职业卫生和职业医学概论-氨基乙酰丙酸测定ppt课件

1、LOGO尿中尿中-氨基乙酰丙酸的测定氨基乙酰丙酸的测定 预防医学实验教学中心预防医学实验教学中心 一、原理一、原理 尿中尿中-ALA-ALA与乙酰乙酸乙酯缩合生成与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡啶化合吡啶化合 物。此化合物用乙酸乙酯萃取，与对物。此化合物用乙酸乙酯萃取，与对二甲氨基二甲氨基 苯甲醛反应生成红色化合物，在波长苯甲醛反应生成红色化合物，在波长554nm554nm处比色定量。处比色定量。1.1.分光光度计分光光度计2.2.水浴锅水浴锅3.3.离心机离心机二、仪器二、仪器三、试剂三、试剂 1. 去离子水去离子水2. 乙酸乙酯。乙酸乙酯。3. 乙酰乙酸乙酯。乙酰乙酸乙酯。4. 乙酸盐缓冲液乙酸盐

2、缓冲液(pH4.6) 5. -ALA标准溶液标准溶液6. 显色剂显色剂四、采样、运输和保存四、采样、运输和保存 用塑料瓶收集铅作业工人尿样用塑料瓶收集铅作业工人尿样50mL50mL，尽快带回尽快带回 实验室实验室( (夏季运输时最好冷藏夏季运输时最好冷藏) )，测比，测比重后，放重后，放44冰箱可保存二周。冰箱可保存二周。 五、实验步骤五、实验步骤离心管号离心管号0123456(1) 标准应用液，标准应用液，ml00.10.30.50.71.0 0 (2) 水，水，ml2.01.91.71.51.31.01.0(3) 尿样，尿样，ml0000001.0(4) 缓冲液，缓冲液，ml222222

3、2 (5) 乙酰乙酸乙酯，乙酰乙酸乙酯，ml0.40.40.40.40.40.40.4ALA含量，含量，ug01.03.05.07.010 ？ 2.2.沸水浴沸水浴1212分钟，取出冷却至室温分钟，取出冷却至室温; ;3.3.每管加乙酸乙酯每管加乙酸乙酯 4ml, 4ml,加塞振摇加塞振摇60-8060-80次次, ,离心离心5min;5min;4.4.各取各取2mL2mL萃取层于另萃取层于另7 7支比色管中，各加支比色管中，各加2mL2mL显色剂，混显色剂，混 匀，静置匀，静置10min10min，5.554nm5.554nm处，以零管为参比，比色处，以零管为参比，比色6.6.以吸光度为纵坐

4、标，以吸光度为纵坐标，ALAALA含量为横坐标，作标准曲线；含量为横坐标，作标准曲线；7.7.从标准曲线上查出样品管中从标准曲线上查出样品管中ALAALA的含量的含量 。1.1.六、计算六、计算1.1.按式按式(1)(1)计算尿样换算成标准比重计算尿样换算成标准比重(1.020)(1.020)下的浓度的校正系数下的浓度的校正系数(k)(k)。 2.按式按式(2)计算尿中计算尿中ALA的浓度。的浓度。 式中：式中：X尿中尿中ALA的浓度，的浓度，mg/L；m样品管中样品管中ALA含量，含量，g；V 分析时所取尿样的体积，分析时所取尿样的体积，mL。正常值：正常值：4mg/L4mg/L七、本卷须知七、本卷须知 1. 1.接触者的尿样采集时间不限接触者的尿样采集时间不限, ,采样时应避免污染。采样时应避免污染。 2. 2.煮沸时间应从比色管放进水浴后煮沸时间应从比色管放进水浴后, ,水重新沸腾水重新沸腾, , 开始计算时间，不得少于开始计算时间，不得少于12min12min。 3. 3.尿中尿中-ALA-ALA含量高或颜色较深时含量高或颜色较深时, ,可减少取样量。可减少取样量。 4. 4.本法中红