测定简单快速、经济、但结果不够准确简单快速、经济、但结果不够准确2.标准管比色法标准管比色法(适用于色度和浑浊度甚低的样液适用于色度和浑浊度甚低的样液)将酸碱指示剂在样液的颜色与其在标准缓冲溶液将酸碱指示剂在样液的颜色与其在标准缓冲溶液所配制的不同所配制的不同pH条件下的标准色比较条件下的标准色比较受颜色、浊度、胶体物、各种氧化剂和还原剂的受颜色、浊

19、度、胶体物、各种氧化剂和还原剂的干扰，测定结果不甚准确，仅能准确到干扰，测定结果不甚准确，仅能准确到0.1pH单位单位三、三、 挥发酸的测定挥发酸的测定测定方法测定方法直接滴定法直接滴定法通过水蒸气蒸馏或溶剂萃取，把挥通过水蒸气蒸馏或溶剂萃取，把挥发酸分离出来，然后用标准碱滴定发酸分离出来，然后用标准碱滴定特点：操作方便，较常用于挥发酸含量较高的样品特点：操作方便，较常用于挥发酸含量较高的样品间接测定法间接测定法将挥发酸蒸发排除后，用标准碱滴将挥发酸蒸发排除后，用标准碱滴定不挥发酸，最后从总酸中减去不挥发酸，即得挥发定不挥发酸，最后从总酸中减去不挥发酸，即得挥发酸含量。酸含量。 总酸总酸 =

20、挥发酸挥发酸 + 不挥发酸不挥发酸特点：适用于样品中挥发酸含量较少，或在蒸馏操作特点：适用于样品中挥发酸含量较少，或在蒸馏操作的过程中蒸馏液有所损失或被污染的过程中蒸馏液有所损失或被污染水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法(一一)原理原理样品经适当的处理后，加适量磷酸使结合态挥发样品经适当的处理后，加适量磷酸使结合态挥发酸游离出来，用水蒸气蒸馏分离出总挥发酸，经冷酸游离出来，用水蒸气蒸馏分离出总挥发酸，经冷却、收集后，以酚酞为指示剂，用标准碱液滴定至却、收集后，以酚酞为指示剂，用标准碱液滴定至微红色，微红色，30s不褪色为终点，根据标准碱的消耗量计不褪色为终点，根据标准碱的消耗量计算出样品总挥发酸含量算出

21、样品总挥发酸含量加磷酸的目的是什么？加磷酸的目的是什么？(二二)适用范围：适用于各类饮料、果蔬及其制品、适用范围：适用于各类饮料、果蔬及其制品、发酵制品、酒等中间挥发酸含量高的样品发酵制品、酒等中间挥发酸含量高的样品(三三)试剂和仪器试剂和仪器试剂试剂0.1molLNaOH标准溶液标准溶液1%酚酞乙醇溶液酚酞乙醇溶液10%磷酸溶液：称取磷酸溶液：称取10.0g磷酸，用少许无磷酸，用少许无CO2水水溶解，并稀释至溶解，并稀释至100mL仪器仪器水蒸气蒸馏装置水蒸气蒸馏装置电磁搅拌器电磁搅拌器 除含除含CO2样品中的样品中的CO2AB(四四)样品处理方法样品处理方法一般果蔬及饮料直接取样一般果蔬及

22、饮料直接取样含含CO2的饮料、发酵酒类，须排除的饮料、发酵酒类，须排除CO2 固体样品固体样品(如干鲜果蔬及其制品如干鲜果蔬及其制品)及冷冻、粘稠及冷冻、粘稠等制品，取可食部分，加定量水，捣碎机粉碎等制品，取可食部分，加定量水，捣碎机粉碎(五五)测定测定 样品蒸馏：取样品蒸馏：取25mL经过处理的样品移入蒸馏瓶中，经过处理的样品移入蒸馏瓶中，加入加入25mL无无CO2蒸馏水和蒸馏水和1mL10%H3PO4溶液，加溶液，加热蒸馏至馏出液约热蒸馏至馏出液约300mL为止。于相同条件下作一为止。于相同条件下作一空白实验空白实验(烧瓶内加烧瓶内加 50mlL水代替样品水代替样品) 滴定：将馏出液加热至

23、滴定：将馏出液加热至6065oC(不可超过不可超过)，加入，加入3滴酚酞指示剂，用滴酚酞指示剂，用0.1mol/L NaOH标准溶液滴定到标准溶液滴定到溶液为微红色溶液为微红色30s不褪色不褪色, 即为终点即为终点(六六) 结果计算结果计算食品中总挥发酸通常以乙酸的重量百分数表示食品中总挥发酸通常以乙酸的重量百分数表示, 即即100g样品中含多少克乙酸样品中含多少克乙酸计算公式计算公式10006. 0)(21mcVVm-样品质量或体积，样品质量或体积，g或或mLV1-样液滴定消耗标准样液滴定消耗标准NaOH的体积，的体积，mLV2-空白滴定消耗标准空白滴定消耗标准NaOH的体积，的体积，mL

24、c -标准标准NaOH溶液的浓度，溶液的浓度，mol/L0.06-换算为醋酸的系数，即换算为醋酸的系数，即1毫摩尔氢氧化钠相当于毫摩尔氢氧化钠相当于乙酸的克数乙酸的克数 挥发酸挥发酸 =(七七)说明说明样品中挥发酸的蒸馏方式可采用直接蒸馏法和水蒸样品中挥发酸的蒸馏方式可采用直接蒸馏法和水蒸气蒸馏法。但直接蒸馏法较困难，因为挥发酸与水气蒸馏法。但直接蒸馏法较困难，因为挥发酸与水构成有一定百分比的混溶体，并有固定的沸点。在构成有一定百分比的混溶体，并有固定的沸点。在一定沸点下，蒸汽中的酸与溶液中的酸之间有一个一定沸点下，蒸汽中的酸与溶液中的酸之间有一个平衡关系平衡关系(即蒸发系数即蒸发系数x)，在

25、整个平衡时间内，在整个平衡时间内x不变，不变，故一般不采用直接蒸馏法。而水蒸气蒸馏中，挥发故一般不采用直接蒸馏法。而水蒸气蒸馏中，挥发酸和水蒸气分压成比例地自溶液中一起蒸馏出来，酸和水蒸气分压成比例地自溶液中一起蒸馏出来，加速挥发酸的蒸馏过程加速挥发酸的蒸馏过程蒸馏前应先将水蒸气发生瓶中的水煮沸蒸馏前应先将水蒸气发生瓶中的水煮沸10min，或，或在其中加入在其中加入2滴酚酞指示剂并滴加滴酚酞指示剂并滴加NaOH至呈浅红色，至呈浅红色，以排除其中的以排除其中的CO2，并用水蒸汽冲洗整个装置，并用水蒸汽冲洗整个装置溶液中总挥发酸包括游离态与结合态溶液中总挥发酸包括游离态与结合态2种。而结合种。而结

26、合态挥发酸不容易挥发出来，所以要加少许磷酸，使态挥发酸不容易挥发出来，所以要加少许磷酸，使结合态挥发酸挥发出来结合态挥发酸挥发出来在整个蒸馏装置中，蒸馏瓶内液面要保持恒定，在整个蒸馏装置中，蒸馏瓶内液面要保持恒定，不然会影响测定结果不然会影响测定结果。另外，整个装置密封良好，。另外，整个装置密封良好，防止挥发酸泄露。防止挥发酸泄露。滴定前，将蒸馏液加热至滴定前，将蒸馏液加热至 60 65，使其终点明，使其终点明显，加速滴定反应，缩短滴定时间，减少溶液与空显，加速滴定反应，缩短滴定时间，减少溶液与空气接触的机会，提高测定精度气接触的机会，提高测定精度若样品中含若样品中含 SO2等易挥发性成分，还

27、要排除它们等易挥发性成分，还要排除它们对测定的干扰对测定的干扰测定食品中各种挥发酸的含量，还可使用纸色谱测定食品中各种挥发酸的含量，还可使用纸色谱法和气相色谱法法和气相色谱法第三节第三节 食品中有机酸的分离与定量食品中有机酸的分离与定量 方方 法法硅胶色谱法硅胶色谱法纸色谱法纸色谱法薄层色谱法薄层色谱法气相色谱法气相色谱法离子交换色谱法离子交换色谱法高效液相色谱法高效液相色谱法气相色谱法气相色谱法 Gas Chromatography (GC法法)流动相流动相流经固定相的空隙或表面的冲洗剂流经固定相的空隙或表面的冲洗剂固定相固定相管内保持固定、起分离作用的填充物管内保持固定、起分离作用的填充物

28、色谱柱色谱柱进行色谱分离用的细长管进行色谱分离用的细长管气相色谱气相色谱流动相为气体的色谱流动相为气体的色谱根据固定相状态可分为根据固定相状态可分为气液色谱气液色谱气固色谱气固色谱以组分在固定相和流动相间的以组分在固定相和流动相间的溶解、吸附、分配、溶解、吸附、分配、离子交换或其他亲和作用的差异为依据离子交换或其他亲和作用的差异为依据而建立起来而建立起来的各种的各种分离分析方法分离分析方法称称色谱法色谱法Stationary phaseStationary liquidCapillary wall国产气相色谱仪皂膜流量计转字流量计调整仪，标准仪Setup of Gas Chromatograp

29、h色谱流出曲线：色谱流出曲线：试样中各组分经色谱柱分离后，按先后次序经试样中各组分经色谱柱分离后，按先后次序经过检测器时，检测器就将流动相中各组分浓度变化转变为相应过检测器时，检测器就将流动相中各组分浓度变化转变为相应的电信号，由记录仪所记录下的的电信号，由记录仪所记录下的信号信号时间曲线时间曲线或或信号信号流动相体积曲线流动相体积曲线记录仪得到的色谱图记录仪得到的色谱图四、高效液相色谱法四、高效液相色谱法(HPLC) High Performance Liquid Chromatography液相色谱法液相色谱法：以液体为流动相的色谱法：以液体为流动相的色谱法高效液相色谱法高效液相色谱法：以

30、高压液体为流动相的液相色谱：以高压液体为流动相的液相色谱分析法分析法 经典液相色谱：固定颗粒较大且不均匀经典液相色谱：固定颗粒较大且不均匀 常压下输送流动相常压下输送流动相 柱效较低柱效较低 分析周期长分析周期长现代液相色谱：固定相颗粒小且均匀现代液相色谱：固定相颗粒小且均匀 高压下输送流动相高压下输送流动相 柱效较高柱效较高 分析周期短分析周期短分离效能高分离效能高选择性好选择性好灵敏度高灵敏度高分析速度快分析速度快适用范围广适用范围广色谱柱可反复使用色谱柱可反复使用(一一)高效液相色谱的特点高效液相色谱的特点(二二) 高效液相色谱的类型高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理不同为类根据固定

31、相和分离机理不同为类液液-固吸附色谱固吸附色谱 液液-液分配色谱液分配色谱化学键合色谱化学键合色谱离子交换色谱离子交换色谱 空间排阻色谱空间排阻色谱(凝胶色谱凝胶色谱)按固定相按固定相与流动相极性的不同与流动相极性的不同 液液-液分配色谱液分配色谱正相色谱法正相色谱法 反相色谱法反相色谱法流动相极性小于固定相极性流动相极性小于固定相极性 流动相极性大于固定相极性流动相极性大于固定相极性 检测器检测器高压输液泵高压输液泵 高压输液泵高压输液泵 输液系统输液系统进样系统进样系统分离系统分离系统检测系统检测系统数据处理系统数据处理系统(三三)、高效液相色谱仪的基本组成、高效液相色谱仪的基本组成五、离子交换色谱法五、离子交换色谱法(羧酸分析仪羧酸分析仪)原理原理根据离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电根据离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，这些离子对交换树脂具有荷的组分离子进行可逆交换，这些离子对交换树脂具有不同的亲和力而被彼此分离不同的亲和力而被彼此分离羧酸分析仪的组成羧酸分析仪的组成有机酸分离部分有机酸分离部分利用强碱性阴离子交换树脂柱分离利用