蛋白质糖类脂质实验鉴定

1、实验原理 生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。(1)糖类淀粉+碘蓝色还原糖+斐林试剂5065水浴加热约2 min砖红色沉淀(2)脂肪苏丹染液橘黄色 脂肪苏丹染液红色(3)蛋白质双缩脲试剂紫色实验流程(1)还原糖的检测和观察 选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织结论：组织样液中有可溶性还原糖 在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部，放入盛5065温水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部； 斐林试剂不稳定，应现用现配。(2)脂肪的检测和观察方法一：花生种子匀浆3滴苏丹染液橘黄色方法二：取材：花生种子(浸泡)，将子叶削成薄片结论

2、：花生种子中有脂肪存在 脂肪的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡34 h， 浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的检测和观察选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液 结论：组织样液中存在蛋白质 在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂 发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试 管也不易洗刷干净. 还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。(1)实验材料的选择 由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质，因此在 实验的选材上应

3、注意以下两点： 材料本身应无色，以免对结果产生干扰； 材料应富含相关物质，使现象更显著。(2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定鉴定成分成分还原糖还原糖蛋白质蛋白质鉴定鉴定原理原理还原糖中的醛基还原糖中的醛基(CHO)在加热条件下在加热条件下能将能将Cu(OH)2中的中的Cu2还原成还原成Cu，从，从而生成砖红色的而生成砖红色的Cu2O沉淀沉淀双缩脲双缩脲(H2NOCNHCONH2)在碱性溶液中能与在碱性溶液中能与Cu2结合生成紫色络合物，结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键脲结构相似的肽键斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双

4、缩脲试剂试剂试剂浓度浓度甲液：质量浓度为甲液：质量浓度为0.1g/mL的的NaOH溶液；溶液；乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/mL的的CuSO4溶液溶液A液：质量浓度为液：质量浓度为0.1g/mL的的NaOH溶液；溶液；B液：质量浓度为液：质量浓度为0.01g/mL的的CuSO4溶液溶液使用使用方法方法甲液、乙液混合均匀后，甲液、乙液混合均匀后，再加入样液再加入样液先加先加A液造成碱性液造成碱性环境，再加环境，再加B液液使用使用条件条件加热加热(水浴水浴5065)不加热，摇匀即可不加热，摇匀即可实验实验现象现象浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色紫色紫色斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲

5、试剂使用方法使用方法甲液、乙液混合均匀后，甲液、乙液混合均匀后，再加入样液再加入样液先加先加A液造成碱性液造成碱性环境，再加环境，再加B液液使用条件使用条件 加热加热(水浴水浴5065)不加热，摇匀即可不加热，摇匀即可实验现象实验现象 浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色紫色紫色习题习题基础题1.（1）；（2）X。典例印证(2010茂名质检)根据相关实验，回答下列问题：(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂 是，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成 沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液 中的含量。 (2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双 缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲

6、试剂B摇匀。 其中双缩脲试剂B的量只有34滴，而不能过量，为 什么？ 。解析还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试剂，原理是相同的：还原糖的CHO将Cu(OH)2的Cu2还原为Cu。在蛋白质鉴定中，NaOH的作用是制造蛋白质与Cu2形成络合物的碱性条件，若Cu2过量，会与NaOH反应，生成蓝色的Cu(OH)2，干扰现象的观察。答案(1)斐林试剂砖红色葡萄糖(2)过量的双缩腺试剂 B 会于试剂 A 反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色 利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以解决以下问题： (1)对生物组织进行某种成分的检测。 (2)在医学上进行疾病

7、的诊断，如糖尿病、肾炎。 (3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。 (4)用于劣质奶粉的鉴定。 (5)不同生物组织中含糖量高低的测定。 1.(2008广东理基)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于 蛋白质有 () A.肽键 B.氨基酸 C.羧基 D.氨基解析：在碱性溶液中，双缩脲(H2NOCNHCONH2)能与Cu2作用，形成紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。答案：A2.(2007广东理基)下列健康人的4种液体样本中，能与双 缩脲试剂发生紫色颜色反应的是 () 尿液胃液汗液唾液 A. B. C. D. 解析

8、：双缩脲试剂是用于鉴定蛋白质的试剂，可与蛋白质发生紫色反应。胃液中含有胃蛋白酶，唾液中含有唾液淀粉酶，它们都属于蛋白质。答案：D3.(2007江苏高考)若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴 定实验，发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固 在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正 确的是 () A.鸡蛋蛋白液稀释不够，搅拌不匀 B.只添加了双缩脲试剂A，未添加双缩脲试剂B C.鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料 D.蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长解析：如果蛋白液稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易进行彻底，并且试管也不容易刷洗干净。只加双缩脲试剂A是为了造成碱性环境

9、，不会发生反应，也不会粘固在试管壁上。鸡蛋蛋白液中含丰富的蛋白质，是蛋白质鉴定的合适材料。蛋白液中先后加入双缩脲试剂A、B，摇匀后即可观察现象，是否粘在试管壁上与反应时间无关。答案：A 还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂试剂试剂浓度浓度甲液：质量浓度为甲液：质量浓度为0.1g/mL的的NaOH溶液；溶液；乙液：质量浓度为乙液：质量浓度为0.05g/mL的的CuSO4溶液溶液A液：质量浓度为液：质量浓度为0.1g/mL的的NaOH溶液；溶液；B液：质量浓度为液：质量浓度为0.

10、01g/mL的的CuSO4溶液溶液使用使用方法方法甲液、乙液混合均匀后，甲液、乙液混合均匀后，再加入样液再加入样液先加先加A液造成碱性液造成碱性环境，再加环境，再加B液液使用使用条件条件加热加热(水浴水浴5065)不加热，摇匀即可不加热，摇匀即可实验实验现象现象浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色紫色紫色典例印证(2010茂名质检)根据相关实验，回答下列问题：(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂 是，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成 沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液 中的含量。 解析还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试剂，原理是相同的：还原糖的CHO将Cu(OH)2的Cu2还原为Cu。在蛋白质鉴定中，NaOH的作用是制造蛋白质与Cu2形成络合物的碱性条件，若Cu2过量，会与NaOH反应，生成蓝色的Cu(OH)2，干扰现象的观察。答案(1)斐林试剂砖红色葡萄糖(2)过量的双缩腺试剂 B 会于试剂 A 反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色 利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以解决以下问题： (1)对生物组织进行某种成分的检测。 (2)在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。 (3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。 (4)用于劣质奶粉的鉴定。 (5)不同生物组织中含糖量高低的