中成药蒽醌类化合物的鉴定

1、中成药蒽醌化合物的鉴定中成药蒽醌化合物的鉴定中药饮片及中成药的鉴定均参照中华人民共和国药典2015版决明子决明子的鉴定标准一：来源鉴定；二：显微鉴定；三：甲醇浸出物检查TLC(通则0502)；四：水分检测（通则0832）；五：黄曲霉素测定（通则2351）；六：含量测定HPLC（通则0512）；七：对照品溶液的制备；八：供试品溶液的制备决明子鉴定决明子鉴定TLC法：法：一：一：浸渍提取浸渍提取取本品粉末1g，加甲醇10ml，浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解

2、，作为供试品溶液。二：二：对照品制备对照品制备另取橙黄决明素对照品、大黄酚对照品，加无水乙醇一乙酸乙酯（2：1）制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。三：三：点样点样照薄层色谱法（通则0502）吸取上述两种溶液各2l，分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油醚（3060）-丙酮（2：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为亮黄色（橙黄决明素）和粉红色（大黄酚）。 决明子检测TLC法流程图决明子粉末1g+甲醇浸渍1小时滤过蒸干残渣加水10ml溶解+盐酸1ml水浴加热30分钟冷却乙醚提取2次每次20ml乙醚层合并蒸干

3、残渣加三氯甲烷1ml溶解供试品2大黄酚水层供试品1橙黄决明素橙黄决明素；大黄酚乙醇+乙酸乙酯（2:1）(1ml/1mg混悬)对照品1；对照品2TLC点样；展开供试品1；对照品1分别点样2l（展开剂石油醚加丙酮2:1）氨气熏显色两个斑点比较计算Rf值 HPLC法法：色谱条件与系统适用性试验：色谱条件与系统适用性试验 含量测定含量测定：照高效液相色谱法（通则：照高效液相色谱法（通则0512） 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为284nm。理论板数按橙黄决明素峰计算应不低于3000。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与

4、供试品溶液各10l,注入液相色谱仪，测定，既得。 本品按干燥品计算，大黄酚（C16H10O4）不得少于0.12%，含橙黄决明素（C17H16O7）不得少于0.080%。制何首乌的鉴定标准制何首乌的鉴定标准一：一：来源鉴定来源鉴定（参照何首乌生药，黑豆制法）；（参照何首乌生药，黑豆制法）；黑豆汁拌匀照炖法（通则黑豆汁拌匀照炖法（通则0213）；）；照蒸法（通则照蒸法（通则0213）二：二：显微鉴定显微鉴定；三：三：水分检测水分检测（通则（通则0832）；）；四：四：照醇溶液浸出物检查照醇溶液浸出物检查，通则（，通则（2201)，用乙醇为溶剂，不得少于，用乙醇为溶剂，不得少于5.0%五：五：含量测

5、定含量测定HPLC（通则（通则0512）；）；二苯乙烯苷二苯乙烯苷 （避光操作）。（避光操作）。取本品粉末（过四号筛）约取本品粉末（过四号筛）约0.2g，精密称定，照何首乌药材，精密称定，照何首乌药材含量测定含量测定项下的方法测定。本项下的方法测定。本品按干燥品计算，含品按干燥品计算，含2，3，5，4一四羟基二苯乙烯一四羟基二苯乙烯-2-O-p-D-葡萄糖苷（葡萄糖苷（C20H2209）不得）不得少于少于0.70%。 游离蕙醌（制何首乌游离蕙醌（制何首乌） 照高效液相色谱法照高效液相色谱法（通则（通则0512）测定。）测定。 色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 以十八烷墓硅烷键合

6、硅胶为填充剂；以甲醇0.1%磷酸溶液（80：20）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含大黄素80g、大黄素甲醚40g的溶液，即得。 供试品溶液的制备供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含游

7、离蒽醌以大黄素（C15H1005）和大黄素甲醚（C16H12O5）的总量计，不得少于0.10%。 品名血脂宁丸品名血脂宁丸856 处方决明子、山楂、荷叶、制何首乌处方决明子、山楂、荷叶、制何首乌 制法以上四味，与白糖粉碎成细粉，过筛，混匀。制法以上四味，与白糖粉碎成细粉，过筛，混匀。 每每100g粉末加炼蜜粉末加炼蜜7090g制成大蜜丸，即得。制成大蜜丸，即得。 性状本品为棕褐色的大蜜丸；味甜、酸。性状本品为棕褐色的大蜜丸；味甜、酸。 鉴别（一）鉴别（一）TLC法法 （1）溶解溶解取本品取本品9g，剪碎，加甲醇，剪碎，加甲醇30ml，超声处理，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，分钟，滤过，滤液

8、蒸干，残渣加水残渣加水10ml使溶解，加盐酸使溶解，加盐酸1ml，加热回流，加热回流30分钟，放冷，用乙醚振摇提取分钟，放冷，用乙醚振摇提取2次，每次次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加三氯甲烷，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为使溶解，作为供试供试品溶液。品溶液。 对照品对照品另取另取大黄酚大黄酚对照品、对照品、大黄素甲醚大黄素甲醚对照品，加三氯甲烷制成每对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含各含1mg的混合溶液，作为的混合溶液，作为对照品溶液对照品溶液。 点样点样照薄层色谱法（通则照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液）试验，吸取供试品溶液46l、对照品

9、溶液、对照品溶液24l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（薄层板上，以石油醚（3060）甲酸乙酯甲酸乙酯甲酸甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （2）溶解提取溶解提取取本品取本品20g，剪碎，加甲醇，剪碎，加甲醇40ml，超声处理，超声处理30分钟，滤过，滤液分钟，滤过，滤液蒸至近干，残渣用氨试液蒸至近干，残渣用氨试液15ml溶解，用

10、三氯甲烷振摇提取溶解，用三氯甲烷振摇提取3次，每次次，每次20ml，合并三，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用氯甲烷液，蒸干，残渣用0.01mol/L盐酸溶液盐酸溶液20ml溶解，用三氯甲烷溶解，用三氯甲烷20ml振摇提振摇提取，弃去三氯甲烷液，酸水液用浓氨试液调节取，弃去三氯甲烷液，酸水液用浓氨试液调节pH值至值至9lO，再用三氯甲烷振摇提，再用三氯甲烷振摇提取取2次，每次次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为使溶解，作为供试供试品溶液。品溶液。 对照品对照品另取另取荷叶荷叶对照药材对照药材2g，加甲醇，加甲醇10ml，同法制

11、成对照药材溶液。再取荷叶碱对，同法制成对照药材溶液。再取荷叶碱对照品，加三氯甲烷制成每照品，加三氯甲烷制成每1ml含含1mg的溶液，作为的溶液，作为对照品对照品溶液。溶液。 点样点样照薄层色谱法（通则照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液）试验，吸取供试品溶液610l、对照药材溶液及对、对照药材溶液及对照品溶液各照品溶液各46l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷薄层板上，以环己烷乙酸乙酯乙酸乙酯浓氨试液浓氨试液（15：15：0.4）为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以稀）为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。

12、供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。相同颜色的斑点。 检查应符合丸剂项下有关的各项规定（通则检查应符合丸剂项下有关的各项规定（通则0108）。）。 溶解提取溶解提取含量测定取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约含量测定取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约2g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇精密称定，置锥形瓶中，加甲醇30ml，超声处理（功率，超声处理（功率200W，频率频率40kHz） 60分钟，滤过；药渣与滤纸再加甲醇分钟，滤过；药渣与滤纸再加甲醇30ml，超声处，超声处理（功率理（

13、功率200W，频率，频率40kHz） 30分钟，滤过；药渣用甲醇分钟，滤过；药渣用甲醇20ml洗涤，合并滤液与洗液，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，转移洗涤，合并滤液与洗液，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液供试品溶液。 对照品对照品另取另取熊果酸熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。的溶液，作为对照品溶液。 点样点样照薄层色谱法（通则照薄层色谱法（通则0502）试验，精密吸取供试品溶液）试验，精密吸取供试品溶液2l、对照品溶液对照

14、品溶液2l与与4l，分别交叉点于同一硅胶，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以三氯薄层板上，以三氯甲烷甲烷甲醇（甲醇（20：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，在薄层板上覆盖同加热至斑点显色清晰，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。照薄层色谱法（通则样大小的玻璃板，周围用胶布固定。照薄层色谱法（通则0502）进行扫描，波长：进行扫描，波长：S=540nm，R=420nm，测量供试品吸光度，测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。积分值与对照品吸光度积分值，计算，即得。

15、 本品每丸含山楂按本品每丸含山楂按熊果酸熊果酸（C30H48O3）计，不得少于）计，不得少于4.5mg血脂宁丸血脂宁丸+甲醇超声波溶解甲醇超声波溶解本品20g加甲醇40ml超声溶解残渣加水10ml溶解+盐酸1ml加热回流30min乙醚提取2次每次20ml乙醚层合并蒸干水层供试品：大黄素甲醚制何首乌；大黄酚，决明子过滤蒸干残渣加三氯甲烷1ml溶解过滤蒸干三氯甲烷振摇提取三氯甲烷振摇提取3次，每次次，每次20ml合并蒸干残渣用氨试液残渣用氨试液15ml溶解溶解氨液层三氯甲烷三氯甲烷60ml残渣用残渣用0.01mol/L盐酸溶液盐酸溶液20ml溶解溶解三氯甲烷三氯甲烷20ml振摇提取振摇提取酸水液用浓氨试液调节酸水液用浓氨试液调节pH值至值至9lO酸水层酸水层三氯甲烷振摇提取三氯甲烷振摇提取2次，每次次，每次20ml残渣三氯甲烷液残渣三氯甲烷液1ml使溶解做使溶解做供试品溶液，荷叶碱供试品溶液，荷叶碱三氯层甲烷弃用合并三氯甲烷液蒸干合并三氯甲烷液蒸干本品本品2g甲醇甲醇30ml溶解溶解超声处理（功率超声处理（功率