血常规基础培训

1、血常规基础培训一,血液的功能和组成1 .血液的功能。机体各组织器官营养成分和代谢产物的载体。令人体所需水分、氧及排出二氧化碳的载体。令参与人体免疫功能，防止疾病侵袭。2 .血液的组成红细胞加入抗凝剂，离心，静置30分钟后的情形血液自然凝固。血液由有形成分（血细胞等）和血浆组成。<血清：血液自然凝固，除去固体部分（血饼）后所获得的液体部分。O血浆：血液经抗凝处理，在离心作用后获得的清液部分。除血清所含成格外，还包括蛋白质、凝固因子等成分。一血清血浆蛋白质血液凝固因子红细胞血饼一有形成分白细胞一血小板一其他有形成分一3.血液细胞构成血液细胞白细胞血小板一淋巴细胞一单核细胞白细胞-嗜中性粒细胞

2、一粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞(1) .红细胞：令形状和功能：红细胞模型图扁圆状结构，中央凹陷，细胞内无核、柔软,可进入比本身直径更小的毛细血管，平均直径784mo内含血红蛋白，富含铁元素，容易氧化。负责将氧气输送致全身，并将二氧化碳收集至肺部排出。熟>>祖细胞红细胞红细胞红细胞红细胞红细胞正常情形下,红细胞起源于骨髓中红系祖细胞，后者在促红细胞生成素的作用下，分化为原红细胞，经数次有丝分裂而依次发育为早幼、中幼、晚幼红细胞，后者已丧失分裂能力通过脱核而成为网织红细胞进入外周血。由网织红细胞再发育成为完全成熟的红细胞。从早幼红细胞开始，已能利用铁蛋白和原口卜琳合成血红赛，后者再与

3、珠蛋白肽链结合而成为血红蛋白，幼红细胞越趋向成熟，合成的血红蛋白越多，直到网织红细胞时期仍能合成少量血红蛋白。一样外周血中网织红细胞的含量不超过1%,网织红细胞中仍残留有RNA,由此可通过流式细胞检测技术进行检测。网织红细胞越成熟，DNA含量越低，由此可运算出网织红细胞成熟程度。(2) .白细胞：O白细胞的分类：小型白细胞(淋巴细胞)二分类一大型白细胞（其他白细胞）一小型白细胞（淋巴细胞）三分类中型白细胞（单核细胞、嗜酸性、嗜碱性粒细胞）一大型白细胞（嗜中性粒细胞）一淋巴细胞一单核细胞五分类嗜中性粒细胞一粒细胞嗜酸性粒细胞一嗜碱性粒细胞O形状和功能：球状结构,细胞内有核，直径715pmo产生人

4、体免疫机能，直截了当攻击外来细菌或产生抗原抗体反应。抗体嗜酸性粒细胞协助产生抗体。(3) .血小板:血液中的有形成分，体积较小，参与凝血和止血。(4) 液检测的意义和检验学科的分类<在生理情形下，人体内血液各种成分的质和量，反映了机体正常新陈代谢和内外环境的平稳。今在病理情形下，血液成分质和量的变化，除了反映造血系统的病变以外，还能直截了当或间接地提示全身或局部组织器官的病变。生物化学和免疫学检验：要紧检验血浆中的成分。今血液学检验：要紧检验与临床止血和凝血相关的各种血小板因子、凝血因子、血管因子等项目。0血液一样检验：要紧检验血液中有形成分的质和量。(5) 液一样检验的方法 传统方法：

5、以手工操作、一般光学显微镜、计数板等简单器材为要紧检测手段。 现代方法：以血液自动分析仪为要紧标志。 随着细胞化学、组织化学、位相显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、同位素示踪技术、单克隆抗体等现代技术的运用，血液学研究不断得到新的进展。 到20世纪90年代，综合光学、电学、细胞化学原理的血液分析仪代表了当今血液一样检验技术的进展趋势。二、血液一样检验的目的和内容1 .血液一样检验的目的以现代血液学理论为基础，以常用的实验方法为手段，联系临床实际，为临床疾病的初步诊断和疗效观看提供客观依据。2 .血液一样检验的内容对血液中的有形成分和血液细胞的数量、质量和外观形状进行检测。3 .血液一样检验的检测

6、项目(1) .白细胞检测WBC(WhiteBloodCellcount):白细胞计数：单位体积全血白细胞数，(x103/mL或x109/l)。LYM%(Lymphocyteconcentration):淋巴细胞占白细胞百分率()。LYM#(Lymphocytecount):淋巴细胞计数：单位体积全血淋巴细胞数，(xl03/pL或X109/L)。MONO%(Monocyteconcentration):单核细胞(中间细胞MID)占白细胞百分率(%)。MONO#(Monocytecount):单核细胞(中间细胞MID)计数：单位体积全血单核细胞数，(xl03/pL或X109/L)。GRAN%(Gr

7、anulocyteconcentration):粒细胞占白细胞的百分率()。GRAN#(Granulocytecount):粒细胞计数：单位体积全血粒细胞数，(X103/UL或X109/L)。NEU%(Neutrophilconcentration):嗜中性粒细胞占白细胞百分率()。NEU#(Neutrophilcount):嗜中性粒细胞计数：单位体积全血嗜中粒细胞数，(xl03/pL或X109/L)。EOS%(Eosinophilconcentration):嗜酸性粒细胞占白细胞的百分率()。EOS#(Eosinophilcount):嗜酸性粒细胞计数：单位体积全血嗜酸粒细胞数，(xlO/p

8、L或x109/l)。BASO%(Basophilconcentration):嗜碱性粒细胞占白细胞的百分率()。BASO#Basophilcount):嗜碱性粒细胞计数：单位体积全血嗜碱粒细胞数，(X103/ML或X109/L)。(2) .红细胞检测RBC(RedBloodCellcount):红细胞计数：单位体积全血红细胞数(xlOVkiL或x1012/l)。HGB(Hemoglobinconcentration):血红蛋白：单位体积全血血红蛋白浓度(g/L)。HCT(Hematocrit)agPCV(PackedCellVolume):红细胞比积:全血红细胞相对容积比()。MCV(Mean

9、CorpuscularVolume):红细胞平均容积：全血单个红细胞的平均比积(fl：1x10-15升)。MCH(MeanCorpuscularHemoglobin):红细胞平均血红蛋白浓度:单个红细胞平均血红蛋白含量，(pg：lxio-12克)。MCHC(MeanCorpuscularHemoglobinConcentration):平均红细胞血红蛋白浓度(g/L)。RDW(RedBloodCellVolumeDistributionWidth):红细胞体积分布竞度。红细胞体积分布竞度变异系数()。红细胞体积分布宽度标准偏差(fl)。红细胞血红蛋白分布竞度。RDW-CV(RDW-Coeffi

10、cientofVariation):RDW-SD(RDW-StandardDeviation):HDW(HemoglobinDistributionWidth):(3) .血小板检测PLT(Platelet count):血小板计数：单位体积全血血小板数，(x103/ML或X109/L)。平均血小板体积：MPV(MeanPlateletVolume):全血血小板平均体积，(fl：1x10-15升)。PCT(Plateletocrit):血小板压积：血小板相对容积(1_/1_)或()。PDW(PlateletVolumeDistributionWidth):血小板体积分布宽度;PLCR(Plat

11、eletLargeCellRatio):大血小板比率：体积工12fl的血小板比率。(4) .网织红细胞检测RET#(Reticulocytecount):网织红细胞计数：单位体积血液中网织红细胞的数量，(xlO4/ML或xlOio/L)；RET%(Reticulocyteconcentration):网织红细胞百分率：网织红细胞占成熟红细胞的百分率();MRV或MCVR(MeanReticulocyteVolume):网织红细胞平均体积；HFR%(HighFluorescentReticulocyteconcentration):高荧光率网织红细胞占网织红细胞的百分率();MFR%(Middl

12、eFluorescentReticulocyteconcentration):中荧光率网织红细胞占网织红细胞的百分率();LFR%(LowFluorescentReticulocyteconcentration):低荧光率网织红细胞占网织红细胞的百分率();RMI(ReticulocyteMaturationIndex):网织红细胞成熟度指数：高荧光率网织红细胞与中荧光率网织红细胞之和与低荧光强度网织红细胞的比值();RMI=(HFR+MFR)/LFRxl00%RPI(ReticulocyteProofreadingIndex):网织红细胞成熟校正指数:RPI=RET%x(HCT/0.45)x

13、l/l+(0.45-HCT)RDWR(ReticulocyteDistributionWidth):网织红细胞分布克度;HCR(ReticulocyteHemoglobinConcentration):网织红细胞血红蛋白浓度;MCHCR(ReticulocyteMeanCorpuscularHemoglobinConcentration):网织红细胞平均血红蛋白浓度;HDWR(ReticulocyteHemoglobinDistributionWidth):网织红细胞血红蛋白分布竞度;MOXI(MeanPeroxidaseIndex):平均过氧化物酶活性指数；LI(IobularityInde

14、x):分页核指数。4.血液分析项目参考值及临床意义(1).白细胞检测项目单位参考值临床意义WBC109/L4.5-11.0增加：生理性：新生儿、妊娠末期、分娩期、饭后等。病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严竣烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病、急性出血、组织损害等。LYM%腮腺%20-40增加：百日咳、传染性单核细胞增多症、LYM#109/L1.54.0炎、结核、传染性肝炎等。减少：多见于传染性疾病的急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。MONO%410增加：结核、伤寒、亚急性心内膜炎、疟疾、MONO#等。109/L0.20.8单核细胞白血病、急性感染复原期NEU%急%5462增加：急性

15、化脓性感染、粒细胞性白血病、NEU#109/L27性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞和铅中毒等。减少：伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物、X射线和镭照耀、化疗、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等。EOS%13增加：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、手EOS#109/L0-0.45术后、烧伤等。减少：伤寒、副伤寒、应用肾上腺皮质激素后等。BASO%0l增加：慢性粒细胞性白血病、嗜碱性粒细胞白BASO#109/L0-0.2血病、何杰金病、瘪转移、铅中毒等。(2).红细胞检测项目单位参考值临床意义RBC1012/L男性：4.35.8增加：生理性：新生儿、高原居住者。女性:3.85.3病理性：真性

16、红细胞增多症等。减少：各种贫血、白血病、各种急慢性失血等。HGBg/L男性：126-174临床意义见红细胞计数。一样情形下女性:117-161红蛋白浓度与红细胞数有一定的比例关系，二者对贫血诊断有关心。HCTL/L男性:0.37-0.51增加：大面积烧伤、体外循环脱水等。MCVflMCHpgMCHCg/LRDW-CVRDW-SDfl女性：0.35-0.47减少：各类贫血时随红细胞的减少而有不同程度的降低。3580-10031037011.6-14.&39.046.01.Wintrobe分类法临床意义见贫血形状学分是反映红细胞大小的客观指标，增加见于缺铁性贫血、营养不良性贫血。贫血的形态

17、学分类分类依据：MCV、MCH、MCHC这三个参数是否正常为依据。类型MCV(80-100)MCH(2735)MCHC(310-370)常见疾病大细胞性贫血>100>35310370巨幼细胞贫血、非巨幼细胞性大细胞贫血正常细胞性贫血801002735310-370急性失血性贫血、溶血性贫血、症状性贫血、再生障碍性贫血单纯小细胞性贫血<80<27310-370亚急性或慢性炎症小细胞低色素贫血<80<27<310缺铁性贫血、铁粒幼细胞贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铅中毒贫血2.Bessman分类法分类依据：以MCV、RDW是否正常为分类依据。类型MCV(80

18、-100)HDW(正常上限约为14.0%)常见疾病小细胞均一性贫血降低正常杂合子珠蛋白生成喧碍性贫血、慢性疾病小细胞不均T生贫血降低上升缺铁性贫血、血红蛋白S(HbS)、p-珠蛋白生成障碍性贫血、红细胞破裂综合症、血红蛋白H(HbH)正细胞均一性贫血正常正常少部分再生障碍性贫血、慢性粒细胞性或淋巴细胞性白血病、出血、慢性疾病、输血、化疗正细胞不均T生贫血正常上升缺铁性贫血、缺叶酸或维生素B12双相性贫血、铁粒幼细胞贫血、溶血性贫血、骨髓纤维化大细胞均一性贫血增加正常多数再生障碍性贫血、前白血病、白细胞明显增高的淋巴细胞白血病大细胞不均T生贫血增加上升缺叶酸或维生素B12缺乏性贫血、免疫性贫血苣

19、血病因学分类依照贫血发生的不同机制进行分类。类型发病机制疾病红细胞生成减少骨髓功能衰竭造血干细胞减少再生障碍性贫血造血干细胞或祖细胞临时受抑制急性造血功能停滞红系干细胞缺乏单纯红细胞再生障碍性贫血、先天性红细胞生成障碍性贫血造血物质缺乏或利用障碍造血调控因子缺乏肾性贫血、内分泌紊乱所致贫血铁缺乏缺铁性贫血铁利用障碍铁粒幼细胞贫血单核巨噬系统铁开释障碍炎症、感染所致慢性疾病贫血铁运转障碍先天性运铁蛋白缺乏症铜缺乏缺铜性贫血DNA合成障碍叶酸、维生素B12缺乏性巨幼细胞贫血及其他巨细胞贫血红细胞破坏过多红细胞酶缺陷遗传性球性红细胞增多症遗传性椭圆形红细胞增多症遗传口形红细胞增多症遗传性棘形细胞增多

20、症红细胞酶缺陷遗传性红细胞G-6-PD缺乏症遗传性红细胞丙酮酸激酶缺乏症糖无氧酵解、戊糖旁路及谷胱甘肽代谢中其他酶缺乏所致溶血性贫血血红蛋白专门珠蛋白合成减少珠蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞贫血、血红蛋白C,D,E(HbC,D,E)病珠蛋白结构专门不稳固Hb所致溶血性贫血红细胞对外补体过敏阵发性睡眠性血红蛋白尿症类型发病机制疾病红细胞外在专门免疫反应自身免疫温抗体型自身免疫性溶血性贫血冷凝血综合症同种免疫新生儿ABO溶血病、新生儿Rh溶血病、血型不合输血后溶血病药物诱发免疫药物性免疫性溶血性贫血机械性损害红细胞破裂综合症、行车性Hb尿高温烧伤频溶血瞳病化学物质药物和化学毒物所致溶血性疾病微生物、

21、寄生虫疟疾和多种细菌所致溶血性贫血牌功能亢进脾功能亢进所致溶血性贫血红细胞丢失(失血)急性失血急性失血所致贫血慢性失血慢性失血所致缺铁性贫血(3).血小板检测项目PLT单位109/L参考值100300临床意义增加：急性大出血、急性溶血、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、慢性粒细减少：胞白血病等。急性白血病、再生障碍性贫血、原发性血小板减少性紫瘢、脾功能亢进、系统性红斑狼疮、DIC、血栓性血小板减少性紫瘢等。MPVfl6.5-12增加：非免疫性血小板破坏、骨髓抑制复原时期、体外循环手术后8天、先兆子痫、ITP初期、慢性白血病、心肌梗塞直到7周后、巨血小板综合症、脾切除后、原发性血小板增多症等

22、。减少：再生障碍性贫血、药物抑制骨髓、巨幼细胞性贫血（治疗后上升）、恶性肿瘤化疗期、肾移植等。PCTPDW-CVP-LCR0.1450.20916.3-19.313-43临床意义见血小板计数（PLT）。MPV与MPV呈负的线形相关，急淋、慢淋、糖尿病可正常。巨幼细胞性贫血、恶性贫血PDW升高，血小板体积大小不均是PDW可增加。第二部分血液分析仪检测原理简介一、血液分析仪要紧检测项目1 .CBC分析：只进行细胞计数和初步分析的检验模式。要紧项目：WBC、RBC、HCT、HGB、PLT、MCV、MCH、MCHC02 .CBC+DIFF分析：进行细胞计数和白细胞分类的检验模式。二分类血液分析仪要紧项

23、目：WBC、W-SCR%、W-LCR%、S-WCR#、L-WCR#、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV（或SD）、PLT、MPV、PDW;WBC、RBC、PLT直方图。三分类血液分析仪要紧项目：WBC、W-SCR%、W-MCR%、W-LCR%、W-SCR#、W-MCR#、W-LCR#、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV（或SD）、PLT、MPV、PDW等和WBC、RBC、PLT直方图。五分类血液分析仪要紧项目：WBC、LYM%、MONO%、NEU%、EOS%、BASO%、LYM#、MONO#、NEU#、EOS#、BASO%、RBC、HGB

24、、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV（或SD）、PLT、MPV、PDW;P-LCR等以及WBC、RBC、PLT散点图、直方图。3 .CBC+DIFF+RET分析:在某些高档血液分析仪中还有检测网织红细胞的功能，CBC+DIFF+RET分析确实是在进行细胞计数和白细胞分类的基础上进行网织红细胞分析的检验模式。二.差不多原理1 .电阻抗原理电阻抗法是血液分析仪中使用最为普遍的方法。其原理如下：血细胞通过小孔电解质溶液血液细胞脉冲信号图1.电阻抗法细胞计数原理图如上图所示，由全血稀释的悬浮于电解质溶液中的细胞流经隔板上的一个小孔。正负电极置于小孔两侧的电解质溶液中。电极之间的电源遵守Oh

25、ms定律：R=V/I=P(L/a)V:电极两端的电压I:电流R:小孔电阻P:电解质阻抗L:小孔长度a:小孔横截面积当细胞快速通过小孔时，由因此不良导体，小孔电阻R增大，相当于小孔的横截面积a减小，当电流恒定的情形下，显现瞬时的电压变化而产生一个电脉冲，电脉冲的数量确实是流经小孔的细胞数。电脉冲的大小与细胞大小成正比。由此对细胞进行计数和测定细胞大小。小孔的孔径阻碍看测定细胞大小的线性。孔径SOpm小孔适合测定RBC和PLT,孔径100口m的小孔适合测定WBC。信号/噪声比阻碍看测定的辨论率。由于在实际操作中存在着两个细胞同时通过小孔而产生重合误差的现象，多数血液分析仪通过对一系列不同浓度的标本

26、进行检测后，绘制出仪器本身所固有的重合误差曲线。但这种方法仍无法鉴别某一大的电脉冲到底是由一个大的细胞流经小孔依旧由两个小细胞同时流经小孔所引起。为解决这一问题，有些仪器采纳了鞘流技术（见右图），由此从全然上减少了重合误差的发生。图2.鞘流技术原理示意图2 .光散射原理光散射测量方法见下图。同电阻抗法一样，全血标本第一需要按照一定比例稀释成细胞悬浮液，在鞘流的作用下形成细胞流，细胞被排列成单列快速通过光学检测区，当液流中的细胞与测定光束相交时，由于血细胞透光度与鞘液不同，引起光散射变化，引发一脉冲信号，信号大小与细胞体积有关，由此来进行细胞计数和体积测定。这种方法还能够同时对细胞进行多项参数的

27、分析，如电阻性、光散射、酶含量等。聚光透镜光阻断器V光源流淌细胞收集透镜 /光电增益管© / - 光阻断器光阻断器图3.光散射细胞计数原理示意图3 .血红蛋白测定被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，开释血红蛋白，血红蛋白同溶血剂形成血红蛋白衍生物，在特定波长（530550nm）下比色，吸光度的变化与液体中的HGB含量成比例，仪器便可显示HGB浓度。ICSH举荐使用氟化高铁法，HiCN最大吸取在540nm,仪器的校正必须以HiCN为标准。目前在血液分析仪中采纳的方法有：鼠化血红蛋白、SLS血红蛋白、季胺盐血红蛋白等。其中多数仪器的溶血剂内含有富化钾（而不是霞化高铁），与血红蛋白作用后

28、形成鼠化血红蛋白（注意：绝对不是鼠化高铁血红蛋白），其特点是显色稳固，最大吸取接近540nm,但吸取光谱与HiCN有明显不同。为减少试剂毒性，幸免环境污染，Sysmex的K-1000、K-4500、KX-21、SE-9000等仪器使用非春化溶血剂，形成的SLS血红蛋白与HiCN吸取光谱相似，实验结果的准确性、精确性达到含高化物溶血剂同样的水平。二、白细胞分类原理1.电阻抗白细胞分类图4.电阴抗白细胞分类计数示意图电阻抗测定法进行白细胞分类数据是依照白细胞体积直方图运算而得出。经溶血剂处理后得到的细胞大小可初步确认其相应的种类：小型白细胞、中型白细胞和大型白细胞。一样认为小型白细胞为淋巴细胞；中

29、型白细胞为单核细胞；大型白细胞为粒细胞。由于溶血试剂的不同，在SYSMEX三分类仪器中：小型白细胞为淋巴细胞；而中型白细胞则包括单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞；大型白细胞为嗜中性粒细胞。当单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的任何一种增加时，中型细胞结果数值和图形都有明显的变化，作为专门结果对用户进行提示，以进行镜检确定。与单独将单核细胞作为中间细胞的仪器相比，在专门大程度上降低了假阳性率。电阻抗原理进行白细胞计数和分类的仪器可分为两种：0二分类血液分析仪：报告淋巴细胞和其他白细胞的百分比和绝对值；三分类血液分析仪：报告淋巴细胞、中型白细胞和嗜中性粒细胞的百分比和绝对值。(2).白细胞

30、五分类的工作原理白细胞五分类血液分析仪是在三分类的基础上，增加某些检测手段，使得WBC的分类更为准确、可靠。由于各仪器生产厂家采纳不同的方法，其工作原理亦有所不同。令CoulterSTKS/MAXM在三分类的基础上，用电阻抗法测定WBC的大小，用高频传导法测定细胞内的传导性，用光散射法测定每个细胞的结构和形状。以阻抗法测得的信号为Y轴，激光散射信号为X轴作散点图，从而将白细胞分类。令SysmexNE系列在三分类的基础上，用甲醛和溶血剂溶解RBC和固定WBC,用阻抗法和高频传导测定WBC,区分LYM、MONO和GRAN。在另外两个通道中，分别用酸性溶血剂和碱性溶血剂处理血细胞，用阻抗法测定嗜碱性

31、粒细胞和嗜酸性粒细胞。令TechniconH系列配置4个独立的测定通道：血红蛋白测定通道、红细胞/血小板测定通道、嗜碱性粒细胞测定通道和过氧化酶测定通道。在进行WBC测定时，用十二烷基硫酸钠、甲醛和山梨醇破坏RBC、固定WBC和使白细胞脱水，用4氯-苯酚和H2O2作底物，在过氧化酶的催化下，4氯-苯酚在细胞内沉淀、着色。由于LYM和BASO无过氧化酶、MONO过氧化酶活性较低、NEU活性较高、EOS活性最强，通过光散射可测定细胞大小和酶活性。以细胞大小为Y轴，酶活性为X轴，作散点图。从而对WBC进行四分类。在另一个通道内，用酸性表面活性剂进行处理，用光散射法测定嗜碱性粒细胞。令AbbottCe

32、ll-Dyn3000/3500在三分类的基础上，用合适的试剂使WBC尽可能接近自然状态，用激光照耀通过四个特定的角度的光散射确定每个细胞的特点，将WBC分成五类。令ABXHELLOS/ARGOS用一种特定的试剂破坏RBC和固定WBC,使嗜酸性粒细胞染色，然后用电阻抗法测定细胞大小，用光学法测定细胞的光吸取，作散点图进行分类。嗜碱性粒细胞的测定则是用特定试剂破坏RBC和WBC中的LYM、MONO、NEU、EOS而进行单独计数。三、定量方法1.浮球定量技术（SYSMEX专利）：浮球定量原理如图所示，当仪器处于待用状态时，所有电磁阀处于静止状态，现在NC和NO两个接口相通，浮球位于计量管的下方。当启

33、动计数程序时，SV1和SV4第一被启动，C和NC接口相通稀程液吸入，流经SV4和SV2、小孔计数感应器、SV1和SV3。定量管内的小球被推到上方。SV1和SV4赶忙停止工作6V2启动。细胞悬液被吸入小孔，浮球随着液面向下移动，当到达A点时，仪器开始计数，当到达B点时，计数停止，同时SV2停止工作。仪器吸入的细胞悬液量与定量管内A与B之间的容量相等，由此进行定量。这种定量技术在计数小孔有轻微堵塞时，浮球移动的速度减慢，计数时刻延长，保证了计数量的恒定。图5.浮球定量技术原理示意图2.SRV（SampleRotorValve）阀定量技术（SYSMEX专利）:自动吸取标本最初采纳机械臂探针式，但由于

34、血液粘度比血清高，因此周密度和准确性都不理想。旋转阀的应用极大地提高了分血精度。在单旋转阀（SRV）阀中，第一吸入血液标本，然后旋转阀转动，将一定量的标本连接红细胞稀释通道，另一部分标本连接白细胞稀释通道。启动阀门后，标本和稀释液通向各自的计数池。剩余部分用回冲液冲洗出去。如此，白细胞和红细胞/血小板的分血、稀释一次完成。有关原理参见示意图。前片片后片标本泵器"0至红细胞池日细胞测定样本环标本入口吸样管I反冲清洗液自红细胞分配卜、 .后片红细胞稀释液自白细胞分配器前片一，细胞可J红细胞也白细胞稀释液红细胞测定样本段反冲液出口标本吸入H意图血液分配示意图回冲示意图图6.旋转阀工作原理示

35、意图四.血液分析各参数的结果来源1.白细胞检测WBC:由仪器直截了当检测；LYM%:由直方图、散点图导出；LYM#:LYM#=LYM%xWBC;MONO%:由直方图、散点图导出；MONO#:MONO#=MONO%xWBCNEU%:由直方图、散点图导出；NEU#:NEU#=NEU%xWBC;EOS%:由直方图、散点图导出；EOS#:EOS#=EOS%xWBC;BASO%:由直方图、散点图导出；BASO#:BASO#=BASO%xWBC;2.红细胞检测RBC:由仪器直截了当测量；HGB:由仪器直截了当测量；HCT:HCT=RBCxMCVMCV:由RBC直方图导出；MCH:MCH=HGB/RBC;M

36、CHC:MCHC=HGB/HCT;RDW-CV:由RBC直方图导出；RDW-SD:由RBC直方图导出；3.血小板检测PLT:由仪器直截了当检测；MPV:由直方图导出；PCT:PCT=PLTxMPV;PDW:由直方图导出；P-LCR:由直方图导出。五、血液分析仪的技术进展从血细胞分析仪产生至今，新技术不断被采纳。从Coulter原理进展到白细胞屋分类技术，仅仅用了五十年不到的时刻。随着科学技术的进展，血液分析仪也将在性能、功能、外观等方面不断得到进展。1 .检测项目不断增加：最初的CoulterA型只能测RBC。到目前，可测量十几个、二十几个参数的仪器差不多成为血液分析仪的主流。市场上所见到的某

37、些新型高档仪器可报告的参数多达30项以上。2 ,体积减小、功能增加：随着材料科学和微电子技术的进展，血液分析仪日趋小型化，增加了许多辅助功能，如：病人数据的储存和分析；试剂自动加液系统；O试剂有效期经历与爰护； 仪器自身校正； 多功能质量操纵和预报；今仪器定期自动爰护和清洗； 仪器故障的自身诊断等。3 .白细胞分类不断完善：除了传统的电阻抗原理以外，各类仪器纷纷采纳了新的技术和工作原理对WBC进行分类。如激光技术、细胞化学技术、高频传导技术、电子技术等。这些技术的运用极大提高了仪器的辨论能力。4 .仪器性能不断提高：自动化程度更高，操作更简便；工作效率更高，计数更快捷；准确性、重复性更好；管道

38、、小孔堵塞机率更低；使用寿命更长。5 .新技术不断被采纳：三次计数；延长计数；浮球定量；重叠校正；脉冲编辑；高精度分析；血小板拟合及扫流技术；VCS技术；鞘流技术；燃烧电路与高压反冲技术；热敏电阻；防返流装置VonBehrens感应器；防携带污染与抗干扰技术。6 .血液分析仪日趋智能化：在显现专门结果时，有些仪器在显示或打印结果时会显现直方图含义性报告及其他警告符号，以关心临床大夫尽快作出正确的判定。仪器能够提示实验结果是否正常，并能报告以下结果专门情形：令分布专门；令红细胞大小不均；令异型淋巴细胞；令原幼细胞；嗜碱性粒细胞专门；令嗜酸性粒细胞专门；令粒细胞增加；粒细胞减低；令低色素性红细胞；

39、令未成熟粒细胞；令大血小板；令小体积区域干扰；令大和小体积干扰；令淋巴细胞增多；淋巴细胞减少；令大红细胞；令小红细胞；有核红细胞；令血小板凝集；令小血小板；令大体积区域干扰等内容。六、选择血液细胞分析仪的原则在用户选购或业务人员向用户举荐血液细胞分析仪时，应对仪器和用户情形进行考察，以使用户能选择符合医院技术现状及进展方向的仪器。工仪器的性能情形 仪器的选择的一样标准：准确性；周密度;携带污染率；总重复性；线形范畴；可比性。O仪器的选择的专门标准：电脑运用；相关专门技术的运用（第三部分、五、5.）；关键部件的性能、质量等。 仪器的有用性：关于一样医院而言，仪器较理想的有用性标准可按如下表所示：

40、项目实用性要求进样方式能同时进行预稀释和全血自动进样自动化程度全自动测试速度>50个/小时故障率因仪器自身因素发生堵孔（2%）,电路部分，真空系统,管路系统，机械部分等故障率专门低，耐用性强并有自身诊断功能数据库病人样本储存100个以上，最好能进行简单的统计处理，报告打印方式可选择质控质控文件应大于5个，一样采纳X-B质控并显示Levery-Jennings图形检测参数检测参数在15个以上，白细胞三分类以上并至少能显示、打印WBC、RBC、PLT等三种以上的直方图抗干扰能力抗干扰能力强，环境适应能力强售后服务销售商有较强的营销、技术服务、修理能力2.用户情形：今大型医院：高档次、白细胞五

41、分类的仪器较符合这类医院的情形，（三级以上）有的用户甚至要求仪器具有网织红细胞、巨幼细胞等检测功能。中型医院：高质量的白细胞三分类仪器较符合这类医院的要求。今小型医院：普及型仪器能够满足这类医院的需要。对医院情形的了解还应包括：医院的床位数、门诊量、现有仪器的情形以及医院的经济能力等。七、血液细胞分析仪的种类和规格血液分析仪种类繁多。依照细胞计数原理大致可分为：令电阻抗法；光散射法；令电阻抗+激光法；令电阻抗+射频法；令电阻抗+激光+射频+组织化学法。依照白细胞分类可分为：令无白细胞分类；令白细胞两分类；白细胞三分类；令白细胞五分类。在我国，有许多医院差不多使用了相当先进的仪器进行血液一样检测

42、。到目前为止，有各种型号、各种档次共二十多个系列的血液分析仪正在临床使用之中。血液细胞分析仪的最新应用一、概述血液分析仪从面世至今差不多有50年的历史了。在我国，各种型号的血液分析仪广泛应用于医院检验科之中。血液分析仪的功能，要紧包括血细胞计数和分类，网织红细胞计数等内容。随着现代物理学、化学、生物学及电子技术不断进展并应用于细胞分析，结合运算机技术、自动化操纵技术，现代血液分析仪在性能、准确性及适用性方面均取得了长足的进步。各大血液分析仪制造商均投入大量的资金和技术力量，开发更先进多功能的血液分析仪，而立足点要紧集中在正常标本的准确性、专门标本检出灵敏度以及准确定量、分析自动化及环保安全、数

43、据处理与联网输出等方面。血液分析仪按照试剂添加的方法可分为半自动和全自动两种。而实际工作中，人们更多地是按照白细胞分类将血液分析仪分为不分类、二分群（大细胞、小细胞群三分群（大、中、小细胞群）和五分类（淋巴、单核、嗜中性、嗜酸性、嗜碱性细胞1一样来说，不分类和二分群仪器多为半自动，而三分群和五分类仪器则多为全自动。半自动二分群全自动三分胖全自动五分类惟嫩、专门标本测定爰T年,哼二1«=>物理原理化学原理1化学原理电阻抗电阻抗电阻抗激光散射光射频（高频波）特异性溶血酶/颗粒染色核酸染色细胞体细胞体积细胞体细胞体内部结排除干增强特异核酸1三积积枳和内部结构构扰性DNA/RNA雉SE

44、WBC大小分群WBC大中小分群WBC五分类Eo/Bas0Eo/5-diff稚嫩白细胞RBCRBCRBCRETNRBCPLTPLTPLT专门PLT（PLT凝集、庞大PLT、细胞碎片）在50年代初，美国的W.H.Coulter先生发明了粒子计数的专利技术，即依照血细胞的非传导性以对电解质溶液中细胞颗粒通过计数小孔时所测的电阻变化来反应细胞的大小，被称为电阻抗原理或库尔特原理。自此，血细胞计数通过该原理的应用而实现了自动化，并在此后的几十年间血液分析仪的均以此作为核心检测原理。时至今天，市场上在供应和使用的所有半自动、全自动三分群血液分析仪检测红细胞、血小板、白细胞分群均按照电阻抗原理通过细胞大小来

45、区分并计数。因此，不同仪器在自动化程度、参数、定量计数、检测速度等方面均有不同以适应不同实验室的实际需求。除了半自动和全自动之分以外，不分类仪器可提供7-8项参数，而半自动二分群仪器可提供15项参数，全自动三分群仪器更可提供18-19项参数及WBC、RBC、PLT三个直方图和各种报警信息。在分血定量技术上，一样大型、快速的三分群仪器均采纳精确耐磨、取中段血的旋转阀分血，如SYSMEXK-4500、KX-21N.AbbottCD1700等；而小型仪器多采纳小血量的注射器或蠕动泵分血，如BeckmanCoulterAcTdiff2、SYSMEXpocH-lOOi.ABXMICROS60等。检测速度

46、方面，适合标本量实验室的仪器，如SYSMEXpocH-100i,AbbottCD1200每小时检测约25-30个标本，而市场上速度最快的三分群仪器SYSMEXK-4500每小时可达80个标本，且可配置自动进样装置以i茜足大标本量实验室的需求。此外，为了满足实验室对操作方便性的要求，国产的迈瑞BC-2000.日本SYSMEX的pocH-100i.KX-21N均能够实现全中文操作，使得操作人员更加方便地操作使用仪器。由于人体白细胞一共5种，即淋巴、单核、嗜中性、嗜酸性、嗜碱性，二分群和三分群均是以细胞大小作为区分的标准。正常人群情形下，嗜中性细颗口淋巴细胞最多且相差较大（其它三种相加也不超过10%

47、）,二分群即以此相分。而三分群是通过溶血素的脱核作用使细胞体积缩小，由此使单核细胞体积落在淋巴和嗜中性细胞之间，即俗称的"三分类、这种以细胞大小区分白细胞的方法并不精确，嗜酸性细胞和嗜碱性细胞在大细胞群中不能准确区分。SYSMEX公司的三分群仪器通过专门的溶血素作用使其相对缩小而分入中间群细胞中，比起其他仪器在一定程度上提高了嗜酸性、嗜碱性细胞专门时的直方图图形鉴别灵敏程度，然而还不能全然解决。而且，中间群细胞中往往混有异型淋巴和稚嫩粒细胞，使得实验室必须对报警的标本保持相当高复检率，否则即可能造成漏诊。为了精确定量地检测白细胞的五种成分各种五分类血液分析仪开始采纳不同于三分群仪器的

48、检测原理以探明除了细胞体积大小以外的信息，如形状、内容物含量、空度等，从而能够取得准确的分类结果。这些新的分类原理，要紧包括物理学原理、化学原理和细胞生物学原理。在物理学原理中，除了电阻抗原理之外，用的最多的是光散射技术，以及高频波技术（也有称射频波1BeckmanCoulter公司通过以上各种物理方法的综合运用来检测白细胞五项分类，称为VCSO技术（Volune,Conductivity,Scatter,Opacity而Abbott公司则除了采纳电阻抗原理检测白细胞总数以外，还通过不同角度的散射光技术对五项分类进行检测，称为多角度偏振光散射分类（MAPSS）技术。而SYSMEX公司在采纳电阻

49、抗原理、射频技术、光散射技术以外，为了提高在白细胞中比例最小的嗜碱性细胞的分类准确性，在白细胞分类检测通道以外还单独设置了嗜碱性细胞检测通道，通过特异性的化学溶解方法只保留嗜碱性细胞，再通过不同角度的光散射法检测。关于另外一种比例专门小的嗜酸性细胞，还在分类通道中加入细胞颗粒染色以提高光散射信号的辨识能力。Bayer公司在五分类仪器中，除了光散射法以外，也加入了过氧化物酶染色技术进行细胞分类，关于嗜碱性细胞也设置了单独的检测通道和专门溶解技术。关于正常五项分类结果准确性，各大血液分析仪厂家关注的焦点要紧是数目最少的嗜酸性和嗜碱性细胞。此外，关于外周血中的稚嫩成份，过去还依靠于显微镜镜检。然而，

50、一样血液分析仪对专门标本报警的灵敏度有限，常常造成漏报。或者为了减少这种情形而提高阳性报警率（通过降低仪器报警的阈值），提高了复片的比例从而造成假阳性率偏高，失去了过筛的意义。甚至在实际工作中，由于人手不足或责任心不强，关于一些阳性报警的标本没有认真复片，或限于体会的不足无法准确进行细胞形状学的观看造成漏诊。鉴于以上这些问题，近年来有制造商开始致力于通过化学染色方法对稚嫩成份的标本进行自动化检测，这相关于一样的阳性报警（即提供一种可能性）要进步了专门多。关于红细胞系统,各大厂家都有仪器进行网织红细胞检测，提供定量的参数甚而能够对其成熟度作进一步的分类。然而，网织红检测功能也有半自动和全自动之分

51、，即标本需要手工添加染色试剂处理后上机或是直截了当通过仪器染色检测。关于更稚嫩的红细胞系统，有核红细胞，目前也有仪器通过核酸染色进行检测。如SYSMEXXE-2100,AbbottCD4000o在白细胞中，稚嫩成份依照形状学的不同包括原始细胞、核左移细胞、稚嫩粒细胞、专门/异型淋巴等。SYSMEXXE-2100通过单独的稚嫩细胞检测通道并采纳特异性的化学溶解法保留稚嫩细胞，破坏其他细胞，再通过射频技术、电阻抗原理进行检测，各种稚嫩白细胞的检测灵敏度大大提高。而在分类通道中，核酸荧光染色的应用使稚嫩粒细胞的定量测定成为现实。BayerADVIA120则通过过氧化物酶染色技术能够区分出大的未染色细

52、胞（要紧为原始、异淋细胞尽管技术的进步使血液分析仪检测的参数越来越多，对专门标本的检测、报警能力也越来越强，然而所有制造商仍旧宣称仪器在实验室内起的是过筛作用，仪器提供各种报警信息（Flag）供操作人员镜检复核。能否有效检测包括稚嫩细胞在内的所有细胞，是今后血液分析仪的一个进展方向。血液分析仪进展的另一个趋势是：面对大型实验室和小型实验室的不同需求来进展。针对大型医院，仪器的处理速度可超过100个标本/小时,配备自动进样装置，且能够实现不同检测模式的标本（如CBC、CBC+DIFF、RET等）之间仍选进样，如SYSMEXXE-2100每小时能够处理150个标本，BayerADVIA120每小时

53、处理120个标本，BeckmanCoulterLH750每小时处理105个标本。这些大型的血液分析仪，都能够配置自动推片染色装置以实现玻片制备和标本染色的全过程自动化。而试验室网络化治理的进展，也要求这些血液分析仪具备数据输出联网的功能"也们的数据操作系统一样均为WindowNT或2000平台。反之，针对小型医院血液分析自动化的需求，也有小型化的仪器面世。ABXPENTRA60是每小时处理60个标本的五分类仪器，适合于我国县级基层医院的需求。SYSMEX新推联网等功能，能出的pocH-100i三分类仪器速度约28个/小时，然而具备鞘流技术、中文显示、娄够为基层医院或临床科室床边诊断所有。综上所述，随着血液分析仪的不断进展，新仪器不断叠现，实验室工作人员有必要了解把握血液分析仪的差不多分析技术和原理提高血液分析仪在临床试验室诊断中的应用水平，更好地为临床第一线服务。二、仪器的分析技术血液分析仪所能检测到的血液学参数，要紧为红细胞、血小板、白细胞、血红蛋白，以及通过对红细胞脉冲经运算机运算累计而得来的红细胞压积，以及