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文档简介

1、细胞生物学总结By 生科2005 狐狸要起早第一章绪论三、简答论述:为什么说细胞生物是重要的学科?细胞生物主要研究的内容:细胞生物学是研究细胞的基本生命活动规律的科学,它从不同层次(显微、亚显微与分子水平)研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细胞信号传递、细胞基因表达与调控、细胞起源与进化。细胞生物学核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。细胞生物学研究的重点领域:(1)染色体DNA与蛋白质相互作用;(2)细胞增殖、分化、调亡、衰老及其调控;(3)细胞信号转导;(4)细胞结构体系的装配;(5)蛋白质与蛋白质相互作用;(6)细胞内的网络调控。第二章细胞基本知识概要二、名词解释:病

2、毒:由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”,营寄生生活。古细菌:又称原细菌,是一些生长在极端特殊环境中(高温或高盐)的细菌。古核细胞的形态结构、遗传装置虽与原核细胞相似,但一些基本分子生物学特点又与真核细胞接近。分辨率:指区分开两个质点间的最小距离。是判断显微镜性能好坏的标准。三、简答论述:怎样理解细胞是生命活动的基本单位?细胞是有膜包围的能进行独立繁殖的最小原生质团,简单地说细胞是生命活动的基本单位,可以从以下角度去理解:(1)细胞是构成有机体的基本单位;(2)细胞具有独立完整的代谢体系,是代谢与功能的基本单位;(3)细胞是有机体生长与发育的基础;(4)细胞具有遗传的全能性,

3、即具有一套基因组(基因组是指一种生物的基本染色体套即单个配子内所含有的全部基因,在原核生物中即是一个连锁群中所含的全部遗传信息);(5)没有细胞就没有完整的生命。病毒的类型、特点:病毒所带的酶科双链DNA疱疹病毒、腺病毒、痘病毒单链DNA细小DNA病毒双链RNA转录酶呼肠弧病毒单链RNA侵染性小RNA病毒非侵染性转录酶粘液病毒逆转录病毒逆转录酶逆转病毒为什么支原体是最小的细胞结构?特点:(1)一个细胞生存与增值必须具备的结构是:细胞膜、遗传信息载体RNA与DNA、进行蛋白质合成的一定数量的核糖体以及催化主要酶促反应所需要的酶。这些东西支原体基本具备。(2)有人估计完成细胞功能至少需要100种酶

4、,加上核糖体、细胞膜和核酸等,应必须占有的空间直径不可小于100nm。而现在发现的最小支原体的直径已接近这个极限。(3)作为比支原体更小、更简单的细胞,又要维持生命活动的基本要求,似乎是不可能存在的。所以支原体是最小的细胞结构。古细胞:古细菌,又称原细菌,是一些生长在极端特殊环境中(高温或高盐)的细菌。最早发现的是产甲烷细菌类。古核细胞的形态结构、遗传装置虽与原核细胞相似,但一些基本分子生物学特点又与真核细胞接近。现已有更多的论据说明真核生物可能起源于古核生物,论据如下:(1)古细菌的细胞膜:亲水头(甘油)与疏水尾间通过醚键连接,而不是酯键连接;疏水尾是由异戊二烯的重复单位构成,而不是脂肪酸;

5、古生菌的细胞膜存在着独特的单分子层膜或单分子和双分子混合膜。(2)古细菌的细胞壁:细胞壁成分与真核细胞相似,而非由含壁酸的肽聚糖构成,因此抑制壁酸合成的链霉素,抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸,抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对古细菌与真核细胞无作用。(3)古细菌DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。多数古核细胞的基因组中存在内含子。(4)古细菌有类核小体结构:古细菌具有组蛋白,而且能与DNA构建成类似核小体结构。(5)古细菌有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势,含有60种以上蛋白,介于真核细胞(70-84种)与真细菌(55种)之间。抗生素同样不能抑制古核细

6、胞类核糖体的蛋白质合成。(6)古细菌的5SrRNA:根据对5SrRNA的分子进化分析,认为古细菌与真核生物同属一类,而真细菌却与之差距甚远。5SrRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。真核细胞、原核细胞的区别:基本特征比较表原核真核细胞膜有(多功能性)有核膜无有染色体一个环状DNA分子,不与蛋白质结合2个染色体以上,染色体由DNA与蛋白质结合组成核仁无有复杂细胞器无有核糖体70s(50s+30s)80s(60s+40s)核外DNA细菌有裸露的质粒DNA线粒体DNA、叶绿体DNA细胞壁成分氨基酸与壁酸动物无,植物:纤维素、果胶细胞骨架无有细胞分裂方式无丝分裂有丝分裂为主遗传结构、基

7、因表达比较原核真核信息量少多DNA分子数12个以上DNA分子结构环状线状与组蛋白结合不结合与5种组蛋白结合是否构成染色体不构成基因组数1n2n,多n基因数几千大于几万复制周期性不明显明显重复序列无有内含子无有基因表达调控操纵子复杂、多层次转录与翻译的空间关系同时同地进行核内专录、质内翻译转录翻译后修饰无有真核细胞内的三大系统:以脂类及蛋白质成分为基础的生物末结构系统。以核酸与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统。以特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。第三章细胞生物学研究方法二、名词解释:分辨率:分辨率是指区分开两个质点间的最小距离。沉降系数:颗粒在单位离心力场中移动的速度。通常以每单位重力的沉降

8、事件表示,单位为S。原位杂交:用标记的核酸探针通过分子杂交确定特殊核苷酸序列在染色体上或在细胞中的位置的方法。原代细胞:是指从机体取出后立即培养的细胞。(原代细胞和传代细胞都特指动物?)传代细胞:适应在体外培养条件下,持续传代培养的细胞。细胞株:当原代培养的细胞传至10代左右时,生长出现停滞,仅有极少数细胞能够继续传下去,这种传代细胞称为细胞株。细胞系:细胞株传至50代后会出现危机,仅有极少数细胞有可能无限制的传下去。这些细胞发生了遗传突变并带有癌细胞的特点,并失去接触抑制。原生质体:是细胞内有生命物质的总称,包括细胞质、细胞核、质体、线粒体、高尔基体、核糖体、溶酶体等,是细胞的主要部分,细胞

9、的一切代谢活动都在这里进行。非细胞体系:来源于细胞而不具有完整的细胞结构,但包含了进行生物学反应所需的物质(如供能系统和酶反应体系等)组成的体系。细胞工程:是在细胞水平上的生物工程。细胞融合:两个或多个细胞融合成一个双核或多核细胞的现象。单克隆抗体:单克隆抗体是由产生抗体的淋巴细胞同肿瘤细胞融合而成的可无限增殖的细胞分泌产生的抗体。四、实验:光学显微镜的种类:(1)普通复式光学显微镜技术普通光学显微镜主要由三部分组成:光学放大系统,即目镜和物镜;照明系统;机械和支架系统。显微镜的性能优劣决定于它的分辨率。分辨率是指显微镜区分开相近两点的能力。(2)荧光显微镜技术在紫外光显微镜基础上发展而来,利

10、用样品自发荧光和诱发荧光,可以对生物大分子进行定性和定位研究。不仅可以观察固定切片标本,还可以在活体染色后对活细胞进行研究。(3)激光共焦点扫描显微镜技术共焦点是指物镜和聚光镜同时聚焦到同一小点,它在某一瞬间只用一束通过检测器前的小孔的光成像,可显著提高分辨率。可以观察较厚样品的内部结构。(4)相差显微镜技术和微分干涉显微镜技术光线在通过密度不同的介质时,其滞留程度不同,即产生了光程差和相位差。相差显微镜的基本原理把光程差变成振幅差(即明暗),从而提高样品反差,故样品不需染色,适合观察活细胞。它在结构上与普通显微镜最大的不同是在物镜后装有相差板。(5)暗视野显微镜技术m之间的粒子的存在和运动。

11、用于观察单细胞有机体、硅藻、细菌、细胞中的线状结构等。(6)倒置显微镜技术由于物镜、聚光镜和光源的位置颠倒过来而得名,它的物镜和聚光镜之间的工作距离很长,能直接对培养皿中的培养细胞进行观察,还可与电视录像、相差物镜、电影摄影等装置相连。光学显微镜和电子显微镜的区别及应用:项 目光学显微镜电子显微镜普通光学显微镜荧光显微镜分辨本领200nm100nm0.1nm光 源可见光紫外光电子束透 镜玻璃透镜玻璃透镜电磁透镜真 空不要求真空不要求真空要求真空成像原理利用样品对光的吸收形成明暗反差或颜色变化利用样品对电子束的折射和投射形成明暗反差对电镜观察的生物样品制备技术的特殊要求:(1)样品要薄;(2)更

12、好地保持样品的精细结构;(3)样品具有一定的反差。扫描隧道显微镜(STM)由1986年的诺贝尔物理学奖获得者宾尼和罗雷1981年发明的。能达到横向0.1nm,纵向高于0.01nm原子级分辨率,能直接观察到物质表面的原子结构,描绘三维原子结构图,并能对表面非常局部的区域产生。STM的原理是利用量子隧道效应和扫描,它用一个极细的针尖(头部有个单原子)去接近样品表面,当针尖和表面靠近小于1nm时,针尖头部原子和样品表面原子的电子云发生重叠。若在针尖和样品间加上一个偏压,电子会通过针尖和样品间构成势垒而形成隧道电流。通过控制针尖与样品间距的恒定并使针尖沿表面进行精确的三维移动,就可以把表面的信息记录下

13、来。细胞分析:离心方法:利用多种方法使细胞崩解,形成细胞器和细胞组分的混合匀浆,再通过差速离心,即利用不同离心速度所产生的不同离心力,将各种亚细胞组分和各种颗粒分开。差速离心与密度离心相结合可以达到精确的分离。细胞不同组分沉降率不同,主要依赖于它们的形状和大小,通常以沉降系数S来表示。沉降系数是指悬浮在密度较低的溶剂中的一种溶质大分子,在每单位离心场作用下的沉降速率。细胞化学方法内容:原位成分分析常利用一些显色剂与所检物质的特殊基团特异性结合的特征,通过染色反应的部位和颜色的深浅来断某种物质在细胞内的分布与含量。(1)福尔根反应可特异显示DNA的存在部位;(2)PAS反应可确定多糖的存在;(3

14、)四氧化锇可证明脂肪滴的存在;(4)苏丹III和苏丹黑常用于脂肪的鉴定;(5)米伦反应及重氮反应等用来测定蛋白质。检测和定位酶的技术是基于细胞或组织切片与适宜底物共同孵育,通过一定方法使产物显示出来。单克隆抗体技术的制备过程。(1)1975年英国科学家Milstein和Kohler将产生的抗体的淋巴细胞同肿瘤细胞融合,成功地建立了单克隆抗体技术。(2)动物受到外界抗原刺激后可诱发免疫反应,产生相应的抗体,这一职能是由B淋巴细胞承担的;肿瘤细胞在体外培养条件下可以无限传代,是“永久”的细胞。(3)Milstein和Kohler为了制备纯一的单克隆抗体,把小鼠骨髓瘤细胞与经绵羊免疫过的小鼠细胞(B

15、淋巴细胞)在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生融合。(4)融合后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,一方面可以分泌抗绵羊红细胞的抗体,另一方面可以在体外培养条件下或移植到体内无限增值,从而分泌大量单克隆抗体。细胞工程内容:细胞工程是应用细胞生物学方法,按照预先的设计,有计划地改变或创造细胞遗传物质的技术以及发展这种技术的领域为细胞工程。细胞工程所使用的技术主要是细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合和显微注射等。第四章细胞膜与细胞表面一、知识点:1、膜骨架蛋白包括血影蛋白,肌动蛋白,锚蛋白,带4.1蛋白。2、膜骨架蛋白网络也细胞膜之间的连接主要通过锚蛋白。3、天疱疮患者:4、细胞与细胞连接(黏着

16、带、桥粒),细胞与基质连接(黏着斑、半桥粒)5、在Ehlers-Danlos综合症中,由于缺乏一种切除前肽的酶,则胶原不能正常装配为高度有序的纤维。二、名词解释:细胞膜:细胞膜又称质膜,是指围绕在细胞最外层,由脂质和蛋白质组成的生物膜。生物膜:细胞内的膜系统与细胞膜统称为生物膜。脂筏模型:在生物膜上胆固醇富集而形成有序脂向,如同“脂筏”一样载着各种蛋白,脂筏最初可能在内质网上形成,转运到细胞膜上后,有些脂筏可在不同程度上与膜下细胞骨架蛋白交联。内膜系统:细胞的内膜系统是在结构、功能乃至发生上相关的,由膜围绕的细胞器或细胞结构。主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体和分泌泡等。脂质体:是根据磷

17、脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。去垢剂:去垢剂是一端亲水一端疏水的两性小分子,是用于分离与研究膜蛋白的常用试剂。包括离子型与非离子型。成斑现象:在某些细胞中,当荧光抗体标记时间继续延长,以均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布,聚集在细胞表面的某些部位,即所谓成斑现象。成帽现象:在某些细胞中,当荧光抗体标记时间继续延长,以均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布,聚集在细胞的一端,即所谓成帽现象。膜骨架:膜骨架指质膜下与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网架结构,它参与维持质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。血影:红细胞经低渗处理,细胞破裂释放出内容物,留下一个保持原形的空壳

18、,称为血影。紧密连接:是封闭连接的主要形式,可以阻止可溶性物质从上皮细胞层一侧扩散到另一侧,具有封闭、隔离和一定的支持功能。一般存在于上皮细胞之间。锚定连接:桥粒:存在于承受强拉力的组织中。相邻细胞中的中间纤维通过细胞质斑和钙粘素构成了穿胞细胞骨架网络,形成纽扣状结构。半桥粒:粘合带:呈带状环绕细胞,一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连接下方。间隙中的粘合分子为E-钙粘素。相邻细胞中的肌动蛋白丝束通过钙粘蛋白和附着蛋白编织成了一个广泛的网络,把相邻细胞联合在一起。粘合斑:位于细胞与细胞外基质间,通过整合素把细胞中的肌动蛋白束和基质连接起来;连接处的质膜呈盘状,称为粘合斑。连接子:间隙连接的间隙与两层

19、质膜中有大量蛋白质颗粒,是构成间隙连接的基本单位,称连接子,胞间连丝:是植物细胞特有的通讯连接,是由穿过细胞壁的质膜围成的细胞质通道组成,内填充有一圈细胞质溶质。一些小分子可通过细胞质溶质环在相邻细胞间传递。细胞外被:细胞外基质:是由大分子构成的错综复杂的网络,为细胞的生存及活动提供适宜的场所,并通过信号转导系统影响细胞的形状、代谢、功能、迁移、增殖和分化。糖胺聚糖:透明质酸:蛋白聚糖:三、简答论述: 请简要说明细胞膜结构模型的发展历程双层脂分子 “蛋白质-脂质-蛋白质”三明治模型 单位膜模型 流动镶嵌模型 脂筏模型请简要说明生物膜的结构(1)具有极性头部和非极性尾部的磷脂分子在水相中具有自发

20、形成封闭的膜系统的性质,以疏水性非极性尾部相对,极性头部朝向水向的磷脂双分子层是组成生物膜的基本结构成分,尚未发现在生物膜结构中起组织作用的蛋白。(2)蛋白分子以不同的方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面,蛋白的类型,蛋白分布的不对称性及其与脂分子的协同作用赋予生物膜具有各自的特性与功能。(3)生物膜可看成是蛋白质在双层脂分子中的二维溶液。然而,膜蛋白与膜脂之间,膜蛋白与膜蛋白之间及其与膜两侧其他生物大分子的复杂的相互作用,在不同程度上限制了膜蛋白和膜脂的流动性。简述膜流动性的影响因素(1)胆固醇:胆固醇的含量增加会降低膜的流动性;(2)脂肪酸链的饱和度:脂肪酸链所含双键越多越不饱和,使膜流动

21、性增加;(3)脂肪酸链的链长:长链脂肪酸相变温度高,膜流动性降低;(4)卵磷脂/鞘磷脂:卵磷脂/鞘磷脂比例高则膜流动性增加,是因为鞘磷脂粘度高于卵磷脂;(5)膜蛋白和膜脂的结合方式、温度、酸碱度、离子强度等都可以影响膜脂的流动性。请问组成生物膜的磷脂分子的主要特征是什么?膜蛋白的种类(膜蛋白由哪些物质组成):膜蛋白是膜功能的主要体现者。根据膜蛋白与脂分子的结合方式,可分为膜内在蛋白、膜外在蛋白(和膜锚定蛋白。1.膜内在蛋白(1)膜内在蛋白可能全为跨膜蛋白,为两性分子,疏水部分位于脂双层内部,亲水部分位于脂双层外部。(2)由于存在疏水结构域,整合蛋白与膜的结合非常紧密,只有用去垢剂才能从膜上洗涤

22、下来,如离子型去垢剂SDS、非离子型去垢剂Triton X-100。(3)膜整合蛋白的跨膜结构域可以是1至多个疏水的螺旋,形成亲水通道的整合蛋白由多个两性螺旋组成或由两性折叠组成亲水通道。2.膜外周蛋白膜外周蛋白靠离子键或其它较弱的键与膜表面的蛋白质分子或脂分子的亲水部分结合,因此只要改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来,有时很难区分整合蛋白和外周蛋白,主要是因为一个蛋白质可以由多个亚基构成,有的亚基为跨膜蛋白,有的则结合在膜的外部。3.膜锚定蛋白糖磷脂酰肌醇锚定蛋白位于细胞膜的外小叶,用磷脂酶C(能识别含肌醇的磷脂)处理细胞,能释放出结合的蛋白。许多细胞表面的受体、酶、细胞粘附

23、分子和引起羊瘙痒病的PrPC都是这类蛋白。膜内在蛋白与膜脂结合的方式?简要说明膜的流动性(从膜脂流动和膜蛋白流动两个方面)膜蛋白分子主要有侧向扩散和旋转扩散两种运动方式,可用光脱色恢复技术和细胞融合技术检测侧向扩散。旋转扩散指膜蛋白围绕与膜平面垂直的轴进行旋转运动,膜蛋白的侧向运动受细胞骨架的限制,破坏微丝的药物如细胞松弛素B能促进膜蛋白的侧向运动。膜脂分子的运动:(1)侧向扩散:同一平面上相邻的脂分子交换位置;(2)旋转运动:膜脂分子围绕与膜平面垂直的轴进行快速旋转;(3)摆动运动:膜脂分子围绕与膜平面垂直的轴进行左右摆动;(4)伸缩震荡:脂肪酸链沿着与纵轴进行伸缩震荡运动;(5)翻转运动:

24、膜脂分子从脂双层的一层翻转到另一层;(6)旋转异构:脂肪酸链围绕C-C键旋转,导致异构化运动。怎样说明膜的不对称性?膜脂的不对称性:脂分子在脂双层中呈不均匀分布,质膜的内外两侧分布的磷脂的含量比例也不同。磷脂酰胆碱和鞘磷脂主要分布在外小页,而磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸主要分布在质膜内小叶。用磷脂酶处理完整的人类红细胞,80%的磷脂酰胆碱降解,而磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸分别只有20%和10%的被降解。膜蛋白的不对称性:膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方向性和分布的区域性,各种膜蛋白在膜上都有特定的分布区域。某些膜蛋白只有在特定膜脂存在时才能发挥其功能,如蛋白激酶C结合于

25、膜的内侧,需要磷脂酰丝氨酸的存在下才能发挥作用;线粒体内膜的细胞色素氧化酶,需要心磷脂存在才具活性。3.复合糖的不对称性无论在任何情况下,糖脂和糖蛋白只分布于细胞膜的外表面,这些成分可能是细胞表面受体,并且与细胞的抗原性有关。细胞膜的功能有哪些?(1)为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;(2)选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排出;(3)提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息的跨膜传递;(4)为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;(5)介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接;(6)参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。细胞外被的作用有:(1)保护作用:细胞外被具有一定

26、的保护作用,去掉细胞外被,并不会直接损伤质膜。(2)细胞识别:细胞识别与构成细胞外被的寡糖链密切相关。寡糖链由质膜糖蛋白和糖脂伸出,每种细胞寡糖链的单糖残基具有一定的排列顺序,编成了细胞表面的密码,它是细胞的“指纹”,为细胞的识别形成了分子基础;同时细胞表面尚有寡糖的专一受体,对具有一定序列的寡糖链具有识别作用。细胞识别实质上是分子识别。(3)决定血型:血型实质上是不同的红细胞表面抗原,人有20几种血型,最基本的血型是ABO血型。红细胞质膜上的糖鞘脂是ABO血型系统的血型抗原,血型免疫活性特异性的分子基础是糖链的糖基组成。A、B、O三种血型抗原的糖链结构基本相同,只是糖链末端的糖基有所不同。什

27、么是紧密连接?又称封闭小带,存在于脊椎动物的上皮细胞间,相邻细胞之间的质膜紧密结合,没有缝隙。上皮细胞层对小分子的透性与嵴线的数量有关,有些紧密连接甚至连水分子都不能透过。紧密连接的主要作用是封闭相邻细胞间的接缝,防止溶液中的分子沿细胞间隙渗入体内,从而保证了机体内环境的相对稳定;消化道上皮、膀胱上皮、脑毛细血管内皮以及睾丸支持细胞之间都存在紧密连接关于锚定连接1.粘合带与粘合斑粘合带呈带状环绕细胞,一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连接下方。在粘合带处相邻细胞的间隙约15-20nm,间隙中的粘合分子为E-钙粘素。粘合带处的质膜下方有与质膜平行排列的肌动蛋白束,钙粘蛋白通过附着蛋白与肌动蛋白束相结合

28、。相邻细胞中的肌动蛋白丝束通过钙粘蛋白和附着蛋白编织成了一个广泛的网络,把相邻细胞联合在一起。粘合斑位于细胞与细胞外基质间,通过整合素把细胞中的肌动蛋白束和基质连接起来;连接处的质膜呈盘状,称为粘合斑。2.桥粒与半桥粒桥粒存在于承受强拉力的组织中,如皮肤、口腔、食管等处的复层鳞状上皮细胞之间和心肌中。相邻细胞间形成纽扣状结构,细胞膜之间的间隙约30nm,质膜下方有细胞质附着蛋白质,如片珠蛋白、桥粒斑蛋白等。斑上有中间纤维相连。 半桥粒在结构上类似桥粒,位于上皮细胞基面与基膜之间,它桥粒的不同之处在于:(1)只在质膜内侧形成桥粒斑结构,其另一侧为基膜;(2)穿膜连接蛋白为整合素而不是钙粘素,整合

29、素是细胞外基质的受体蛋白;(3)细胞内的附着蛋白为角蛋白。简要说明间隙连接及其调控机制间隙连接存在于大多数动物组织。连接子是构成间隙连接的基本单位,由6个相同或相似的跨膜蛋白亚单位环绕而成,直径8nm,中心形成一个直径约1.5nm的孔道。=细胞内的小分子,如无机盐离子、糖、氨基酸、核苷酸和维生素等有可能通过间隙连接的孔隙。间隙连接的通透性是可调节的,在实验条件下,降低细胞pH值或升高Ca2+浓度均可降低间隙连接的通透性。当细胞破损时,大量Ca2+进入,导致间隙连接关闭,以免正常细胞受到伤害。间隙连接的主要作用有:(1)参与细胞分化:胚胎发育的早期,细胞间通过间隙连接相互协调发育和分化。小分子物

30、质即可在一定细胞群范围内,以分泌源为中心,建立起递变的扩散浓度梯度,以不同的分子浓度为处于梯度范围内的细胞提供位置信息,从而诱导细胞按其在胚胎中所处的局部位置向着一定方向分化。(2)协调代谢:在体外培养条件下,把不能利用外源次黄嘌呤合成核酸的突变型成纤维细胞和野生型成纤维细胞共同培养,则两种细胞都能吸收次黄嘌呤合成核酸;如果破坏细胞间的间隙连接,则突变型细胞不能吸收次黄嘌呤合成核酸。(3)构成电紧张突触:平滑肌、心肌、神经末梢间均存在的这种间隙连接,称为电紧张突触(electrotonic synapses)。电紧张突触无须依赖神经递质或信息物质即可将一些细胞的电兴奋活动传递到相邻的细胞。化学

31、突触化学突触时存在于可兴奋细胞间的一种连接方式,其作用是通过释放神经递质来传导兴奋,由突触前膜、突触后膜和突触间隙三部分组成。突触前神经元的突起末梢膨大呈球形,称突触小体,突触小体贴附在突触后神经元的胞体或突起的表面形成突触。突触小体的膜称突触前膜,与突触前膜相对的胞体膜或突起的膜称突触后膜,两膜之间称为突触间隙。突触小体内有许多囊泡,称突触小泡,内含神经递质。当神经冲动传到突触前膜,突触小泡释放神经递质,为突触后膜的受体接受(配体门通道),引起突触后膜离子通透性改变,膜去极化或超极化。简要说明细胞表面的黏着因子细胞粘附分子(CAM)是参与细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质之间相互作用的分子,细

32、胞粘附分子可大致分为钙粘素、选择素、免疫球蛋白超家族、整合素及透明质酸粘素五类。细胞粘附分子都是跨膜糖蛋白,分子结构由三部分组成,即胞外区(肽链的N端部分,带有糖链,负责与配体的识别)、跨膜区(多为一次跨膜)和胞质区(肽链的C端部分,一般较小,或与质膜下的骨架成分直接相连,或与胞内的化学信号分子相连,以活化信号转导途径)。多数细胞粘附分子的作用依赖于二价阳离子,如Ca2+,Mg2+。细胞粘附分子的作用机制有两相邻细胞表面的同种CAM分子间的相互识别与结合(亲同性粘附)、两相邻细胞表面的不同种CAM分子间的相互识别与结合(亲异性粘附)、两相邻细胞表面的相同CAM分子借细胞外的连接分子相互识别三种

33、方式。脂质体及其应用脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层结构制备的人工膜。单层脂分子铺展在水表面,搅动后形成乳浊液,即形成极性端向外而非极性端向内的双层脂分子的球形结构。脂质体中裹入不同的药物或酶等有特殊功能的大分子,可以诊断与治疗多种疾病。四、实验:怎样证明与抗体结合的膜蛋白在质膜的运动?(1)光脱色恢复技术:用荧光标记的抗体与细胞膜上的抗原反应,使细胞膜带有荧光,用紫外线照射,使一侧细胞的荧光淬灭,放置一段时间后会发现荧光物质又均匀分布在细胞表面。(2)细胞融合技术:1970年Larry Frye等人将人和鼠的细胞膜用不同荧光抗体标记后,让两种细胞融合,杂种细胞一半发红色荧光、另

34、一半发绿色荧光,放置一段时间后发现两种荧光抗体均匀分布。第五章物质的跨膜运输与信号传递一、知识点:1、细胞与细胞的识别: (1)同种同类(血小板细胞) (2)同种异类(精卵结合) (3)异种异类(细菌、真菌感染) (4)异种同类(器官移植)二、名词解释:被动运输:是指通过简单扩散或协助扩散实现物质从浓度高处经质膜向浓度低处运输的方式,运输速率依赖于膜两侧被运送物质的浓度差及其分子大小、电荷性质等,不需要细胞代谢供应能量。 简单扩散:是指物质顺浓度梯度的扩散,不需要消耗细胞本身的代谢能,也不需专一的载体膜蛋白,只要物质在膜两侧保持一定的浓度差,物质便扩散穿膜,又称自由扩散。 协助扩散:各种极性分

35、子和无机离子,如糖、氨基酸、核苷酸以及细胞代谢物等顺浓度梯度或电化学梯度减小方向的跨膜转运,该过程不需要细胞提供能量,但需要特异的膜蛋白“协助”物质转运使其转运速率增加,转运特异性增强。载体蛋白:存在于细胞膜上的一种具有特异性传导功能的蛋白质,它能与特定的溶质分子结合,通过一系列构象改变介导溶质分子的跨膜转运;载体蛋白的作用主要是介导顺浓度或电化学梯度的运输。通道蛋白(离子通道):是衡跨质膜的亲水性通道,允许适当大小的离子顺浓度梯度通过,故又称离子通道;钠钾泵:主动运输:是由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由浓度低的一侧向高浓度的一侧进行跨膜转运的方式。协同运输:是一类靠间接提供能量

36、完成的主动运输方式。物质跨膜运动所需要的能量来自膜两侧离子的电化学浓度梯度,而维持这种电化学势的是Na+-K+泵或质子泵。费城染色体:冠状动脉粥样硬化病:胞饮作用:吞噬作用:细胞内吞较大的固体颗粒物质,如细菌、细胞碎片等,称为吞噬作用。胞吐作用:某些大分子物质通过形成小囊泡从细胞内部移至细胞表面,小囊泡的膜与质膜融合,将物质排出细胞之外,称为胞吐作用。细胞通讯:是指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞产生相应的反应。细胞识别:是指细胞通过其表面的受体与胞外信号物质分子(配体)选择性地相互作用,从而导致胞内一系列生理生化变化,最终表现为细胞整体的生物学效应的过程。信号通路:是指细胞接受外界

37、信号,通过一整套特定的机制,将胞外信号转导为胞内信号,最终调节特定基因的表达,引起细胞的应答反应,是细胞信号系统的主线,这种反应系列称为信号通路。受体:是一种能够识别和选择性结合某种配体(信号分子)的大分子物质,多为糖蛋白。第二信使:胞外化学物质(即第一信使)不能进入细胞,它作用于细胞表面受体,导致产生胞内第二信使,激发一系列生化反应,最后产生一定的生理效应,第二信使降解使其信号作用终止;第二信使包括cAMP、cGMP、三磷酸肌醇(IP3)、二酰基甘油(DG)等三、简答论述:列表比较简单扩散和协助扩散的相同点与不同点肾胱氨酸结石形成的机理是什么?载体蛋白与酶有哪些区别?什么是通道蛋白?它有什么

38、特征?是如何分类的?关于钠钾泵胞饮作用和吞噬作用的区别受体介导的胞吞作用关于高尔基体分泌小泡简述细胞通讯的方式:细胞的信号分子的分类:什么是受体?受体的特点是什么?第二信使学说:说明NO在导致血管平滑肌舒张中的作用通过细胞内受体介导的信号传递:通过细胞表面受体介导的信号跨膜传递:cAMP如何激活蛋白激酶A?如何活化受体酪氨酸激酶(RTKs)如何启动Ras蛋白开关?蛋白激酶的磷酸化级联反应的基本步骤细胞信号传递的基本特征比较主动运输与被动运输的特点及生物学意义:被动运输:是指通过简单扩散或协助扩散实现物质从浓度高处经质膜向浓度低处运输的方式,运输速率依赖于膜两侧被运送物质的浓度差及其分子大小、电

39、荷性质等,不需要细胞代谢供应能量。主动运输:是由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由浓度低的一侧向高浓度的一侧进行跨膜转运的方式。比较胞饮作用和吞噬作用的异同:1、胞吞泡的大小不同,胞吞泡直径一般小于150nm。2、所有真核细胞都能通过胞饮作用连续摄入溶液和分子,而大的颗粒性物质则主要是通过特殊的吞噬细胞摄入的。前者是一个连续发生的过程,后者首先需要被吞噬物与细胞表面结合并激活细胞表面受体,因此是一个信号触发过程。3、胞吞泡的形成机制不同。胞饮泡的形成需要网格蛋白或者一类蛋白的帮助,而吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助。比较组成形性胞吐途径和调节性胞吐途径的特点及其生物学意义:1

40、21细胞以哪些方式进行通讯?各种方式之间有何不同?细胞通讯主要有以下三种方式:1.细胞间形成间隙连接使细胞质相互沟通,通过交换小分子来实现代谢偶联或电偶联。细胞间隙连接是细胞间的直接通讯方式。两个相邻的细胞以连接子相联系。连接子中央为直径1.5nm的亲水性孔道,允许小分子物质如Ca2+、cAMP通过,有助于相邻同型细胞对外界信号的协同反应,如可兴奋细胞的电耦联现象。2.细胞间接触性依赖的通讯细胞间接触性依赖的通讯是指细胞通过其表面信号分子(受体)与另一细胞表面的信号分子(配体)选择性地相互作用,最终产生细胞应答的过程,即细胞识别。细胞间接触性依赖的通讯可分为:(1)同种同类细胞间的识别:如胚胎

41、分化过程中神经细胞对周围细胞的识别,输血和植皮引起的反应可以看作同种同类不同来源细胞间的识别;(2)同种异类细胞间的识别:如精子和卵子之间的识别,T与B淋巴细胞间的识别;(3)异种异类细胞间的识别:如病原体对宿主细胞的识别;(4)异种同类细胞间的识别:仅见于实验条件下。3.细胞通过分泌化学信号进行细胞间通讯化学通讯是间接的细胞通讯,指细胞分泌一些化学物质(如激素)至细胞外,作为信号分子作用于靶细胞,调节其功能。细胞有哪几种方式通过分泌化学信号进行细胞间相互通讯?根据化学信号分子可以作用的距离范围,可分为以下四类:(1)内分泌:内分泌细胞分泌的激素随血液循环输至全身,作用于靶细胞。其特点是:低浓

42、度;全身性,随血液流经全身,但只能与特定的受体结合而发挥作用;长时效,激素产生后经过漫长的运送过程才起作用,而且血流中微量的激素就足以维持长久的作用。(2)旁分泌:细胞分泌的信号分子通过扩散作用于邻近的细胞,包括各类细胞因子(如表皮生长因子)和气体信号分子(如NO)。(3)突触信号发放:神经递质(如乙酰胆碱)由突触前膜释放,经突触间隙扩散到突触后膜,作用于特定的靶细胞。(4)自分泌:信号发放细胞和靶细胞为同类或同一细胞,常见于癌变细胞,如大肠癌细胞可自分泌产生胃泌素,介导调节c-myc、c-fos等癌基因表达,从而促进癌细胞的增殖。何谓信号传递中的分子开关蛋白?举例说明其作用机制:简要说明G蛋

43、白偶联受体介导的信号通路有何特点:G蛋白偶联型受体是指配体-受体复合物与靶蛋白的作用需要通过与G蛋白偶联,在细胞内产生第二信使,将细胞外信号跨膜传递到细胞内影响细胞的行为。G蛋白,即三聚体GTP结合调节蛋白位于质膜胞质侧;由、三个亚基组成,和亚基通过共价结合的脂肪酸链尾结合在膜上。G蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作用,当亚基与GDP结合时处于关闭状态,与GTP结合时处于开启状态;亚基具有GTP酶活性,能催化所结合的ATP水解,恢复无活性的三聚体状态,其GTP酶的活性能被RGS增强。G蛋白耦联型受体为7次跨膜蛋白,受体胞外结构域识别胞外信号分子并与之结合,胞内结构域与G蛋白耦联。通过与G蛋白

44、耦联,调节相关酶活性,在细胞内产生第二信使,从而将胞外信号跨膜传递到胞内。G蛋白耦联型受体包括多种神经递质、肽类激素和趋化因子的受体,在味觉、视觉和嗅觉中接受外源理化因素的受体亦属G蛋白耦联型受体。概述受体酪氨酸激酶介导的信号通路的组成、特点及其主要功能。(1)受体酪氨酸激酶(RTKs)的胞外区是结合配体结构域,配体是可溶性或膜结合的多肽或蛋白类激素,包括胰岛素和多种生长因子;胞内段是酪氨酸蛋白激酶的催化部位,并具有自磷酸化位点。(2)配体(如EGF)在胞外与受体结合并引起构象变化,导致受体二聚化形成同源或异源二聚体,在二聚体内彼此相互磷酸化胞内段酪氨酸残基,即实现受体的自磷酸化,激活受体本身

45、的酪氨酸蛋白激酶活性,磷酸化的酪氨酸残基可被含有SH2结构域(介导信号分子与含磷酸酪氨酸的蛋白分子结合)的胞内信号蛋白所识别并与之结合,启动信号转导。(3)受体酪氨酸激酶(RTK)结合信号分子,形成二聚体,并发生自磷酸化而活化,活化的RTK激活RAS,由活化的RAS引起蛋白激酶的磷酸化级联反应。(4)SH3结构域:约50-100个氨基酸组成,介导信号分子与富含脯氨酸的蛋白分子结合。第六章细胞质基质与细胞内膜系统一、知识点:1、具有氧化酶系的细胞器有:肝细胞内质网、线粒体、过氧化物酶体。2、什么是“台-萨氏”病?二、名词解释:细胞质基质:在真核细胞细胞质中,除去可分辨的细胞器之外的胶状物质,称为

46、细胞质基质。内质网:是真核细胞重要的细胞器, 是由封闭内膜系统及其围成的腔形成互相沟通的网状结构。内膜系统:细胞内各种膜在形态结构上有一定的共性,因此总称为生物膜。细胞内部由膜构成的细胞器是互相关联的,称为内膜系统。糖基转移酶:热休克蛋白:易位子:溶酶体:分泌溶酶体:过氧化物酶体(微体):分子伴侣:三、简答论述:详细叙述细胞质基质的功能:许多中间代谢过程都在细胞质基质中进行,如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、糖醛酸途径、糖原的合成与分解的过程。细胞质基质的另一方面功能与细胞骨架相关。细胞质基质在蛋白质的修饰、蛋白质选择性的降解等方面也起着重要作用。A蛋白质的修饰:辅酶或辅基与酶的共价结合。磷酸化与去

47、磷酸化,用于调节许多蛋白质的生物活性。糖基化。对某些蛋白质的N端进行甲基化修饰。酰基化。B控制蛋白质寿命。 C降解变性和错误折叠的蛋白质。D帮助变性和错误折叠的蛋白质重新折叠。详细叙述内质网的功能。蛋白质的合成。以这种方式合成的蛋白质主要包括:向细胞外分泌的蛋白质:如胰腺细胞分泌的酶,浆细胞分泌的抗体,小肠杯状细胞分泌的粘蛋白等。膜的整合蛋白:细胞膜上的膜蛋白及内质网、高尔基体和溶酶体膜上的膜蛋白。构成细胞器中的可溶性驻留蛋白:溶酶体与植物液泡中的酸性水解酶类。脂质的合成。内质网合成构成细胞所需要的包括磷脂和胆固醇在内的膜脂,其中最主要的磷脂是磷脂酰胆碱。蛋白质的修饰与加工。新生多肽的折叠与装

48、配。不能正确折叠的畸形肽链或未装配成寡聚体的蛋白质亚单位,不能进入高尔基体。而会被蛋白酶降解。内质网中有蛋白二硫键异构酶,它附着在内质网膜腔面上,可以切断二硫键,形成自由能最低的蛋白构象,以帮助新生的蛋白质重新形成二硫键并处于正确折叠的状态。内质网含有一种结合蛋白,可识别不正确折叠的蛋白或未装配好的蛋白亚单位,并存它们重新折叠装配。蛋白二硫键异构酶和Bip等蛋白都具有有4肽信号以保证它们滞留在内质网中,并维持很高的浓度。内发质网的其他功能。肝细胞中的光面内质网是合成外输性脂蛋白颗粒的基地,还可以清除脂溶性的废物和代谢产生的有害物质,因而具有解毒功能。在某些合成固醇类激素的细胞如睾丸间质细胞中,

49、光面内质网能制造胆固醇并进一步产生固醇类激素。肌细胞中含有发达的特化的光面内质网,称肌质网。肌质网中的Ca2+-ATP酶将细胞质基质中的Ca2+泵入肌质网腔中贮存起来。当收到神经冲动刺激后释放Ca2+,肌肉收缩。参与多肽折叠的相关物质有哪些?不能正确折叠的畸形肽链或未装配成寡聚体的蛋白质亚单位,不论在内质网膜上还是在内质网腔中,一般都不能进入高尔基体。这类堕胎一旦被识别,便通过See61p复合体从内质网腔转至细胞质基质,进而被蛋白酶所降解。内质网中有一种蛋白二硫键异构酶,它附着在内质网膜腔面上,可以切断二硫键,形成自由能最低的蛋白构象,以帮助新生的蛋白质重新形成二硫键并处于正确折叠的状态,没有

50、这种酶,新生的蛋白质也可以正确折叠,但它的存在大大加快了这一过程。内质网含有一种结合蛋白,可以识别不正确折叠的蛋白或未装配好的蛋白亚单位,并存它们重新折叠与装配。蛋白二硫键异构酶和Bip等蛋白都具有有4肽信号(KDEL或HDEL)以保证它们滞留在内质网中,并维持很高的浓度。高尔基体的功能有哪些?高尔基体的主要功能是将内质网合成的多种蛋白质进行加工、分类与包装,然后分门别类的运送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。内质网上合成的脂质一部分也要通过高尔基体向细胞膜和溶酶体膜等部位运输。高尔基体是细胞内大分子运输的一个主要交通枢纽。高尔基体是细胞内糖类合成的工厂,在细胞生命活动中起多种重要的作用。高尔基

51、体怎样完成对蛋白质的分类和转运?20世纪60年代,人们发现溶酶体中所有的酶都有共同的标志。70年代证明这一共同标志就是6-磷酸甘露糖(M6P),80年代纯化了和这一反应有关的酶及M6P受体,从而把溶酶体酶在高尔基体中的分选过程作为了解高尔基体功能的一个重要例子。溶酶体中含有几十种水解酶类,它们在内质网上合成后进入高尔基体。在内质网上合成时发生了N-连接的糖基化修饰,即把一个寡糖链共价结合到溶酶体酶分子中的天冬酰胺残基上。在高尔基体的顺面膜囊中存在葡萄糖胺磷酸转移酶和N-乙酰葡萄糖胺磷酸糖基酶,在这两种酶的催化作用下,寡糖链中的甘露糖残基磷酸化产生6-磷酸甘露糖。这种特异的反应,只能发生在溶酶体

52、的美上,而不发生在其他的糖蛋白上。估计溶酶体本身的构象含有某种磷酸化信号。在高尔基体反面的膜囊上结合着6-磷酸甘露糖的受体,由于溶酶体酶的许多位点上都可以形成6-磷酸甘露糖,从而大大增强了与受体的亲和力,从而使溶酶体的酶于其他蛋白质分离并起到局部浓缩作用。细胞内蛋白质合成部位及其去向如何?糙面内质网上合成哪几类蛋白?它们在内质网上合成的生物学意义是什么?蛋白质合成始于细胞质基质,但部分很快转至内质网膜上。 在内质网上合成的蛋白质包括:1、向细胞外分泌的蛋白质,如抗体、激素;2、膜整合蛋白; 3、构成细胞器中的可溶性驻留蛋白;4、要与其它细胞组合严格分开的酶,如溶酶体的各种水解酶;5、需要进行修

53、饰的蛋白质,如糖蛋白。指导分泌性蛋白在糙面内质网上合成需要哪些主要结构或因子?它们如何协同作用完成肽链的合成?结合高尔基体的结构特征,谈谈它是怎样行使其生理功能的?1、蛋白质的糖基化N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis 面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。糖蛋白的空间结构决定了它可以和那一种糖基转移酶结合,发生特定的糖基化修饰。许多糖蛋白同时具有N-连接的糖链和O-连接的糖链。O-连接的糖基化在高尔

54、基体中进行,通常的一个连接上去的糖单元是N-乙酰半乳糖,连接的部位为Ser 、Thr 和Hyp 的OH 基团,然后逐次将糖基转移到上去形成寡糖链,糖的供体同样为核苷糖,如UDP-半乳糖。糖基化的结果使不同的蛋白质打上不同的标记,改变多肽的构象和增加蛋白质的稳定性。在高尔基体上还可以将一至多个氨基聚糖链通过木糖安装在核心蛋白的丝氨酸残基上,形成蛋白聚糖。这类蛋白有些被分泌到细胞外形成细胞外基质或粘液层,有些锚定在膜上。2、参与细胞分泌活动负责对细胞合成的蛋白质进行加工,分类,并运出,其过程是SER 上合成蛋白质进入ER 腔以出芽形成囊泡进入CGN在medial Gdgi 中加工在TGN 形成囊泡

55、囊泡与质膜融合、排出。高尔基体对蛋白质的分类,依据的是蛋白质上的信号肽或信号斑。3、进行膜的转化功能高尔基体的膜无论是厚度还是在化学组成上都处于内质网和质膜之间,因此高尔基体在进行着膜转化的功能,在内质网上合成的新膜转移至高尔基体后,经过修饰和加工,形成运输泡与质膜融合,使新形成的膜整合到质膜上。4、将蛋白水解为活性物质如将蛋白质N 端或C 端切除,成为有活性的物质(胰岛素C 端)或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽,如神经肽。5、参与形成溶酶体。6、参与植物细胞壁的形成。7、合成植物细胞壁中的纤维素和果胶质。蛋白质糖基化的基本类型、特征和生物学意义:177溶酶体是怎样发生的?它有

56、哪些基本功能?(一)、溶酶体的发生初级溶酶体是在高尔基体的trans 面以出芽的形式形成的,其形成过程如下。内质网上核糖体合成溶酶体蛋白进入内质网腔进行N-连接的糖基化修饰 进入高尔基体Cis 面膜囊N-乙酰葡糖胺磷酸转移酶识别溶酶体水解酶的信号斑 将N-乙酰葡糖胺磷酸转移在12 个甘露糖残基上在中间膜囊切去N-乙酰葡糖胺形成M6P 配体与trans 膜囊上的受体结合选择性地包装成初级溶酶体。(二)、溶酶体的功能溶酶体的主要作用消化作用,是细胞内的消化器官,细胞自溶,防御以及对某些物质的利用均与溶酶体的消化作用有关。细胞内消化:对高等动物而言细胞的营养物质主要来源于血液中的水分子物质,而一些大分子物质通

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