抗生素4pp课件

1、 抗生素生产抗生素生产沙土孢子沙土孢子冷冻孢子冷冻孢子斜面孢子斜面孢子种子（液）种子（液）种子（固）种子（固）种子罐种子罐种子罐种子罐发酵罐发酵罐菌种筛选菌种筛选摇瓶实验发酵罐实验1 菌种选育v抗生素工业生产的三个主要环节 菌种选育、发酵、提炼 青霉素发酵： 2u/ml250u/ml1000u/ml80000u/ml 1929年 1943年 1945年 现在v选育(mutation and selection): 菌种经过诱变因素处理，然后用随机方法或理性的方法进行筛选，获得目的菌种菌种选育技术 v经验育种：自然选育、诱变育种v现代菌种选育：杂交育种、原生质体融合、分子育种自然选育v利用微生物

2、在一定条件下产生自发突变的原理，通过分离，筛选排除衰退型菌株，从中选择维持原有生产水平的菌株 v是一种纯种选育的方法 诱变育种v利用诱变剂处理微生物群体，使其中部分细胞的遗传物质结构发生改变，从而引起微生物性状发生改变，然后从群体中筛选出目的菌株的过程v特点：速度快、收效大、方法简便 缺乏定向性、工作量大v主要包括出发菌株的选择、诱变处理和筛选突变株三个部分出 发 菌 种 ( 沙 土 管 或 冷 冻 管 ) 原 种 特 性 考 察 斜 面 或 肉 汤 培 养2 4 h 单 孢 子 悬 液 细 菌 悬 液 诱 变 处 理 处 理 前 后 的 孢 子 液 或 细 菌 悬 液 作 活 菌 计 数 并

3、 统 计 其存 活 率 稀 释 涂 布 平 皿 观 察 单 菌 落 形 态 并 统 计 其 形 态 变 异 率 挑 取 单 菌 落 传 种 斜 面 摇 瓶 初 筛 对 照 组 挑 出 高 产 斜 面 传 种 斜 面 摇 瓶 复 筛 ( 重 复3 5 次 ) 对 照 组 挑 出 高 产 菌 株 作 稳 定 性 试 验 和 菌 种 特 性 考 察 放 大 中 试 考 查 ， 保 藏 菌 种 大 型 投 产 试 验 诱变剂v凡能显著提高生物体突变频率的各种因素都称为诱变剂v 诱变剂种类：v1.物理诱变剂：主要包括紫外线（uv）、x射线（xray）、射线(-ray)、快中子(fn)、射线、超声波、激光

4、等。 紫外线胞嘧啶光化产物v形成胸腺嘧啶二聚体形成胸腺嘧啶二聚体 影响影响dna复制复制ctaggatcctaggatc紫外线紫外线紫 外 线 2.化学诱变剂v烷化剂：亚硝基胍、甲基磺酸、亚硝酸等v碱基类似物： 5-溴尿嘧啶、 6-氨基嘌呤等v嵌合剂：吖啶类染料、溴化乙锭等v抗生素：丝裂霉素c 、放线菌素d等 烷化鸟嘌呤与胸腺嘧啶错误配对烷化鸟嘌呤与胸腺嘧啶错误配对3.生物诱变剂v噬菌体：溶源性噬菌体v转座因子影响诱变效果的因素1、选择合适的出发菌株v即通过选育能有效提高目标产物产量的菌株v用作诱变的出发菌株必须产量高，对诱变剂的敏感性大，变异幅度大2、采用分散状态的孢子悬浮液处理3、采用单核细胞（或核质体）处理4、注意微生物的生理状态v对数期的细菌、霉菌或放线菌的分生孢子稍稍萌发5、适宜的诱变剂量v同一诱变剂一次使用、先后多次使用v不同诱变剂同时使用、先后多次使用等v诱变剂的复合处理常常呈现一定的协同效应