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文档简介

1、胶体金技术的发展原理及制备方法1971年Faulk和Taylor首先将胶体金应用于免疫细胞化学研究，了间接免疫金染色法，从此胶体金作为新型的免疫标记技术得到迅速发展。由胶体金标记技术发展起来的胶体金免疫快速诊断技术主要有两种：1974 年 Romanc建立快速斑点免疫金渗 滤法和胶体金免疫层析法。后者具有操作简便（浸入液体中就行）、快速（全程 搞定）、无需仪器设备（结果目测就0K、试剂稳定、成品易于保存（保质期优点，是科学研究和临床诊断的有力工具。510分钟12年）等胶体金试g琢圖右金试纸卡胶体金（colloidal gold ）即胶体状态的金单质，因为其单质粒径非常小可以分散于溶 液中形成胶

2、体，故名胶体金。胶体金的常规制备方法是用还原剂还原氯金酸（HAuCk,橘黄色晶体，易潮解，氯金酸合成见下图）里的金元素形成金胶体颗粒。这种胶体颗粒在碱性环 境下带上负电荷，可与蛋白质的正电荷基团牢固结合，对蛋白进行标记，用于后续的检测， 如制成胶体金试纸条（卡）进行物质的检测。王水Aqua regia）V鮭馥W浓谓萨3:1Au+HNOs+AHCI-HAtiCU+NIO t +2巴0S金酸氯金酸制&反应式还原氯金酸的化合物很多，通常我们选择柠檬酸三钠（NaGHOr 2H2O。当用1%宁檬酸三钠还原100 mL 0.01%金氯酸时，不同体积比可以得到不同粒径和颜色的胶体金哦！V还原剂（ml

3、胶体金呈色162.00»50-45紫灰1470.30蓝灰制备胶体金步骤简单（见下图），重点是制备过程所用到的材料都必须是彻底清洁的。例如水至少是双蒸水， 玻璃棒、玻璃容器等要酸洗后冲洗干净并且最好是硅化的，制备好的胶体金可以加入 0.02 % NaN3在洁净玻璃容器内长期存放。100 mt 0.01 > HAuCI曲盘沸越搅动边Ou A1b柠檬酸三钠涪液堆续点沸15m in水帝液坝偵山淡黄&辿速变为股色.然后变対阳色.锻后稳亡成红色.变色过*¥约2 3 min冷却毎室温G M収蒸水恢V至原体fU胶体金的制备方法适合于胶体金试纸条（卡）的胶体金粒径在2040 n

4、m之间为宜，制备的胶体金溶液呈红色，胶体金被置于试纸条（卡）的样品垫下游。当液体样品滴加后，液体溶解胶体金并带 动其与样品中的抗原（抗体），在硝酸纤维素膜的毛细作用下从一端慢慢渗移到吸收垫一端， 利用抗体/抗原特异性结合及胶休金的显色（红色）反应，可以检测抗原/抗体存在与否。胶体金试纸条（卡）主要分为双抗夹心法和竞争法两类，前者适合检测大分子物质，后者适合检测小分子物质。两种试纸条（卡）的原理见下图：抗握对；将畀悝抗坏1 （金标）T抗金标抗韩 丁抗悻討：特异性抗枠2世 5双抗体夹心法（检测抗原）i标杭ffAJ 抗 jsb 抗金标抗原抗侔 抗A* B抗体3 0 ? fm c筑i MP戏抗原夹心法（检测抗体抗« （呼分子）丄金标抗体T抗SS抗厲0 flK抗原：Jfi 3抗原竞争法（检测勺汾子物质除了

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