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文档简介

1、（20 -20 学年第 学期）姓名_班级_学号_实验项目成绩实验准备实验一：大肠杆菌感受态细胞的制备与转化实验二：大肠杆菌质粒DNA的提取实验三：琼脂糖凝胶电泳实验四：大肠杆菌基因组DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳实验五：质粒DNA限制性内切酶实验及琼脂糖凝胶电泳实验六：聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因及琼脂糖凝胶电泳总评成绩_指导教师_实验二：大肠杆菌质粒DNA的提取实验时间_年_月_日一、实验目的二、实验原理三、实验仪器与材料四、实验步骤五、实验结果与分析思考题：1、碱法提取质粒DNA时应注意哪些问题？溶液、的作用分别是什么？溶液：50mmol/L葡萄糖，25mmol/L Tris

2、3;Cl（pH8.0），10mmol/L EDTA（pH8.0）。溶液：0.2mol/L NaOH，1%SDS。溶液：5mol/L KAc 60mL，冰醋酸11.5mL，H2O 28.5mL，定容至100mL。2、描述质粒DNA电泳图谱，并解释可能产生的现象及原因。实验三：琼脂糖凝胶电泳实验时间_年_月_日一、实验目的二、实验原理三、实验仪器与材料四、实验步骤思考题：1、DNA在琼脂糖凝胶中的电泳迁移速率的影响因素有哪些？2、试说明琼脂糖凝胶电泳与你在生化实验中所学的聚丙烯酰胺凝胶电泳有何区别。实验五：质粒DNA限制性内切酶实验及电泳鉴定实验时间_年_月_日一、实验目的二、实验原理三、实验仪器

3、与材料四、实验步骤五、实验结果与分析思考题：1、重组实验中常用的酶有哪几类？分别起什么作用？2、利用限制性内切酶消化DNA时应注意哪些问题？为什么酶的使用量一般不能超过反应体系总体积的10%？如果酶加的过多会造成什么后果？3、DNA酶切反应不彻底的电泳图谱是怎么样的？DNA若发生降解，酶切图谱又如何？实验六：聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因实验时间_年_月_日一、实验目的二、实验原理三、实验仪器与材料四、实验步骤五、实验结果与分析思考题：1、降低退火温度对PCR结果有何影响？延长变性时间对PCR结果有何影响？循环次数是否越多越好？为什么？2、试分析没有PCR产物生成的可能原因。3、在PCR产物分析时发现，除了目的产物带外，还存在其他的非目的产物条带，试

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