检体的接种技术与培养基的选择

1、檢體的接種技術與檢體的接種技術與培養基的選擇培養基的選擇曾正如 90.6.8 接種方法的介紹 1.懸浮法 2.劃線法 3.傾注平板法 4.穿刺法 5.穿刺劃線法 認識培養基 1.培養基的分類 2.培養基的選擇 接種注意事項接種方法 懸浮法(suspending method) 一般液體培養基多利用 此法接種,取少許細菌 懸浮於broth中.劃線法(streak method)斜面劃線-自斜面底端之表 面做Z字型向上劃線 ,多用於生化試驗用 固體培養基 .平板劃線-常用有二1.四區劃線法:直接使用接種環(loop)於plate 上劃線接種,適用於任何分離用 培養基 2.厚塗法: 利用無菌棉花拭子

2、將液態之細菌懸浮液, 以三個方向在plate上塗劃.臨床,操作瓊 脂紙錠擴散法抗生素感受性試驗時使用. 傾注平板法(pour plate method) 此法多用於液體檢體之菌落計數(定量菌數).穿刺法(stab method) 利用接種針挑菌,自半固體培養基表面垂直刺入約培養基 長度1/22/3處,再沿現線拔出. 穿刺劃線法 (stab and streak method) 利用穿刺法接種基部, 再以斜面劃線法接種 培養基斜面部分. 培養基的分類BAP All Gram negative andCHOCOLATE滋養性 Gram positiveCDC Anaerobic cultureEM

3、B Gram negative bacteriaMacConkey低度選擇性 Gram negative bacteriaCNA Gram positive bacteriaHE中度選擇性 1.Lactose Fermentation2.H2S productionTCBS Vibrio sppCamp-BAP高度選擇性 CamphylobacterCCFA 1.Clostridium difficile2.Anaerobic cultureGN broth Gram negative bacteriaBHI增菌性 Aerobic bacteriaThioglycolate broth All

4、 aerobic and anaerobicbacteria培養基的選擇 針對不同檢體欲分離的致病菌不同,選擇適當的培養基,才能有效分離到致病菌.v無菌部位的檢體 (Blood .CSF.Body Fluid .Bile.) 任何一種菌都是致病菌.包括厭養菌.故一般 多使用BAP/EMB、Chocolate 、 CNA 、 CDC 、 Thio broth vBlood culture:與感染有關的致病菌w GPCw GNBw Yeast w Anaerobic1.Pneumococci2.Group A streptococci1.Enterobacteriaceae2.Haemophilu

5、sCandidaBacteroidesvUrine culture:尿道感染常見致病菌 w GNBw GPCw GNCw Yeastw other1.Enterobacteriaceae2.Glucose non-fermenting GNB3. Gardnerella vaginalis1.Enterococcus faecalis2.Staphylococci3.-hemolytic streptococciNeisseria gonorrhoeae1.Candida albicans 2.Candida glabrataMycobacterium tuberculosis(TB)vSpu

6、tum culture(Routine) 重要的致病菌: w GPCw GNBw GNCw Yeast1.Streptococcus pneumoniae2.Staphylococcus aureus3. -hemolytic streptococci1.Haemophilus iinfluenzae2. 2+ Enterobacteriaceae1.Neisseria menigitidis2.Branhamella catarrhalis (Moraxella) Candida albicans vStool culture 常見致病菌 引起長期使用廣效性抗生素Pt腹瀉 造成嚴重下痢 嬰幼

7、兒下痢之重要致病菌1.Salmonella spp2.Shigella spp3.Campylobacter spp4.Vibrio sppClotridium difficile(Anaerobic)Staphylococcus aureusEnterotoxigenic E.colivThroat culture 猩紅熱(Routine) Streptococcus Group A Pertussis(百日咳) Bordetella pertussis Diphtheria(白喉) Coryhebacterium diphtheria 其它咽炎 Neisseria mengitidis H

8、aemophilus influenzae vVagine,Cervix culture 重要致病菌:pure culture GNC GPC GNB YEASTNeisseria gonorrhoae-hemolysis streptococciPure EnterobacteriaeceCandida albicansvEye culture結膜炎 常見致病菌 角膜炎眼瞼的感染1.Staphylococcus aureus2.Moraxella lacunate3.Haemophilus influenzae4.Pseudomonas spp1.Nocardia asteroides2.A

9、ctinomyces israeliiStaphylococcus aureusvEar culture 耳朵檢體之致病菌或潛在性致病菌: GPC GNB Anaerobic other(fungi)1.Staphylococcus aureus2. and -hemolysis streptococcus3.Streptococcus pneumoniae1.Pseudomonas aeruginosa2.Protues spp.3.Haemophilus influenzaeBactreoides, Fusobacterium1.Aspergillus fumigatus2.Candida

10、 albicans細菌室檢體接種表BAP/EMBCNAChcoThioBHICDCUrine Sputum Throat Wound Bile CSF/BF Eye Ear Vagina Cervix Urithral 細菌室接種表Stool forBAP/EMBMacConkey/HECDCTCBS Camp-BAPCCFA ThioGNbrothSalmonella/shigella Staphylococcusaureus Vibrio spp Clostridiumdifficile Campylobacterspp 接種注意事項 Urine culture 須留意以下各點: 1.取檢體前一定要將檢體混合均勻. 2.須使用0.001ml之loop定量接種. 3.loop僅