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文档简介
1、阶段质量检测(二)微生物的培养与应用(A 卷学业水平达标)(满分:100 分时间:40 分钟)一、选择题(每小题 4 分,共 48 分)1 平板冷凝后,要将平板倒置,其原因是()A. 接种时再拿起来方便B. 在皿底上标记日期等方便C. 正着放置容易破碎D. 防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基造成污染解析:选 D 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面湿度也比较高。将 平板倒置,可以使培养基表面的水分更好地挥发,防止皿盖上水珠落入培养基,造成污染。2.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A. 个细菌、液体培养基B. 许多细菌、液体培养基C. 一个细菌、固体培养基D. 许多细菌
2、、固体培养基解析:选 C 菌落是一个或几个细菌的子细胞群体,在固体培养基上有一定的形态,肉 眼可见,而液体培养基不具备该条件。3. 需要在火焰旁操作的有()1土壤取样 称取土壤稀释土壤溶液涂布平板 微生物的培养A.B.C.D.解析:选 D 为了防止杂菌污染,称取土壤、稀释土壤和涂布平板均应在酒精灯火焰旁 进行,土壤取样不用在火焰旁进行,但所用器具均应先灭菌再使用;微生物的培养在恒温箱中进行,无需灭菌。4.下列关于微生物培养的叙述,错误的是()A. 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵B. 高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢C. 划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落D. 稀释涂布
3、平板法易获得单菌落和计数活菌数目解析:选 C 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵;高温灭菌的目的是杀死微生 物的细胞、孢子、芽孢;稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目;划线分离可在培养2基上获得单菌落,但不是均匀分布的。35下列有关平板划线接种法的操作错误的是()A. 将接种环放在火焰上灼烧B. 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C. 在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰D. 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连解析:选 D 划线时最后一区的划线与第一区的划线不能相连。6.制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基,倒平板的具体描述正确的是()1待培养基冷却至 40 C 左
4、右时,在酒精灯火焰附近倒平板2将灭过菌的培养皿放在桌面上,左手拔出棉塞3右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰4用左手的拇指和食指打开皿盖5右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖等待平板冷却510 s,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上A.B.C.D.解析:选 C 待培养基冷却至 50 C 左右,在酒精灯火焰附近倒平板;将灭过菌的培养 皿放在火焰旁的桌面上, 左手拔出棉塞,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,等待平板冷却凝固 510 min 后,将平板倒过来放置。7.在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基 上培养,可将自生固氮菌与其他细菌分
5、开,对培养基的要求是()加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37 C 恒温箱中培养2830 C 温度下培养A.B.C.D.解析:选 C 自生固氮菌有固氮功能, 因此培养基中不需要加氮素;细菌对抗生素敏感,因此,不能加抗生素;自生固氮菌是异养型的, 应加葡萄糖;其生长繁殖的适宜温度是 28 30 C。&若将酵母菌和圆褐固氮菌混合在一起,可采用下列哪组培养基将它们分开()A. 加食盐的培养基和牛肉膏、蛋白胨培养基B. 固体培养基和液体培养基C. 加伊红一美蓝的培养基和含硝酸盐的培 养基D.加青霉素的培养基和无氮培养基4解析:选 D 青霉素可杀死原核生物如细菌,酵母
6、菌为真菌,因而不会被杀死。圆褐固 氮菌是固氮菌,无氮源也能存活,但酵母菌无法存活,借此可分离两种微生物。59.细菌分离与计数实验操作过程应注意()无菌操作做好标记规划时间土样灭菌A.B.C.D.解析:选 C由于本实验操作复杂,目的是对细菌进行分离和计数,整个过程需要无菌操作,如取土样时用到的小铁铲和盛土样的信封及容器等均需灭菌,土样称量、样品稀释及涂布平板等操作均在火焰旁进行;本实验用到的平板和试管比较多,为避免混淆,最好在使用前就做好标记;本实验耗时较长,需事先规划好时间, 以便提高工作效率,在操作时更加有条不紊。10.在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验,在a、b、c 处分别贴浸有不同抗
7、生素(浓度相同)的无菌滤纸片,d 处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图所示。以下判断错误的是()A. a 处抑菌效果小于 b 处B. b 处的滤纸片没有沥干C. c 处抗生素无效D. d 为对照解析:选 A 培养皿中不同滤纸片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,说明浸有的抗 生素抑菌效果越好。a 处的透明圈并不小于 b 处;b 处不是圆形的透明圈,可能是滤纸片没 有沥干,抗生素流出滤纸片;c 处无透明圈,说明 c 处抗生素对大肠杆菌无效; d 为空白对照。11.做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是()A. 高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B. 倒平板时,应
8、将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C. 为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D. 用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上解析:选 D 在高压灭菌的操作过程中,加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降,待压 力表的指针指到零时,打开放气阀,旋松螺栓,打开盖子。倒平板时,用左手将培养皿打开 一条稍大于瓶口的缝隙, 而不是完全取下放到一边。 接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷 却后,再用其挑取菌落。在微生物的培养中,一般将培养皿倒置, 在皿底上用记号笔做标记。12.漆酶属于木质素降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分 离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述错误
9、的是()67A. 生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品B. 筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C. 在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化D. 若要长期保存菌株可采用甘油管藏的方法解析:选 A 生活污水中含木质素的物质相对较少,产漆酶菌株也较少,不宜作为分离 产漆酶菌株的样品;产漆酶菌株可降解木质素,在筛选培养基中加入木质素可筛选产漆酶的菌株,筛选时可通过菌落特征挑出产漆酶的菌落;在涂布平板上生长的菌落可能还有其他杂 菌,可再通过平板划线法进一步纯化; 对于需要长期保存的菌种, 可以采用甘油管藏的方法, 即在一 20 C的冷冻箱中保存。二、非选择
10、题(共 52 分)(J13.(16 分)莠去津是一种含氮农药,在土壤中不易降解,为修复被其污染的土壤,可 按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答(已知莠去津在水中溶解度低,固体培养基的方法有平板划线法和A_(填“前者”或“后者”)(3) 一段时间后,培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落,我们筛选的目的菌是菌落 中 的细菌,该菌落生长所需的氮元素主要来自(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C 瓶菌种还是培养基,应如何设置对照组?解析:(1)图中从 A 瓶到 C 瓶液体培养的过程称为选择培养,目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度。(2)将菌种接种到固体培养基的
11、方法有平板划线法和稀 释涂布平板法两种,由图中固体培养基上的菌落分布可知,该接种方法是稀释涂布平板法,包括梯度稀释操作和涂布平板操作。(3)根据题目信息“莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养基不透明”可知,能够降解莠去津的目的菌会使菌落周围出现透明圈,因此可以选择菌落周围存在透明圈的细菌。由于培养基中只有莠去津一种氮源,因此分解莠去津含过量莠去津的固体培养基不透明十无透明圈 七壤 七埋没出液 适宜条榊下掘荡血伙抽蛙畀賂培郭适当时间周粋域界基I 7(1)由图推断,从 A 瓶到 C 瓶液体培养的过程称为_,目的是(2) 在将 C 瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行,将菌种接种到法,从图中
12、看本实验采用的是上清浪UO iikL无区饶养湫+过M莠去津1 mL8的微生物所需的氮元素主要由莠去津提供。(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C 瓶菌种还是培养基, 应设置灭菌后不接种菌种的培养基, 与实验组放在相同条件下培养, 若培 养基上无菌落出现,则非目的菌落一定来自C 瓶菌种,若培养基上出现菌落,则说明非目的菌落可能来自培养基。答案:(1) 选择培养 初步选择能降解莠去津的细菌 (目的菌 )并提高其密度 (2) 梯度稀 释 稀释涂布平板 后者 (3) 有透明圈 莠去津 (4) 配制的培养基灭菌后不接种菌种, 与 实验组放在相同条件下培养14(16 分) 临床使用抗生素前,有时需要做
13、细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身 上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题:(1)为 了 从 样 本 中 获 取 致 病 菌 单 菌 落 , 可用_ 法 或_ 法将样本接种于固体培养基表面, 经过选择培养、 鉴 别等步骤获得。(2) 取该单菌落适当稀释,用 _ 法接种于固体培养基表面,在37 C 培养箱中培养 24 h ,使其均匀生长,布满平板。(3) 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置上,培养一段时间后,含 A 的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素 A_ ;
14、含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_ ; 含 C 的 滤 纸 片 周 围 的 透 明 圈 比 含 A 的 小 , 说 明_;含 D 的滤纸片周围的透明圈也比含 A 的小,且透明圈 中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D 的_。(4) 根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选用抗生素 _ 。解析:(1) 微生物的常用分离方法为划线法和稀释涂布平板法。(2) 能够使菌落均匀生长、布满平板的接种方法为涂布法。(3)(4)含 A 的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素 A 敏感;含 B 的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B 不敏感;
15、含 C 的滤纸片周围的透明圈比含 A 的小,说明该致病菌对 C 的敏感性比对 A 的弱;含 D 的滤纸片周围 的透明圈比含 A 的小,且透明圈中出现了一个菌落(排除杂菌污染),说明该致病菌可能对抗 生素 D 产生了抗药性。答案: (1) 划线 稀释涂布平板 ( 或涂布 )(2) 涂布 (3) 敏感 不敏感 该致病菌对 C的敏感性比对 A 弱 耐药菌 (4)A15 (20 分)人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃, 可用来发酵处理秸秆, 提高秸秆的 营养价值。为9了增强发酵效果, 研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株, 并对其降解纤维 素能力进行了研究。请回答下列问题:(1) 在样品稀释和涂布平板步
16、骤中,下列选项不需要的是 _ (填序号) 。酒精灯 培养皿 显微镜 无菌水10 在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是O(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是_(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红 培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。图中降解圈大小与纤维素酶的 _有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是 _ (填图中序号)。(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株Ji和 J4,在不同温度和 pH 条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株 _更适合用于人工瘤胃发酵,理由是解析:(1)在样品稀释和涂布平板过程中,需要在酒精灯火焰附近进行操作,培养皿用于盛放培养基并培养细菌,无菌水做稀释的溶剂,此处唯一用不到的是显微镜。(2)在涂布平板时,要取少量菌悬液滴加到培养基表面,因为如果滴加菌悬液量过多,菌悬液就会堆积在培养基表面,影响分离效果。(3)在向试管内分装含琼脂的培养基时,如果试管口粘附有培养基,就很容易使棉塞受到污染,因此,需要用无菌的酒精棉球将试管口擦拭干净。(4)因为刚果红可以与纤维素形成红色复合物,且不与纤维素降解产物反应。所以在刚果红培养基平板上,菌落周围有透明降解圈是纤维素被降解的结果,降
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